伯乐（Bio-Rad）Gene Pulser Xcell 电穿孔系统（包括1652660型号） 的快速操作指导，适用于日常基因转染实验。此流程为标准化操作简要，帮助用户快速、高效、安全地完成一次完整的电穿孔实验：

伯乐 Gene Pulser Xcell 电穿孔系统

快速操作指南（Quick Start Guide）

一、设备准备

1. 检查组件连接

• 确保主机、CE 模块（用于指数波）或 PC 模块（用于方波）已正确连接；

• ShockPod 电击槽已插入主机并就位；

• 电源线连接稳固，打开主电源开关。

2. 预热细胞与缓冲液

• 使用专用电穿孔缓冲液（如 Bio-Rad Gene Pulser Buffer）；

• 细胞应处于对数生长期，低钙无血清状态最佳；

• 样品温度控制在冰上或4℃，电穿孔后立即恢复至37℃。

二、样品准备

1. 混合样品

• 合适浓度的细胞（约1×10⁶）；

• 质粒DNA或RNA（通常为0.1–10 µg）；

• 缓冲液补足至合适体积（10–500 µL，依据电击杯大小）。

• 在1.5 mL无酶管中加入：

2. 去除气泡

• 轻轻弹击比色皿或使用微量离心，确保无气泡；

• 将混合液转移至电击杯中（0.2 cm / 0.4 cm 电极间距视细胞类型选择）。

三、电穿孔设置

1. 选择波形模式

• 真核细胞：选择 指数波（Exponential Decay）；

• 原核细胞（细菌、酵母）：选择 方波（Square Wave）。

2. 设定参数（参考值）

• 电压：1,800–2,500 V（0.2 cm 杯）；

• 脉冲时间：5 ms；

• 重复次数：1–2 次。

• 电压：250–300 V（0.4 cm 杯）；

• 电容：250 µF；

• 电阻：∞；

• 哺乳动物细胞（指数波）：

• 细菌（方波）：

3. 保存设置（可选）

• 使用界面保存为自定义 protocol，便于重复实验调用。

四、执行电穿孔

1. 插入电击杯

• 将装有样品的比色皿放入 ShockPod 中；

• 关闭盖子或压紧槽位确保安全接触。

2. 按下【Pulse】键

• 系统释放脉冲；

• 屏幕将显示电压、脉冲时间与电阻结果；

• 若出现电弧，需重新准备样品并检查液面。

3. 立即移出样品

• 将细胞从比色皿转移至温热的培养液中进行恢复（如添加预热DMEM + FBS）；

• 静置 5–10 分钟后可接种入培养皿或离心收集继续实验。

五、结束操作与清洁

1. 取出比色皿，清洗干燥备用；

2. 关闭主机电源，断开电源插头；

3. 清洁 ShockPod 电击槽（干布擦拭）；

4. 如长时间不使用，请覆盖防尘罩保存设备。

六、常见问题速查