1. 微孔板的选择

微孔板是Varioskan Flash最常用的耗材之一，不同检测模式和实验需求对微孔板的材质、颜色、底部类型和孔数都有不同要求。

1.1 按孔数分类

• 96孔板：通用性最强，适用于大多数吸收、荧光和发光实验。

• 384孔板：适合高通量筛选实验，可在较小体积下完成更多样品的检测。

• 1536孔板：主要用于超高通量药物筛选，需要配合自动化加样系统使用。

1.2 按颜色分类

• 透明微孔板：用于吸收光检测（如ELISA、蛋白定量等），可最大限度减少光吸收干扰。

• 白色微孔板：适合化学发光检测，能够增强光信号反射，提高检测灵敏度。

• 黑色微孔板：用于荧光检测，可减少孔与孔之间的信号串扰，提高信噪比。

1.3 按底部类型分类

• 平底板（Flat Bottom）：适合大多数比色法和终点检测实验。

• 圆底板（Round Bottom）：有助于细胞或颗粒聚集，适合悬浮细胞实验。

• U型底板：常用于免疫沉淀等需要样品集中于底部的检测。

• 透明平底黑色或白色板：适合细胞荧光或发光实验，允许显微镜直接观察细胞形态。

1.4 表面处理类型

• 高结合力（High Binding）表面：增强蛋白质、抗体或其他大分子与板面的结合，常用于ELISA。

• 低结合力（Low Binding）表面：减少分子与板面的非特异性吸附，适用于小分子检测或需要高回收率的实验。

• 细胞培养处理表面：经组织培养处理的表面有助于贴壁细胞的附着和生长，适用于细胞实验。

2. 比色皿与比色管

虽然Varioskan Flash以微孔板检测为主，但在某些特定应用中，比色皿也是常用耗材。

2.1 比色皿类型

• 石英比色皿：透过紫外区和可见光，适合核酸、蛋白质浓度测定。

• 光学玻璃比色皿：适合可见光范围检测，如一般的比色反应。

• 塑料比色皿：价格低廉，适合一次性使用，避免交叉污染。

2.2 体积与光程

比色皿体积从几十微升到几毫升不等，光程越长灵敏度越高。对于需要高精度的定量检测，应选择标准光程比色皿。

3. 光学滤光片与检测探针

3.1 滤光片

Varioskan Flash内置多种光学元件，但根据实验需要可选配不同滤光片。

• 吸收检测滤光片：根据检测物质的最大吸收峰选择合适波长。

• 荧光激发/发射滤光片：根据荧光探针的光谱特性选择，减少背景干扰。

• 时间分辨滤光片：用于TRF检测，匹配特定延迟时间和发射波长。

3.2 检测探针

常用的荧光探针包括：

• 核酸探针：如SYBR Green、PicoGreen等，适用于DNA/RNA定量。

• 细胞功能探针：如Calcein-AM（活细胞染色）、Annexin V-FITC（凋亡检测）等。

• 离子指示剂：如Fura-2 AM（钙离子检测）。

4. 密封膜与封板膜

密封膜是保证反应体系稳定、减少蒸发的重要耗材，尤其在长时间动力学实验中必不可少。

4.1 按材质分类

• 透明密封膜：适用于吸收光检测，不影响光透过。

• 黑色不透光密封膜：适合荧光和发光实验，可减少外界光干扰。

• 透气膜：用于细胞培养实验，保证气体交换同时防止污染。

4.2 特殊功能膜

• 低蒸发膜：适合长时间培养或高温环境下的实验，减少样品体积损失。

• 可剥离膜：方便多次读取实验数据。

5. 试剂与缓冲液

虽然试剂不直接属于仪器耗材，但其质量和匹配程度会直接影响检测效果。

5.1 酶底物

• 发色底物：如TMB、OPD，适用于ELISA检测。

• 化学发光底物：如Luminol衍生物，用于高灵敏发光检测。

5.2 缓冲液

• PBS/TBS缓冲液：用于洗涤、稀释样品。

• 封闭液：减少非特异性结合。

6. 自动化配套耗材

对于配备自动进样器或自动化平台的Varioskan Flash，需要使用兼容的吸头、储液槽、反应板等耗材。

6.1 吸头

• 带滤芯吸头：防止气溶胶污染，适合PCR及敏感检测。

• 无滤芯吸头：适合一般移液。

6.2 储液槽

• 单通道储液槽：适合单试剂分配。

• 多通道储液槽：适合同时分配多种试剂，提高效率。

7. 耗材选择的注意事项

1. 光学匹配性：确保耗材材质和颜色适合所用检测模式，避免信号衰减或干扰。

2. 尺寸兼容性：微孔板和比色皿需与仪器托盘规格完全匹配。

3. 化学耐受性：耗材材质需耐受所用试剂（酸、碱、有机溶剂等）。

4. 批次一致性：尽量使用同一批次耗材，减少批次间差异对结果的影响。

5. 无污染性：选择低DNA酶、低RNA酶、无热原耗材，避免污染。

8. 应用案例

案例1：ELISA检测

某实验室使用Varioskan Flash进行传染病抗体检测，选用透明高结合力96孔板，配合TMB底物显色，在450 nm波长读取结果。选择高结合力板保证抗原充分吸附，提高检测灵敏度。

案例2：细胞凋亡分析

研究团队在荧光模式下检测药物诱导的细胞凋亡，使用黑色透明底细胞培养板，配合Annexin V-FITC和PI双染，减少背景干扰并方便显微镜观察。

案例3：化学发光检测

在食品安全检测中，科研人员利用化学发光法检测微量毒素，选用白色96孔板以增强光信号反射，显著提高检测信噪比。

9. 总结

赛默飞酶标仪Varioskan Flash的性能发挥，与耗材选择息息相关。

• 在微孔板选择上，需要综合考虑孔数、颜色、底型和表面处理方式；

• 在光学元件和探针选择上，应根据检测模式匹配波长和信号特性；

• 密封膜、试剂、缓冲液等辅助耗材，则在实验稳定性和数据质量上起到关键作用；

• 对于自动化应用，还要考虑吸头、储液槽等配套耗材的兼容性。