一、Multiskan Ascent酶标仪基本性能概览

Multiskan Ascent是赛默飞推出的一款经典型自动酶标仪，具备以下主要性能特点：

• 波长范围：340–850 nm（可选滤光片配置）

• 支持孔板类型：96孔、384孔标准微孔板

• 读取方式：单波长、双波长、波长扫描

• 检测类型：终点法、动力学法、光谱扫描法

• 光源类型：长寿命卤素灯

• 数据输出：吸光度（OD）值、斜率、浓度计算、光谱图

这些性能决定了Multiskan Ascent在实际应用中的检测广度（适用对象）与检测深度（精度与分辨率）。

二、波长检测范围与比色反应适配性

1. 波长覆盖范围

Multiskan Ascent的滤光片系统支持波长范围为 340 nm 至 850 nm，可自由选择安装：

常用波长包括：

• 340 nm：NADH/NAD⁺吸收峰，用于酶活性动力学；

• 405 nm：pNPP底物显色、ALP活性分析；

• 450 nm：TMB、OPD显色峰，广泛用于ELISA；

• 570 nm：MTT检测；

• 620/630 nm：背景校正波长；

• 750/800 nm：近红外纳米检测或比浊法。

2. 多波长/扫描能力

• 支持双波长检测（主波长+参考波长）；

• 支持波长扫描模式，步长最小可至2 nm；

• 可构建吸收曲线，实现底物筛选与峰值确认。

三、吸光度检测范围与线性性能

1. 吸光度检测范围

Multiskan Ascent在标准设置下，检测范围约为 OD 0.000 ~ 4.000，其中：

• 最小检测限：0.001 OD

• 最大推荐线性范围：0.000 ~ 3.000 OD（依据比色体系调整）

吸光度数值说明：

2. 线性误差与重复性

• 孔间CV值：<2%

• 线性相关系数（R²）：通常>0.995（标准曲线6点以上）

• 重复性误差：中值孔重复检测偏差<±0.01 OD

四、孔型支持与样本体积适配性

1. 孔板兼容范围

2. 样本体积适配性

• 推荐加样体积范围：100–200 µL（96孔板）

• 最小有效体积：80 µL（视光程和波长而定）

• 若体积过少，易导致光路误差、气泡干扰、数据不稳定。

五、检测样本类型与生物体系覆盖

Multiskan Ascent可检测的样本类型极为丰富，适配多种生物化学、细胞学与临床样本：

六、终点法、动力学与光谱检测范围

Multiskan Ascent支持三种主要检测模式，不同模式下适配的检测任务范围各有侧重：

1. 终点法（End-point）

• 一次性读取各孔吸光值；

• 适合反应终止后的定量检测；

• 支持高通量 ELISA、BCA、细胞毒性评估等实验；

• 支持双波长读取，进行背景校正。

2. 动力学法（Kinetic）

• 实时或间隔读取吸光度变化；

• 用于动态反应体系（如酶促、药物释放）；

• 可设置起始延时、读取间隔、反应时间长度；

• 输出“时间–OD”矩阵，计算斜率、速率等指标。

3. 光谱扫描法（Spectral scan）

• 设定波长范围，扫描某孔的完整吸收曲线；

• 应用于：

• 显色底物波长筛选；

• 样本吸收特性评估；

• 多成分干扰峰识别；

• 支持步长设置（如2 nm、5 nm），输出光谱图与吸光峰值。

七、典型检测项目举例

1. ELISA检测范围

• 单/多因子分析：IL-6、TNF-α、IFN-γ、CRP等

• 灵敏度范围：pg/mL 级别（取决于试剂盒性能）

• 检测浓度范围：10⁻² ~ 10³ ng/mL（依据样本稀释程度）

2. 酶活性检测

• NADH系统、HRP/TMB系统、ALP/pNPP系统；

• 检测底物转化速率（斜率）、最大反应速度（Vmax）；

• 动力学参数线性响应区：OD变化率在0.01–0.5/min之间最优。

3. 蛋白定量比色法

• BCA法检测范围：20–2000 µg/mL；

• Bradford法检测范围：1–1500 µg/mL；

• 建议绘制标准曲线并设置3~6个标准点。

4. 细胞检测

• MTT法适配波长：570 nm；

• CCK-8适配波长：450 nm；

• 细胞密度线性响应范围：1×10³ ~ 1×10⁵ cells/well。

八、配套软件处理范围

Multiskan Ascent配备Ascent Software或SkanIt软件（不同版本支持略有差异），支持以下处理任务：

• 多孔批量分析

• 空白孔自动扣除

• 标准曲线自动拟合（线性、对数、四参数、五参数等）

• 多孔平均值、标准差、CV计算

• Kinetic曲线导出

• 光谱图绘制与峰值识别

支持输出格式：

• .csv / .xls：供统计分析与论文作图使用

• .pdf：用于报告归档或实验室审计

• 实时结果打印（需配套打印设备）

九、检测范围边界与注意事项

1. 超线性问题

• OD>3.0 时易超出仪器线性响应区；

• 建议控制样本显色强度或进行稀释；

• 可借助双波长校正延伸线性区间。

2. 低OD稳定性问题

• OD<0.05 容易受背景噪音干扰；

• 应定期校准光学通道并清洁窗口；

• 空白值波动建议控制在 ±0.005 以内。

3. 微量体积影响

• 加样体积过小（<80 µL）时易产生误差；

• 建议使用自动移液器、严格控制液面一致性；

• 避免边缘孔温度不均、蒸发引发偏差。

十、总结与展望

Multiskan Ascent酶标仪凭借宽波长覆盖、精确吸光度检测、多模式读取能力及强大数据处理能力，具备广泛而深度的检测范围，覆盖从基础生命科学研究到临床检验、食品分析、环境监测的多个关键环节。其性能优势体现在：

• 覆盖广泛的波长与底物体系；

• 支持多样化检测模式；

• 适配高、中、低 OD 范围样本；

• 与标准孔板系统兼容性强；

• 数据处理灵活，适应多种科研分析模型。