赛默飞酶标仪 Multiskan Ascent 运行指南

一、运行前准备

1. 环境检查

• 温湿度要求：仪器应置于 15–30℃、相对湿度不超过 70% 的实验室环境中，避免阳光直射及强气流影响。

• 电源稳定性：使用额定电压 220 V ±10%，频率 50–60 Hz 的独立电源插座，并配备稳压器或 UPS，以防电压波动造成光源损坏或数据丢失。

• 防振措施：将仪器放置在坚固平稳的台面上，减少运行中机械振动干扰。

2. 耗材与配件

• 选用符合实验需求的微孔板（如 96 孔平底、圆底或 V 底）。

• 检查所需滤光片是否已安装到位，波长范围应覆盖实验吸收峰。

• 准备加样器、移液枪及所需试剂，确保试剂充分混合并无沉淀。

3. 系统清洁

• 使用无尘布轻拭仪器表面，避免灰尘进入光路系统。

• 确保托板区域干燥清洁，防止残液污染光学组件。

二、开机与自检

1. 开机步骤

• 将电源开关置于 ON 位置，仪器进入启动模式。

• 显示屏亮起后，系统会自动进行内部初始化检测，包括光源状态、滤光片位置、光路对准。

2. 自检内容

• 光源亮度检测：判断光源是否达到正常工作强度。

• 滤光片定位：确认当前滤光片安装和切换正常。

• 托板运动测试：检测读板平台是否平稳移动。

• 信号基线测试：确保在无样品状态下光学信号稳定。

3. 异常处理

• 若启动自检出现报警，记录错误代码，根据用户手册排查。

• 常见问题包括光源老化、滤光片卡滞、托架阻塞等，应在运行实验前解决。

三、实验参数设置

1. 选择检测模式

Multiskan Ascent 支持多种检测模式：

• 终点法（End-point）：在固定时间点测量吸光度，适合 ELISA、蛋白定量等。

• 动力学法（Kinetic）：在一段时间内多次读取信号，分析反应速率。

• 多波长检测（Multi-wavelength）：同一孔使用多个波长测定，用于背景扣除或多组分分析。

2. 波长设定

• 根据实验反应产物的吸收峰选择主波长，如 ELISA 常用 450 nm。

• 设置参考波长（如 620 nm）以扣除背景信号，提高精确度。

3. 读取速度与顺序

• 可选择快速读取或逐孔扫描模式。

• 对于动力学实验，应设定适当的时间间隔，避免反应过程数据缺失。

4. 孔布局设置

• 通过软件设置标准孔、空白孔、样品孔的位置。

• 建议在每块板上设定至少 2–3 个空白孔和标准孔，以便后续计算。

四、样品读取流程

1. 放置微孔板

• 将已加样的微孔板平稳放入托板位置，确保定位正确。

• 检查板面无气泡、无溢出液体，以免影响光路。

2. 启动读取

• 在软件中确认参数无误后，点击 Start 启动测量。

• 仪器将按设定模式和顺序依次读取所有孔的吸光度。

3. 实时监控

• 软件界面会显示当前读取的孔位及对应数据。

• 对于动力学模式，可实时观察反应曲线变化。

五、数据处理与保存

1. 数据修正

• 自动扣除空白孔吸光度，消除系统背景影响。

• 对同一样品的重复孔计算均值，并标记异常值。

2. 标准曲线拟合

• 支持线性回归、二次回归、四参数（4PL）和五参数（5PL）拟合。

• 选择拟合模型时应根据实验类型与数据分布确定。

3. 浓度计算

• 将吸光度值代入标准曲线方程，自动计算浓度。

• 考虑样品稀释倍数，计算最终浓度。

4. 数据导出

• 可将结果导出为 Excel、CSV、PDF 等格式，方便数据整理与报告撰写。

• 建议建立实验数据归档系统，保存原始数据和分析结果。

六、运行优化与注意事项

1. 提高精确度的方法

• 使用一致规格的微孔板，避免板材透光差异带来偏差。

• 在相同环境条件下完成加样和读板，减少温度、光照变化对反应的影响。

2. 减少读数误差

• 对细胞或沉淀不均的样品，可使用区域扫描功能。

• 对光敏反应产物，应避免长时间暴露在强光下。

3. 动力学实验优化

• 确保加样速度快且同步，防止反应起始时间差异过大。

• 根据反应速率合理设置读取间隔。

七、安全与维护

1. 日常维护

• 运行结束后，用无水乙醇或去离子水清洁托板，防止试剂残留腐蚀。

• 定期检查光源使用时间，及时更换老化光源。

• 定期清洁滤光片表面，保持光学性能。

2. 长期停用保护

• 长期停用时，应断开电源，覆盖防尘罩。

• 存放环境应干燥通风，避免潮湿导致光学元件霉变。

3. 安全注意事项

• 避免在仪器运行中打开托板，防止机械卡滞。

• 对含有有毒或腐蚀性试剂的板，应在加样和读取过程中佩戴防护手套和护目镜。

八、总结

赛默飞酶标仪 Multiskan Ascent 的运行流程涵盖了 环境准备、设备自检、参数设定、样品读取、数据分析与结果保存 等环节。严格按照运行指南操作，不仅能保证数据的准确性和重复性，还能延长仪器寿命，减少运行故障。对于不同实验类型，合理选择检测模式和波长设置，结合标准化的样品处理与质量控制措施，能够最大化发挥 Multiskan Ascent 的性能优势，满足科研、临床和质量检测等多领域的需求。