Bio-Rad 伯乐 MicroPulser 电穿孔仪 的详细介绍，全文从设备功能、技术原理、性能参数、应用领域、操作流程、注意事项和使用建议等多维展开，适合科研人员、教学实验室和生物技术公司参考使用或采购前了解。

Bio-Rad MicroPulser 电穿孔仪全方位介绍

一、设备简介

MicroPulser 电穿孔仪 是 Bio-Rad 公司为实验室小体积电穿孔实验开发的一款高效、便携、智能的电转染工具。该设备主要适用于原核微生物、酵母菌、真核细胞（如哺乳动物细胞）以及植物原生质体等细胞类型的外源基因导入实验。

通过对细胞施加短暂的高压电脉冲，MicroPulser 能够瞬间改变细胞膜的通透性，产生可逆性微孔，从而使DNA、RNA、siRNA、蛋白质等分子物质进入细胞质或细胞核中，完成基因转化、转染或编辑任务。

其最大特点是：结构紧凑、操作简单、转染效率高、适用范围广、故障率低，适合基础研究与日常分子生物学实验室使用。

二、工作原理简述

电穿孔技术的核心是电致孔效应（electroporation）。当细胞暴露于强电场中时，细胞膜脂双层结构因电介质击穿而在局部形成暂时性孔洞。外源物质便可借助电渗、电泳或被动扩散等机制穿透这些孔洞进入细胞内部。随后，细胞膜会自然修复，孔洞关闭，细胞恢复正常生理活动。

这种方式相较于病毒介导、化学转染等手段，更安全、适用性更广，并且对非模式生物或难转染细胞更为友好。

三、技术规格参数

四、主要性能特点

1. 预设程序，轻松上手

MicroPulser 内置优化程序，涵盖了大多数常见细胞类型：

• 大肠杆菌（E. coli）

• 酿酒酵母（S. cerevisiae）

• 哺乳动物细胞（如CHO、293T、HeLa）

• 植物原生质体等

无需自行调试参数，新手实验人员也能快速获得高效转染结果。

2. 电压精度高、输出稳定

采用稳定恒压电源，避免电流波动导致细胞损伤。输出电压误差控制在±1%，确保不同批次实验的可重复性。

3. 安全电弧抑制系统

内置防电弧系统，检测到穿孔液导电性异常、样品气泡等情况时自动停止放电，保护细胞和仪器不受损。

4. 紧凑体积，易于集成

适合置于超净工作台、生物安全柜或标准实验操作台上，节省空间，支持在无菌环境下直接完成转染操作。

五、适用场景与细胞类型

六、标准操作流程

步骤一：准备细胞与材料

• 细胞应处于对数生长期，状态良好；

• 使用无离子缓冲液（如纯水+甘油）重悬；

• 外源质粒或RNA应无盐、浓度合适；

• 预冷穿孔杯至4°C，减少热应激。

步骤二：装填样品

• 在穿孔杯中加入50–100 µL细胞-质粒混合液；

• 去除样品气泡（使用枪头轻弹杯体）；

• 插入设备电极支架，确保对齐。

步骤三：设定程序与放电

• 选择适配细胞的预设程序或手动设定电压；

• 按下“Pulse”键；

• 屏幕会显示脉冲完成与时间常数；

• 若出现电弧提示，停止实验并重新准备样品。

步骤四：转移与恢复培养

• 快速将细胞转移至37°C预热的恢复培养液；

• 通常孵育30–60分钟后接种平板或进行检测；

• 可加入适当抗生素筛选阳性菌落。

七、常见问题与应对方法

八、实验优化建议

• 使用新鲜、活性高的细胞；

• 样品混合后预冷可增强细胞存活率；

• 初次实验推荐建立“阳性对照”作为效率基准；

• 电极杯建议单次使用，避免交叉污染；

• 每次实验记录参数与结果，建立实验数据库。

九、设备维护与保养

• 使用后擦拭设备表面及电极接口；

• 不得使用强酸、丙酮等腐蚀性溶液清洁；

• 长时间不使用时，应拔掉电源、置于干燥通风环境；

• 每季度检查电极是否氧化变色，必要时更换；

• 年度维护建议提交厂商进行电压稳定性检测与校准。

十、总结

Bio-Rad MicroPulser 电穿孔仪作为一款高性价比、易于操作、适配性强的实验室电转设备，适合日常的分子克隆、转基因构建、RNA干扰、蛋白表达、免疫细胞处理等多类科研场景。其优良的设计与性能，使其在全球数千家高校、研究机构和生物公司中获得广泛应用。