伯乐(Bio-Rad)MicroPulser电穿孔仪(型号1652100) 的全面介绍,全文约3000字,分为以下六大部分:产品概述、核心技术与性能特点、适用范围与细胞类型、操作流程与注意事项、常见问题与维护建议,以及与竞品对比与选型建议。
伯乐(Bio-Rad)MicroPulser电穿孔仪1652100是一款专为微生物、酵母和哺乳动物细胞电转化(电穿孔)设计的实验室仪器。该设备通过精确控制电压与脉冲时间,在细胞膜上瞬间形成孔隙,使外源DNA、RNA或其他大分子物质能够进入细胞内部,从而实现基因转染或其他分子生物学操作。
Bio-Rad作为全球知名的生命科学仪器制造商,其MicroPulser系列因操作简便、性能稳定和适用性强,在全球众多科研院所与生物技术公司中拥有广泛的用户基础。
MicroPulser内置多种针对不同细胞类型的电穿孔程序,包括:
大肠杆菌(E. coli)
酵母菌(Yeast)
哺乳动物细胞(如CHO、293T等)
植物原生质体
每种预设程序都根据细胞膜的物理特性调配了合适的电压、时间和波形参数,用户也可自定义电压与电阻值,以适应特殊实验需求。
该仪器采用快速放电电容放电机制,在短时间内输出高强度单个电压脉冲,有效穿孔同时最大限度减少细胞损伤。其恒压系统可精确输出0.1kV至3.0kV的电压,稳定性高,保证转染效率的可重复性。
MicroPulser配备兼容Bio-Rad Gene Pulser/Micro Pulser Cuvette Holder的电极支架,可支持0.1cm与0.2cm间隙电穿孔杯,适合不同电场强度要求的实验。此外,还支持标准1mm、2mm等规格的穿孔杯。
设备体积小巧(大约22cm x 20cm x 9cm),便于置于实验台角落或超净工作台内操作。前面板设有清晰的LCD显示屏,提供参数设定与结果回读功能,配合简单按键控制,适合初学者与熟练科研人员使用。
伯乐MicroPulser广泛适用于多种电穿孔实验,主要包括:
大肠杆菌(常用于质粒转化)
沙门氏菌、志贺菌等革兰氏阴性菌
在常规条件下使用0.1 cm间隙电穿孔杯,电压范围通常在1.8kV~2.5kV之间。
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
念珠菌属等
通常使用0.2 cm间隙电极杯,电压控制在1.5kV左右。
CHO细胞、HEK293、Jurkat等悬浮或贴壁细胞
可用于RNA或质粒DNA的导入,适用于小规模实验及验证性转染。
玉米、小麦、烟草原生质体的短时高压脉冲电穿孔
需要特别优化的电压与电容参数。
准备细胞与DNA溶液:将细胞洗涤并重悬于适当缓冲液(如sterile water、glycerol buffer)。
装填穿孔杯:将细胞-质粒混合物转移至预冷穿孔杯中(体积一般为50µL~100µL)。
插入电极座:将穿孔杯插入仪器配套电极支架。
设定参数并启动穿孔:选择细胞类型预设程序或手动设定脉冲电压与时间。
处理后培养:立即将穿孔产物转移至恢复培养基中,按实验流程培养。
避免气泡:穿孔液中存在气泡会引发电弧放电,导致实验失败。
控制细胞浓度:过高或过低的细胞密度都会影响转染效率与生存率。
电极杯需预冷:通常于4°C冰盒中冷却,以减少热效应对细胞的损伤。
严禁连续操作:高压脉冲后设备需短时间冷却,避免过热影响寿命。
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
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电弧放电 | 杯中有气泡或液体体积不足 | 检查是否正确操作,重新加样并排气泡 |
无法启动程序 | 电极座未插牢或接触不良 | 重新插入并确认固定 |
转染效率低 | 电压设置不合适或细胞状态不佳 | 优化参数或更换细胞批次 |
设备无响应 | 电源故障或保险丝烧毁 | 检查电源连接,联系厂家售后 |
每次使用后用70%酒精擦拭电极支架与外壳;
定期更换穿孔杯,避免重复使用影响实验结果;
存放在干燥无腐蚀性气体的环境中;
每年进行一次厂方推荐的性能检测与校准。
品牌/型号 | 最大电压 | 适用细胞 | 是否预设程序 | 价格区间 |
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Bio-Rad MicroPulser 1652100 | 3.0kV | 细菌/酵母/哺乳动物 | 有 | 中等 |
Invitrogen Neon Transfection | 2.3kV | 哺乳动物细胞专用 | 有 | 略高 |
Eppendorf Multiporator | 3.0kV | 多种细胞 | 有 | 高 |
BTX ECM399 | 2.5kV | 细菌/真核细胞 | 有 | 略低 |
如果你的实验侧重于细菌与酵母等微生物的高效转化,同时需要一定程度的哺乳动物细胞适应性,Bio-Rad MicroPulser是一款性价比较高的通用选择;
对于专注哺乳动物高效率基因编辑实验,可考虑Neon等更高精度系统;
对预算有限、只进行基础转化操作的实验室而言,MicroPulser具有操作简便、寿命长、用户评价高等优势,适合作为入门或常规操作仪器。
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