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罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量 PCR 仪综合介绍

2025-08-20

罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量 PCR 仪综合介绍

一、品牌背景与产品定位

罗氏(Roche)是分子诊断与生命科学领域的全球领先企业,其 LightCycler® 系列实时荧光定量 PCR 仪自问世以来,在科研和临床分子检测中都享有很高的声誉。LightCycler® 96 作为该系列的重要型号,凭借 96 孔标准板设计、灵敏的光学检测系统、直观的操作平台和可靠的温控性能,成为许多中型实验室、教学科研机构以及临床分子检测实验室的核心设备。

与 LightCycler® Nano 或 LightCycler® 480 相比,LightCycler® 96 定位于 中等通量需求,既能够覆盖常规科研与基因表达研究,也适合中小型临床实验室的病原体检测和遗传分析。


二、工作原理与系统架构

  1. 实时检测机制
    PCR 扩增过程中,通过荧光染料(如 SYBR Green)或特异性探针(如 TaqMan 探针)发出的信号实现实时监控。LightCycler® 96 通过光学检测模块,精确记录每一个循环的荧光强度,从而得到扩增曲线和定量数据。

  2. 光学检测系统

    • 配备高性能 LED 光源,发射光稳定性强。

    • 内置多通道滤光系统,可同时检测 4 种荧光信号,支持多重反应。

    • CCD 相机捕捉信号,灵敏度高,即使低拷贝模板也可检测。

  3. 温控模块

    • 基于 Peltier 半导体制冷/加热技术,温度控制精确,升降温速度快。

    • 96 孔板间的温度均一性良好,保证了不同孔位之间扩增结果的一致性。

  4. 软件与数据处理

    • LightCycler® 96 软件具备自动化设定功能,可一键生成标准 PCR 程序。

    • 内置多种分析工具,包括 绝对定量、相对定量、熔解曲线分析、基因分型判定 等。

    • 图形化界面友好,数据可直接导出为 Excel、PDF 或图像格式,方便科研论文撰写和报告生成。


三、核心性能特点

  1. 96 孔板格式
    符合国际标准,可与常规移液器、自动化加样系统兼容,提高实验灵活性。

  2. 多通道检测
    最多支持 4 种不同荧光染料的同步检测,适合多靶标基因的检测。

  3. 快速反应体系
    得益于优化的温度控制和检测系统,标准扩增反应可在 40 分钟—1 小时内完成。

  4. 高分辨率熔解曲线分析(HRM)
    能够分辨单核苷酸多态性(SNP)、突变和甲基化差异,常用于分子遗传学研究。

  5. 强大的数据分析能力
    自动 Ct 值判定,提供标准曲线、差异表达倍数分析和基因型分类结果。

  6. 用户友好性

    • 触控式界面,操作简单直观;

    • 软件支持云端数据共享,适合团队合作。


四、应用领域

  1. 临床分子检测

    • 病毒核酸定量检测(如 HBV、HCV、HIV、新冠病毒 SARS-CoV-2)。

    • 遗传病突变筛查,如地中海贫血携带者检测。

    • 肿瘤相关基因的分型与突变分析。

  2. 科研领域

    • 基因表达定量分析(qPCR)。

    • 转录调控与表观遗传学研究。

    • 动植物病原体检测与基因多态性研究。

  3. 食品与农业

    • 转基因作物成分检测(Bt 基因、耐除草剂基因)。

    • 食品安全检测与动物疫病监控。

  4. 药物研发

    • 药效学与毒理学相关基因检测。

    • 临床试验中分子生物标志物的动态监控。


五、LightCycler® 96 与其他型号的对比

型号通量通道数适用范围特点
LightCycler® Nano32 孔2 通道小型科研/教学体积小,便于教学
LightCycler® 9696 孔4 通道中小型实验室稳定可靠,数据处理灵活
LightCycler® 48096/384 孔6 通道高通量科研与临床可扩展性强,适合大规模研究

从对比中可以看出,LightCycler® 96 定位清晰,特别适合 科研与临床应用兼顾的实验室


六、用户体验与操作流程

  1. 样品准备
    使用标准 96 孔板,添加反应体系与样本,操作简便,兼容常规移液工具。

  2. 实验设置

    • 软件提供预设模板,用户可快速选择实验模式。

    • 支持自定义扩增程序和荧光检测参数。

  3. 运行与监测

    • 扩增过程中实时显示曲线。

    • 用户可随时监控 Ct 值变化和扩增效率。

  4. 结果分析

    • 自动生成扩增曲线、熔解曲线和结果判定。

    • 一键导出数据,支持 PDF、Excel 等多种格式。


七、售后与支持

罗氏为 LightCycler® 96 提供完善的售后保障:

  • 安装与调试:由工程师上门安装,确保设备运行稳定。

  • 培训服务:提供操作培训与实验方案指导。

  • 质保与维修:通常提供三年质保,期间免费更换主要部件。

  • 耗材供应:配套试剂、荧光染料、耗材齐全,确保实验连续性。


八、总结与展望

罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量 PCR 仪凭借 高通量、稳定性、智能化软件分析 等优势,已成为众多实验室在分子诊断、基因研究和食品安全检测中的核心设备。其定位介于入门型与高端型之间,不仅满足科研实验室对数据可靠性的需求,也兼顾临床检测对效率与精度的要求。

随着精准医学与分子诊断的发展,LightCycler® 96 有望继续在基因检测、个体化医疗和公共卫生监测中发挥更重要的作用。


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