在实验室日常工作中,高压蒸汽灭菌是最常用的无菌保障手段之一。TOMY 灭菌锅 SX700 作为实验室常见设备,通常能够稳定完成器具、培养基及废弃物的灭菌任务。但在实际使用中,仍可能出现“灭菌不彻底”的现象,例如灭菌指示条未达标、培养基出现杂菌、器皿取出后仍有污染风险等。这类问题往往并非单一故障导致,而是由装载方式、程序选择、排汽条件、设备状态和操作习惯等多因素共同影响。以下从主要原因、典型案例、改进建议与总结四个方面进行说明。
1. 装载过密导致蒸汽无法充分渗透
高压蒸汽灭菌依赖蒸汽对物品表面的接触与渗透。如果器材堆叠过紧、灭菌袋叠放过厚、容器之间留缝不足,蒸汽流动受阻,就会出现局部温度达不到设定值的情况。表面看似完成灭菌,但内部或底层区域实际未达到有效灭菌条件。
2. 程序选择不匹配灭菌对象
液体、固体器材和废弃物对灭菌程序的要求不同。液体灭菌需要更长的保温时间与更合理的排汽策略;固体器材需要保证蒸汽进入空腔结构;废弃物灭菌需要考虑装载量与吸水材料。若使用了不适合的程序,即使设备运行正常,也可能出现灭菌效果不稳定。
3. 排汽不充分,残留空气影响温度传递
蒸汽灭菌的关键是“饱和蒸汽”环境。如果排汽阶段不足,腔体内残留空气会形成隔热层,使某些区域温度上不去。尤其是装载量大、容器多、灭菌袋厚时,空气更容易滞留,导致灭菌失败的概率上升。
4. 灭菌时间设置偏短或保温阶段不足
灭菌并不是达到温度就结束,而是需要在目标温度下维持一定时间,才能确保微生物和芽孢被彻底灭活。如果用户为了赶时间缩短保温时间,或者误以为“温度到了就算完成”,就会出现不彻底的问题。
5. 灭菌物品包装方式不规范
例如:灭菌袋封口过紧、使用不透气材料包裹、容器盖拧太紧、液体瓶完全密封等,都可能导致蒸汽无法进入内部。尤其是带有空腔结构的器械、带盖瓶、滤器组件等,如果没有按规范预留通道,灭菌效果会明显下降。
6. 设备维护不足导致参数偏差
长期使用后,如果温度探头、压力传感器、排汽阀或加热系统存在老化或积垢,会造成实际温度与显示温度不一致,或排汽效率下降。此时设备表面上完成运行,但灭菌条件可能并未真正达到。
7. 水质或水位问题影响蒸汽质量
蒸汽由加热水产生。若水质杂质多、结垢严重,会影响加热效率与蒸汽稳定性;水位不足则可能导致蒸汽生成不充分。蒸汽不稳定会直接导致温度波动,从而影响灭菌效果。
实例一:培养基灭菌后出现杂菌
某实验室使用 SX700 灭菌 LB 培养基,灭菌结束后分装培养,第二天发现培养基出现混浊。排查发现装载时瓶子过多且靠得很紧,部分瓶子位于底层,蒸汽循环受阻。同时保温时间按固体器材程序设置偏短,最终导致灭菌不彻底。
实例二:灭菌袋内器械仍检出污染
实验人员将镊子、剪刀等金属器械装入灭菌袋后一次性灭菌。取出后发现个别袋内器械仍有污染风险。原因是袋子叠放太厚,且部分袋口压在一起,导致蒸汽无法充分进入袋内,形成“局部死角”。
实例三:废弃物灭菌后仍有异味与活性残留
某实验室将培养皿、离心管、带液体残留的废弃物混装灭菌。灭菌结束后仍有明显异味,并在后续检查中发现部分污染未被完全灭活。问题主要来自废弃物混装、吸水材料不足、装载量过大以及排汽阶段不充分。
实例四:指示条未达标但设备无报警
某次灭菌运行正常结束,设备未报错,但指示条颜色变化不完全。最终发现设备长期未清洁排汽通道,导致排汽效率下降,腔体内空气残留较多,影响了有效温度的传递。
1. 优化装载方式,确保蒸汽通道
避免过度堆叠,器材之间留足空隙,灭菌袋不要叠成厚层。液体瓶尽量分层摆放,避免底层被完全遮挡。
2. 选择正确程序并合理设置时间
液体、固体、废弃物应使用对应程序。对于高风险或装载量大的任务,应适当延长保温时间,避免“刚够用”的设置。
3. 规范包装与容器处理
灭菌袋应使用透气材质,封口不要过紧;带盖瓶建议松盖或采用专用透气盖;复杂器械应拆解或打开空腔通道。
4. 定期维护关键部件
建议建立维护周期,检查温度/压力传感器、排汽阀、密封圈、加热系统,及时清洁水垢与排汽通道,避免长期积累导致性能下降。
5. 结合指示条与记录制度
对于关键实验,建议每批次使用化学指示条,必要时结合生物指示验证。建立灭菌记录表,便于追溯问题原因。
TOMY 灭菌锅 SX700 出现灭菌不彻底的情况,多数不是设备“无法灭菌”,而是由于装载、程序、排汽、时间、包装和维护等因素叠加导致。蒸汽灭菌的核心在于:让蒸汽充分进入每个角落,并在目标温度下保持足够时间。只要用户在装载规范、程序匹配、排汽充分、维护到位的基础上操作,SX700 仍然能够稳定提供可靠的灭菌效果。
从实验室管理角度看,建立标准化灭菌流程、定期维护制度与灭菌效果验证机制,是避免灭菌失败、保障实验质量的关键。通过科学调整与规范操作,大多数灭菌不彻底问题都可以被预防或快速纠正,从而确保实验室的无菌安全与工作效率。
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