罗氏实时荧光定量PCR仪参数
罗氏 Roche 实时荧光定量PCR仪 的主要参数。不同型号(如 LightCycler 96、LightCycler 480 II)在配置上略有差别,但整体技术指标有共性。我分为 通用参数 和 代表型号参数 两部分说明:
检测原理:实时荧光定量 PCR(qPCR),通过荧光信号监测 DNA/RNA 扩增过程。
反应通量:支持 96 孔或 384 孔 PCR 反应板。
温控系统:
升温速率:≥ 4.4 °C/s
降温速率:≥ 2.2 °C/s
温控精度:± 0.1 °C
温度均一性:≤ ± 0.4 °C(跨孔)
荧光检测:
多通道光学系统(支持 4–6 种荧光染料)
检测波长范围:450–710 nm
支持 SYBR Green、TaqMan 探针、多重荧光检测
定量范围:可检测 1–10¹⁰ 拷贝的核酸。
结果分析:
Ct(阈值循环数)计算
绝对定量 / 相对定量
熔解曲线分析
基因分型(SNP)
软件:Roche LightCycler 专用分析软件,支持 Windows 系统,结果导出 Excel/PDF。
反应孔板:96 孔板
温控范围:37–99 °C
升温速率:4.4 °C/s
检测通道:4 个荧光通道(FAM/HEX/ROX/Cy5 等)
检测灵敏度:单拷贝灵敏度检测
数据采集:每循环均可实时采集荧光
应用场景:常规基因定量、转录组研究、病原体检测
反应孔板:可兼容 96 孔或 384 孔反应板
温控范围:37–99 °C
升温速率:4.8 °C/s
光学系统:6 个荧光检测通道
光源:高强度氙灯(或 LED 光源,具备长寿命与稳定性)
数据处理:支持多重 PCR、基因分型(SNP)、熔解曲线高分辨率分析(HRM)
应用场景:高通量检测、大规模基因表达分析、分子诊断研究
高通量:兼容 96/384 孔板,适合科研与临床大样本检测。
高精度:温控均一性好,确保重复性。
多重检测:一个反应体系即可检测多种基因或病原体。
灵活应用:科研(基因表达、突变检测)、医学(肿瘤标志物、传染病)、食品安全和环境检测。