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什么是罗氏Roche实时荧光量PCR仪

2025-08-20

罗氏(Roche)实时荧光定量PCR仪(通常简称为qPCR仪,代表机型如 LightCycler 系列:LightCycler 96、LightCycler 480 II 等),是一类应用在分子生物学和医学检测中的高精密实验仪器。它结合了 聚合酶链式反应(PCR)荧光探针检测技术,能够在扩增过程中实时监测目标核酸(DNA 或 RNA)的数量,因此被广泛用于科研与临床。

我帮您整理一下它的核心要点:


1. 基本原理

  • PCR扩增:通过高温变性、退火和延伸循环,使目标核酸序列被指数扩增。

  • 荧光监测:在每个循环中使用荧光染料(如SYBR Green)或特异性荧光探针(如TaqMan探针)与扩增产物结合。

  • 实时检测:仪器内置光学检测系统记录荧光信号强度,软件将其转化为扩增曲线,从而计算样品中目标序列的初始拷贝数。


2. Roche qPCR仪的主要特点

  • 灵敏度高:可检测极低拷贝数的核酸,定量范围广。

  • 重复性好:光学检测与温控系统精度高,保证结果稳定。

  • 通量多样:如LightCycler 96适合常规实验室中等通量需求,LightCycler 480 II则支持96孔和384孔板,适合高通量检测。

  • 多重检测:可同时在多个通道(不同波长)检测多种荧光标记,实现多基因/多目标分析。

  • 应用软件:配套Roche分析软件,可进行定量分析、熔解曲线分析、基因分型和突变检测。


3. 主要应用

  • 基础研究

    • 基因表达定量(mRNA水平检测)

    • microRNA 检测

    • 基因突变、拷贝数变异研究

  • 医学临床

    • 病原体检测(如新冠病毒、流感病毒、结核分枝杆菌等)

    • 遗传病基因检测

    • 癌症分子标志物检测

  • 其他领域

    • 食品安全(转基因检测、致病菌检测)

    • 环境检测(水体、土壤中的微生物分析)


4. 优势

  • 快速:扩增和检测同步进行,实验周期大幅缩短。

  • 准确:实时曲线与阈值循环数(Ct值)可实现绝对定量或相对定量。

  • 高效:一个反应即可同时完成扩增和定量,避免了传统PCR后电泳的耗时步骤。


 总结来说,罗氏Roche实时荧光定量PCR仪是一种高精度、高灵敏度的核酸定量检测平台,它不仅是科研实验室分子检测的“标配”,也是临床诊断和公共卫生监测的重要工具。


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