一、概述

实时荧光定量 PCR 技术凭借其灵敏度高、特异性好和结果可量化的特性，已成为分子生物学及临床检测领域的基本工具。随着科研项目预算压力增大和实验室升级需求增加，二手 qPCR 仪器的市场需求不断增长。采购二手仪器不仅能有效控制成本，还可在短时间内补充实验通量。本文将对市面上主流品牌及机型进行梳理，并就选购、验收与维护要点提出参考意见。

二、主流品牌与代表机型

1. Roche（罗氏）

• 主要机型

• LightCycler 96／480 系列

• Cobas Z 480

• 特点简述

• 兼容 96 孔和 384 孔板，可满足中低及中高通量需求；

• 温控均一性与灵敏度检测经多家实验室验证；

• 软件支持多种分析方法，包括 ΔΔCt、标准曲线法、熔解曲线分析和 SNP 分型；

• 可选配梯度模块与自动化接口。

• 应用领域

• 基因表达研究、病原体快速检测、基因分型、表观遗传学等。

2. Thermo Fisher Scientific（热电/应用生物）

• 主要机型

• Applied Biosystems 7500／7500 Fast

• StepOne／StepOne Plus

• QuantStudio 系列（QS 3、QS 5、QS 6、QS 7、QS 12）

• 特点简述

• 机型覆盖从低通量到高通量，满足多种实验规模；

• QuantStudio 系列在软件界面中增加多组学数据管理模块；

• 兼容多种板式，包括 96 孔、384 孔、条管和芯片格式；

• 内置快速扩增程序，可在短于 30 分钟内获取初步定性结果。

• 应用领域

• 临床诊断、药物筛选、环境微生物检测、食品安全监控等。

3. Bio-Rad（伯乐）

• 主要机型

• CFX96 Touch／CFX384 Touch

• CFX Opus 系列

• 特点简述

• 模块化设计，故障时可拆卸更换探测或温控模块；

• 数据分析软件支持多维热图、3D 聚类等高级可视化；

• 样本架采用金属底盘加密封圈设计，增强温度传输效率；

• 通讯接口包括 USB 与以太网，可接入 LIMS。

• 应用领域

• 基因表达定量、拷贝数变异、SNP 分型、高通量转基因检测等。

4. Qiagen（凯杰）

• 主要机型

• Rotor-Gene Q／Rotorgene Q MDx

• 特点简述

• 旋转式样本架，通过连续旋转实现孔间温度均一；

• 适合小体积（≤10 µL）反应，可节省试剂；

• 软件界面支持熔解曲线和 HRM（高分辨率熔解）分析；

• 设备体积较小，便于在有限空间内部署。

• 应用领域

• DNA 甲基化分析、快速病原体检测、微生物多样性研究等。

5. Agilent Technologies（安捷伦）

• 主要机型

• AriaMx

• Stratagene Mx3005P

• 特点简述

• 多通道激发光源与光电二极管探测器组合；

• 支持 384 孔板格式，并兼容 96 孔和条管模式；

• 软件包含标准曲线生成、定量 PCR 报告模板和批量导出功能；

• 通讯接口丰富，可实现远程访问与数据备份。

• 应用领域

• 转基因农产品检测、病毒载量监测、基因敲降实验等。

6. Eppendorf（埃本）

• 主要机型

• Mastercycler ep Realplex／Realplex2

• 特点简述

• 操作界面简洁，上手较快；

• 温控模块与光学模块分离设计，模块更换方便；

• 支持中通量 96 孔板，部分型号可作梯度 PCR；

• 软件输出格式兼容主流文档与图像格式。

• 应用领域

• 基础科研、小规模临床检测及教学实验室等。

7. Takara Bio（塔克拉）

• 主要机型

• TP800／TP9600

• 特点简述

• 机型针对分子生物学实验室优化，对接多种试剂体系；

• 支持反转录一体化反应和快速 PCR 模式；

• 软件中内置常用引物库和试剂配方推荐；

• 价格相对合理，性价比与整机维护成本具竞争力。

• 应用领域

• miRNA 分析、cDNA 合成后定量、临床快速筛查等。

8. Analytik Jena（雅纳）

