赛默飞荧光定量PCR仪使用方法

赛默飞荧光定量PCR仪（如 QuantStudio 系列、ABI 7500 系列）广泛用于基因表达分析、病原体检测、基因分型等实验。以下是荧光定量PCR仪的标准操作方法，帮助您完成实验。

1. 仪器操作前的准备

实验设计

1. 确定实验目标：

• 基因表达定量、病原体检测、SNP分析等。

2. 选择合适的试剂体系：

• 使用 TaqMan 探针、SYBR Green 染料或其他符合实验需求的反应体系。

实验材料准备

• 样本模板（如 DNA、RNA 经过反转录的 cDNA）。

• 引物和探针（设计特异性高的引物和探针）。

• PCR 反应试剂（如 Taq 酶、dNTPs）。

• PCR 反应板（96孔或384孔，依仪器型号选择）或 PCR 管。

• 无菌操作工具（如移液器、滤芯吸头）。

检查仪器状态

• 确保荧光定量PCR仪已正确连接电源并开机。

• 检查仪器是否校准，包括光学通道和温控模块。

• 清洁样本托盘，避免污染。

2. 样本和反应混合物的制备

标准 PCR 反应体系（以 20 µL 反应体系为例）：