一、引言

随着分子生物学技术的不断发展，实时荧光定量PCR（qPCR）已成为基因表达分析、病原体检测、SNP 分型、拷贝数变异等研究和临床诊断的重要工具。罗氏（Roche）生产的实时荧光定量PCR仪以其稳定的温度控制系统、灵敏的荧光探测模块以及完善的软件平台而获得广泛认可。本文围绕一台二手罗氏实时荧光定量PCR仪，从设备概览、主要性能、技术优势、典型应用、操作维护、使用案例和售后支持等方面进行详细介绍。

二、设备概览

二手罗氏实时荧光定量PCR仪保留了原厂出厂时的全部核心组件，采用了模块化设计。仪器外观结构与全新机型一致，由机箱主机、光学检测系统、触摸屏控制单元以及配套电源组成。主机内部包括精准的热循环模块和多通道荧光探测器，可支持 FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5 等常见荧光染料。配合罗氏专用软件，可一次性检测多达 96 个样本，每个样本可进行 1–5 个通道的数据采集与分析。

三、主要性能参数

1. 温控精度： ±0.1 ℃；

2. 温度均一性： ≤ 0.3 ℃；

3. 升降温速率： 5 ℃/s（从 60 ℃ 到 95 ℃）；

4. 光学通道： 4 通道；

5. 检测灵敏度： 可检出单拷贝水平的核酸；

6. 通量： 96 孔板，支持半板、条管以及单管检测；

7. 重复性： Ct 值标准差 ≤ 0.1；

8. 数据输出： CSV、PDF、Excel、图表等多种格式；

9. 软件功能： 定性/定量分析、熔解曲线分析、相对定量、绝对定量、SNP 分型等。

四、技术优势

1. 精确温控系统

• 采用双闭环 PID 算法，实时监控模块温度，保证反应过程中温度偏差最小化；

• 多点温度反馈设计，自动校准温差，增强检测重复性。

2. 多通道荧光检测

• 光电探测器灵敏度高，自动背景扣除，信噪比达 1:1000；

• 通道切换速度快，荧光信号采集时延低于 10 ms。

3. 软件平台

• 界面简洁；反应设置向导化，减少操作失误；

• 支持直观的实时扩增曲线、标准曲线及熔解曲线分析；

• 内置多种分析模板，可自定义报告内容及格式。

4. 模块化设计

• 可更换光源灯泡与探测器模块，维修时无需更换整机；

• 通用电源接口，适应宽电压环境。

五、典型应用场景

1. 基因表达定量

• 利用荧光标记引物或探针，精准评估基因在不同组织或处理条件下的表达差异；

2. 病原体快速检测

• 新冠病毒、流感病毒、结核分枝杆菌等病原微生物的定性与定量检测；

3. 转基因作物检测

• 检测样本中转基因片段的存在与数量；

4. SNP 分型与拷贝数变异

• 配合特异性探针，实现单核苷酸多态性位点分型与拷贝数差异检测；

5. 临床诊断与科研

• 肿瘤标志物检测、脱氧核糖核酸甲基化分析、miRNA 表达谱研究等。

六、操作与维护

1. 日常开机检查

• 检查电源线与机箱接口是否紧固；

• 打开软件，查看系统自检结果；

2. 试剂和耗材

• 建议使用罗氏或经授权的兼容品牌试剂盒；

• 96 孔板、光学封板膜应选用低荧光漂白材料；

3. 日常清洁

• 定期用 70% 乙醇清洁样本架与盖板；

• 光学窗口每月检查一次，如有尘埃用专业镜头纸擦拭；

4. 定期校准

• 建议每半年进行温度与荧光系统校准；

• 可联系专业技术服务商或实验室内部质控组执行；

5. 故障处理

• 软件出现异常时，可重启主机或重新安装软件；

• 硬件报警提示时，可参考说明书或联系售后支持。

七、二手设备验收要点

1. 外观检查： 无明显磕碰、划痕；机箱固定螺丝完好；

2. 温控测试： 可通过标准试剂盒或 DNA Ladder 验证升降温速率及均一性；

3. 荧光灵敏度测试： 使用低浓度荧光标准品检测信号变化曲线；

4. 软件运行： 载入模板、编辑程序、导出报告功能正常；

5. 质保与配件： 确认卖方提供的质保期限、电源线、通信线、光学封板膜等附件是否齐全。

八、典型用户案例

• 高校科研实验室
  某大学生命科学学院购入此机型，用于多部门联合项目，平均每周运行 20 次以上，设备稳定运行超过两年，Ct 值重现性良好。

• 第三方检测机构
  某检测中心作为二手回购机型，引入用于食品安全微生物检测，月均通量可达 500 板次，高通量检测任务下表现出色。

• 临床检验室
  地市级医院分子实验室使用该仪器开展呼吸道病毒核酸监测，并通过 ISO/IEC 17025 认证审核。

九、质量保证与售后支持

1. 质保范围

• 核心部件（热循环模块、光学模块）承诺 6 个月质保；

• 其他配件质保 3 个月，质保期内免费更换损坏部件；

2. 技术培训

• 提供仪器安装、使用和日常维护培训；

• 包含软件操作与常见故障排查指导；

3. 远程支持

• 配备远程诊断软件，可实时监控仪器运行状态；

• 一线工程师在线解答及指导；

4. 现场服务

• 在签署服务协议后，48 小时内安排工程师上门服务（限国内主要城市）；

• 提供定期保养与校准服务套餐。

十、总结

二手罗氏实时荧光定量PCR仪凭借其精准的温控系统、灵敏的荧光检测能力和完善的软件分析平台，能够满足科研、临床及第三方检测等多种需求。在保证仪器性能的前提下，二手采购不仅节省投入成本，也可快速上机开展实验。通过严格的验收流程、规范的日常维护及完善的售后服务，使用者可确保长期稳定运行，为科研与生产提供可靠的数据支持。