ABI 7500 实时荧光定量 PCR 仪(Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System)是由赛默飞世尔科技开发的一款广泛应用于科研与临床研究领域的标准型实时定量 PCR 仪器。自推出以来,该设备因其稳定性高、数据准确、功能实用而被全球众多实验室采用。它结合先进的热控系统、可靠的荧光检测模块和成熟的软件平台,适用于基因表达分析、病原体检测、遗传分析等多种分子生物学应用。
无论是科研院校、医院、疾病控制中心,还是食品药品检验、农业检测机构,ABI 7500 都是一款值得信赖的实时 PCR 平台。特别是在二手设备市场上,其性价比优势尤为明显。
ABI 7500 拥有五色通道系统,支持多种荧光染料检测,如 FAM、VIC、ROX、TAMRA 和 SYBR Green,兼容多重 PCR 检测,能够满足用户在复杂多靶点检测方面的需求。荧光系统采用高效激发光源和滤光片组,确保信号识别灵敏,降低背景干扰,提升数据准确性。
仪器配备高性能帕尔贴热循环模块,可实现快速升降温控制,温控均一性优于 ±0.25°C,确保所有样本孔的反应环境一致。该特性是实现高重复性结果的关键。
标准版本的 ABI 7500 反应程序大约需两个小时完成一个运行周期。针对时间敏感场景,用户也可选用 Fast 模块升级(7500 Fast 系列),进一步压缩反应时间至40分钟左右。
ABI 7500 配套使用 SDS 软件(System Detection Software),现多数实验室已升级至 7500 v2.3 或兼容 QuantStudio 软件。该软件提供:
标准曲线定量分析
相对定量分析(ΔΔCt 方法)
熔解曲线分析
SNP 分型
CT 值自动判定及基线/阈值调整
曲线拟合、荧光图形导出、报告生成
软件操作逻辑清晰,支持模板保存、批量数据导出、图像和数值一键导出等功能,是用户数据分析的重要保障。
ABI 7500 使用标准的 96 孔光学板,适用于常规样本通量分析,单次可处理 96 个反应体系,满足大部分科研和检测单位的需求。
通量支持:96孔标准光学反应板
荧光通道:5通道(FAM、VIC、ROX、SYBR Green、TAMRA)
光源系统:长寿命高强度氙灯(或 LED 版本视机型而定)
检测器类型:高灵敏 CCD 摄像系统
升温速度:约 2.5°C/秒(标准版)
反应体系体积:10–100 µL
热控精度:±0.1°C
温度均一性:≤ ±0.25°C(孔间差)
操作系统兼容:Windows 7、10
数据接口:USB、LAN、RS-232 串口
配合反转录 PCR(RT-PCR)技术,ABI 7500 可用于细胞或组织样本中基因的表达量定量分析,适用于疾病机制研究、药物筛选和表型研究。
其高灵敏度和通量适中特点,广泛应用于病毒载量监测、细菌定量检测及呼吸道病原核酸分析。例如,新冠病毒核酸检测中,ABI 7500 常作为主力平台。
通过 TaqMan 探针结合 SNP 分型方法,设备可实现个体基因型判别,是药物代谢基因、肿瘤突变筛查等领域的重要工具。
可用于检测转基因成分、致病菌污染、生物毒素或动物源成分残留,支持多靶点定量分析,符合监管标准。
在生物制药与疫苗研发过程中,用于检测表达载体稳定性、病毒纯度、污染物排查等关键指标,是 GMP 环境下常见的核酸检测平台。
ABI 7500 是一款经久耐用的 PCR 平台,许多型号在正确维护下可连续使用10年以上。选购二手设备时应重点关注以下几个方面:
观察设备外壳是否有裂痕、氧化或拆卸痕迹,样品舱是否平整清洁。查看键盘、屏幕是否响应灵敏,指示灯状态是否正常。
要求供应商提供温控测试数据、校准报告和荧光通道测试曲线。检查 CCD 相机是否可正常采集,激发灯寿命是否足够。
确认设备是否附带原版 SDS 软件及授权密钥,避免后续使用中出现功能限制。此外,检查是否能兼容新版系统环境(如 Windows 10)。
包括样本板架、热盖组件、电源线、USB线、出厂说明书等。若缺失关键组件,需估算额外采购成本。
优先选择带有专业检修、质保期和售后支持的渠道供应商,确保故障时有渠道响应和技术处理。
样品准备:配制反应体系,加入引物、探针、模板及 Master Mix,分装至96孔板中。
封板与离心:用光学透明密封膜密封板口,短时离心去除气泡。
上机操作:将板置入样本托架,对准位置并关闭仪器盖。
软件设置:启动 SDS 软件,选择反应通道、温控程序、数据采集模式及样本分组信息。
运行实验:点击启动,系统自动执行热循环程序并实时采集荧光信号。
数据分析:结束后通过软件查看 CT 值、荧光扩增曲线、标准曲线、熔解曲线等,导出报告与结果文件。
清洁与关机:实验结束后取出样品板,清理样品舱,关闭设备。
问题情况 | 可能原因 | 解决方案 |
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无荧光信号 | 探针失效、光源老化 | 更换探针,检测灯泡寿命 |
Ct 值偏高或不一致 | 模板浓度低或反应体积不均 | 优化模板浓度,复查加样方法 |
熔解曲线出现多峰 | 引物特异性差或有污染 | 优化引物设计、重新提取样本 |
软件闪退或卡顿 | 驱动不兼容或授权丢失 | 重新安装软件,确认系统环境 |
自动校准失败 | 光学路径或温控故障 | 执行光学校准或联系维修人员 |
设备型号 | 荧光通道 | 通量 | 特点描述 |
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ABI 7500 | 5通道 | 96孔 | 通用型设备,经典稳定,软件成熟 |
QuantStudio 3 | 4通道 | 96孔 | 操作简洁,适合教学与中小规模实验室 |
QuantStudio 5 | 6通道 | 96孔 | 多染料支持强,云端管理 |
ViiA 7 | 6通道 | 96/384孔 | 高端科研与诊断平台,适合高通量需求 |
ABI 7500 在性能与价格间取得平衡,适合多数实验需求,是大批量标准检测的理想设备。
ABI 7500 实时荧光定量 PCR 仪凭借其稳定的性能、成熟的软件系统和强大的多功能支持,在分子生物学研究与应用中有着广泛影响。即使在当今仪器更新迭代快速的背景下,它仍旧以可靠性和易用性赢得用户青睐。
对于预算有限但希望搭建高效核酸检测平台的实验室而言,选购一台状态良好、配件完整、经过校准的二手 ABI 7500,将是性价比极高的选择。在规范使用和妥善维护下,它依然能够长期稳定运行,助力科研与检测工作的开展。
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