• 主要机型

• qTOWER 系列

• 特点简述

• 提供单板、条管、芯片多种样本支持方式；

• 用户可在实验中实时切换荧光通道；

• 软件支持批量实验管理、数据归档和报告定制；

• 设备维护简便，耗材成本控制在合理范围。

• 应用领域

• 环境监测、微生物定量、表观遗传学等。

9. 国产及区域品牌

• Sansure（圣湘）：SLAN-96P／SLAN-384P，主要面向临床分子诊断市场，支持多重病原体检测。

• Hengyi（恒逸）：Gentle 96／Gentle 384，聚焦高校及地方检验所，提供维护包与质控服务。

• GeneScript（金斯瑞）：部分型号整合核酸提取与 qPCR 功能，适合一站式实验平台。

三、选购与验收要点

成本与预算考虑

1. 购置费用

• 二手 qPCR 仪器价格受机型、使用年限、配件完整性及保修条款影响，通常为全新设备的 40%–70%；

• 热门机型（如 LightCycler 480、CFX96 Touch）因需求量大，二手价格相对稳定；

• 区域品牌及早期型号的折扣幅度更大，但需结合维护成本一并评估。

2. 运行成本

• 试剂耗材：低漂白孔板与专用封板膜单价较高，若年运行量大，可与耗材供应商协商批量折扣；

• 能耗：实时 qPCR 仪器功耗集中在温控和光学系统，24 小时待机会增加电费支出；

• 维护保养：定期校准、光源更换及 Peltier 模块检修，建议预留年度维护预算的 5%–10%。

3. 折旧与残值

• 实验室财务可根据预计使用年限（通常为 5 年）线性折旧；

• 维护完好、定期校准的设备在未来转售时，残值可保持在购置价的 30% 左右。

4. 综合评估

• 将购置费、运行成本、维护费和潜在残值合并计算全生命周期成本（LCC），以便在多款备选机型中做出决策；

• 对于预算紧张且通量需求中等的实验室，二手机型与全新中低端机型的 LCC 往往相近，可灵活权衡。

八、法规及认证要求

1. 质量管理体系

• 实验室若需通过 ISO 17025、ISO 15189 或 GLP/GMP 认证，二手设备必须出示最近一次校准报告及维护记录；

• 建议与卖方签订设备性能保证协议，明确设备核心部件的质保范围和响应时间。

2. 生物安全和数据安全

• 设备上运行的 qPCR 软件应符合实验室信息管理系统（LIMS）接口规范，包含用户权限管理与操作日志记录；

• 如用于病原体检测，须确保样本处理区域与设备摆放区域符合生物安全柜操作规范，避免交叉污染。

3. 软件与固件合规

• 二手仪器的软件授权需合法转让，并保证后续升级与补丁支持；

• 符合国家及地区的数据保护法规（如 GDPR、HIPAA）要求的数据加密与备份机制。

九、未来发展趋势

1. 微流控与数字 PCR 整合

• 越来越多的 qPCR 平台在设计时考虑与微流控芯片或数字 PCR 模块兼容，以提升灵敏度并降低反应体系体积；

• 二手仪器若支持外接芯片模块，可在常规 qPCR 基础上开展更精细化的数字定量研究。

2. 自动化与机器人对接

• 实验室自动化程度提高，液体处理机器人与 qPCR 仪对接成为常态；

• 选购二手设备时，应预留机械臂抓取板架的空间和接口，以减少手动操作误差。

3. 数据分析云端化

• 趋势向云平台迁移，数据存储与分析在网络环境下完成；

• 支持云端分析的软件授权与网络安全合规将成为二手设备评估的重要指标。

4. 荧光染料谱系扩展

• 新一代荧光探针和染料不断推出，能够实现更多重检测和更低背景信号；

• 二手设备的滤光片和光源是否可升级或更换，将影响未来实验拓展能力。

十、结语

在选购二手实时荧光定量 PCR 仪器时，品牌、机型和核心性能指标只是决策的一部分。结合实验室的通量需求、预算规划、维护能力以及未来技术路线，才能确保设备在整个使用周期内保持稳定运行，产出可靠数据。通过详尽的验收测试和完善的售后协议，二手 qPCR 仪同样能够为基因表达分析、病原体检测、表观遗传学研究等领域提供支持。希望本文对实验室决策者在二手 qPCR 平台选型、验收与维护方面提供具体参考。若有更多具体机型或采购流程方面的问题，欢迎进一步咨询。