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罗氏实时荧光定量PCR仪参数

2025-08-20

罗氏 Roche 实时荧光定量PCR仪 的主要参数。不同型号(如 LightCycler 96LightCycler 480 II)在配置上略有差别,但整体技术指标有共性。我分为 通用参数代表型号参数 两部分说明:


一、通用核心参数(适用于 Roche LightCycler 系列)

  1. 检测原理:实时荧光定量 PCR(qPCR),通过荧光信号监测 DNA/RNA 扩增过程。

  2. 反应通量:支持 96 孔或 384 孔 PCR 反应板。

  3. 温控系统

    • 升温速率:≥ 4.4 °C/s

    • 降温速率:≥ 2.2 °C/s

    • 温控精度:± 0.1 °C

    • 温度均一性:≤ ± 0.4 °C(跨孔)

  4. 荧光检测

    • 多通道光学系统(支持 4–6 种荧光染料)

    • 检测波长范围:450–710 nm

    • 支持 SYBR Green、TaqMan 探针、多重荧光检测

  5. 定量范围:可检测 1–10¹⁰ 拷贝的核酸。

  6. 结果分析

    • Ct(阈值循环数)计算

    • 绝对定量 / 相对定量

    • 熔解曲线分析

    • 基因分型(SNP)

  7. 软件:Roche LightCycler 专用分析软件,支持 Windows 系统,结果导出 Excel/PDF。


二、代表型号参数

1. LightCycler 96

  • 反应孔板:96 孔板

  • 温控范围:37–99 °C

  • 升温速率:4.4 °C/s

  • 检测通道:4 个荧光通道(FAM/HEX/ROX/Cy5 等)

  • 检测灵敏度:单拷贝灵敏度检测

  • 数据采集:每循环均可实时采集荧光

  • 应用场景:常规基因定量、转录组研究、病原体检测


2. LightCycler 480 II

  • 反应孔板:可兼容 96 孔或 384 孔反应板

  • 温控范围:37–99 °C

  • 升温速率:4.8 °C/s

  • 光学系统:6 个荧光检测通道

  • 光源:高强度氙灯(或 LED 光源,具备长寿命与稳定性)

  • 数据处理:支持多重 PCR、基因分型(SNP)、熔解曲线高分辨率分析(HRM)

  • 应用场景:高通量检测、大规模基因表达分析、分子诊断研究


三、主要优势

  • 高通量:兼容 96/384 孔板,适合科研与临床大样本检测。

  • 高精度:温控均一性好,确保重复性。

  • 多重检测:一个反应体系即可检测多种基因或病原体。

  • 灵活应用:科研(基因表达、突变检测)、医学(肿瘤标志物、传染病)、食品安全和环境检测。


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