质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司。

一、仪器简介

罗氏实时荧光定量PCR仪是一款基于聚合酶链式反应（PCR）技术的高精度核酸检测设备。它通过荧光信号的实时采集与分析，实现DNA或RNA扩增过程的动态监测。与传统PCR不同，实时荧光定量PCR不仅能判断目标序列是否存在，还能对其初始拷贝数进行精确定量，广泛应用于医学检验、食品安全、环境监测、分子生物学研究等领域。

该仪器采用高性能光学系统、温度控制系统及智能化操作软件，能够在短时间内完成多通道、多样本的同步检测，具备高灵敏度、高重复性和稳定性，是科研与临床实验室常用的核心设备之一。

二、开机前准备工作

在进行开机操作前，必须完成一系列准备工作，以确保仪器处于良好运行状态：

1. 环境要求

• 实验室温度应保持在18℃至28℃之间，相对湿度不超过70%。

• 仪器应放置在稳固、平整、防震的实验台上，远离强磁场和阳光直射。

• 避免与高功率电器（如离心机、电热设备）共用电源插座，以防干扰信号。

2. 电源与接地

• 使用符合仪器要求的稳压电源，电压波动不应超过±10%。

• 确保接地良好，接地电阻小于4Ω，以防止静电干扰或电压突变。

3. 仪器检查

• 检查电源线、通讯线、荧光灯模块及光纤接口是否连接牢固。

• 观察仪器内部是否清洁，无积尘、液体残留或异物。

• 样品槽、反应板及耗材区域应干净、干燥。

4. 计算机及软件准备

• 连接PCR仪与专用计算机，通过USB或局域网接口。

• 打开控制软件，检查驱动是否正常加载。

• 检查上次实验数据是否已保存完毕，确保存储空间充足。

三、开机流程

1. 通电启动

• 插上电源线，确认电源指示灯亮起。

• 按下主机电源键，仪器开始自检。

• 自检过程中，系统会检测温控模块、光学模块、风扇及数据连接状态。若有异常，显示屏会提示错误代码，应根据说明书排查。

2. 软件启动

• 自检完成后，在计算机上双击“PCR控制系统”图标启动软件。

• 软件会自动识别连接的仪器型号、序列号及运行状态。

• 检查软件主界面温控系统、光路系统状态是否显示为“正常”。

• 若首次使用，应登录管理员账户完成系统初始化设定。

3. 温控系统预热

• 在主界面中点击“温控启动”，系统将自动预热至默认温度。

• 一般情况下，反应模块温度稳定后，主界面显示“Ready”。

• 预热时间约为10-15分钟，期间可准备样品。

4. 荧光灯模块检查

• 打开光学测试功能，检查每个通道的激发光与发射光是否正常。

• 若某通道信号偏弱，可清洁光路镜片或更换滤光片。

• 确保光学检测系统灵敏、无噪声干扰。

四、样品准备与上机

1. 反应体系配制

• 根据实验要求，配制PCR反应体系，包括模板、引物、探针、酶混合液及荧光染料。

• 严格按照说明书比例操作，避免气泡产生。

• 样品应在冰上操作，以减少酶活性变化。

2. 加样与封板

• 将反应液分装至PCR反应管或96孔反应板中。

• 检查每孔体积一致性，避免液面高低差异。

• 使用专用封板膜密封，防止蒸发与交叉污染。

• 将反应板置入仪器样品槽中，注意定位方向正确。

五、程序设定与运行

1. 新建实验文件

• 在软件中点击“新建实验”，输入实验名称、日期及操作者信息。

• 选择反应体系类型（如SYBR Green或TaqMan探针法）。

• 设置荧光通道及参考染料。

2. 温度循环参数设定

• 输入预变性、退火、延伸等阶段的温度与时间。

• 设置循环次数，一般为35-45次。

• 可根据实验需要调整升温速率与荧光采集点。

3. 数据采集设置

• 勾选实时荧光采集选项，选择检测通道。

• 设置阈值线及基线校正方式。

• 可启用“熔解曲线分析”功能，用于产物特异性判断。

4. 启动实验

• 点击“运行”按钮，仪器开始反应。

• 软件界面实时显示荧光曲线及温度变化。

• 实验过程中请勿随意开盖或断电。

六、实验结束与数据分析

1. 自动保存与导出

• 实验结束后，软件会自动保存数据文件。

• 可导出为Excel、PDF或专用格式进行分析。

2. 结果分析

• 查看扩增曲线是否平滑、阈值交点是否明显。

• 检查标准曲线的线性关系（R²≥0.99）。

• 根据Ct值计算样品相对表达量或绝对拷贝数。

3. 熔解曲线验证

• 观察熔解峰形态是否单一，判断扩增产物特异性。

• 若出现多峰或拖尾，说明存在非特异性扩增，应优化引物或退火温度。

七、关机流程

1. 实验结束后等待降温

• 仪器会自动降温至安全温度，一般为25℃以下。

• 不可强制关闭电源，以防损坏温控系统。

2. 退出软件与断电

• 关闭软件并退出用户账户。

• 关闭主机电源，再拔下电源线。

3. 清洁与维护

• 使用无尘布擦拭仪器表面，保持干净。

• 禁止使用有机溶剂清洗光学部件。

• 定期检查风扇与滤网，防止灰尘堆积。

八、日常维护与注意事项

1. 每周保养

• 清理样品槽及反应孔周边，保持无污染。

• 检查荧光灯使用寿命，必要时更换。

2. 每月检测

• 使用标准模板进行性能验证，确保扩增效率稳定。

• 检查软件版本，更新至最新稳定版。

3. 安全事项

• 不得在带电状态下插拔模块。

• 实验过程中应佩戴防护手套与护目镜。

• 若发生异常声响或温度波动，应立即停止运行并联系厂家。

九、总结

罗氏实时荧光定量PCR仪的开机流程看似简单，但每一步都对结果的准确性至关重要。规范的操作不仅能延长仪器寿命，更能保障实验数据的科学性与重复性。通过严格遵守开机、运行与维护步骤，实验人员可最大限度地提升检测效率，确保实验室的高质量输出。