罗氏LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪系统详解

一、引言

随着分子生物学技术的发展，实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time quantitative PCR，qPCR）已成为基因表达分析、病原检测、突变筛查等领域的重要工具。罗氏公司开发的LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪凭借其四通道检测能力、灵活的实验设置以及友好的软件界面，在科研和临床实验室中得到广泛应用。本文将从仪器构造、工作原理、技术特点、应用场景、操作流程及维护要点等方面，系统介绍该设备的性能与使用方法。

二、设备概述

LightCycler® 96 是一款中通量的实时荧光定量PCR仪，可容纳96孔标准板，适合日常分子生物学实验的需求。该系统集成了温控模块、光学检测系统、控制系统与数据分析平台，能够实现快速、准确的qPCR扩增与实时数据采集。

主要构成包括：

• 温控模块：采用帕尔贴元件（Peltier-based system）进行升降温控制，温度梯度小，确保各孔间的温度均一性。

• 光学检测系统：搭载四个荧光通道（常用为FAM、HEX、ROX、Cy5），配有独立的激发与检测光路，支持多重检测。

• 操作界面：通过USB或局域网连接PC，配套LightCycler® 96软件进行程序设置与数据分析。

三、技术参数