赛默飞酶标仪 Varioskan Flash 操作步骤详解

一、概述

赛默飞酶标仪 Varioskan Flash 是一款集吸光度、荧光、发光检测等多种模式于一体的多功能微孔板检测仪。它支持从紫外到近红外的全波长扫描，并可与不同类型的微孔板、比色皿及特殊适配器配合使用，满足从基础科研到高通量筛选的多种检测需求。
为了确保仪器发挥最佳性能，用户必须掌握完整的操作流程，保证实验数据的准确性与可重复性。

二、实验前准备

1. 环境检查

• 温湿度：确保实验室温度稳定，湿度适中，避免光学系统受潮或电子部件过热。

• 防震：将仪器置于平稳、坚固的实验台上，远离振动源。

• 供电：使用符合规格的电源插座，保持有效接地。

2. 仪器状态确认

• 检查电源线、数据线连接是否牢固；

• 打开样品舱，检查内部是否清洁；

• 确认光学窗口、滤光片无灰尘或污渍。

3. 耗材与试剂准备

• 按实验需求准备微孔板、比色皿或试管；

• 检查耗材是否有划痕、变形或污染；

• 准备所需试剂和样品，并完成必要的预处理。

三、开机与初始化

1. 开机

• 按下电源开关，等待仪器完成自检。

• 仪器面板或软件界面显示“就绪”状态表示可操作。

2. 软件连接

• 打开配套的 SkanIt 软件；

• 检查软件与仪器的通讯是否正常，如有异常需先排查连接问题。

3. 模块识别

• 若更换过光源、滤光片或检测模块，需执行识别程序；

• 软件会自动加载可用检测模式。

四、方法设定

1. 选择检测模式

• 吸光度模式：用于 ELISA、核酸定量、蛋白测定等；

• 荧光模式：用于荧光染料检测、荧光标记物分析；

• 发光模式：用于化学发光或生物发光检测。

2. 波长与带宽设定

• 输入所需波长值，或选择全波长扫描范围；

• 调整带宽以平衡灵敏度与分辨率。

3. 测量方式

• 终点法：在反应结束后一次性测量；

• 动力学法：连续采集数据以监测反应过程；

• 光谱扫描：在指定波长范围内逐步测量。

4. 板型与孔布局

• 在软件中选择孔板规格（96 孔、384 孔等）；

• 定义标准品、空白、对照和样品孔的位置。

5. 数据处理设置

• 选择曲线拟合方法（如线性回归、四参数、五参数逻辑回归）；

• 设定背景扣除和浓度计算方式。

五、样品准备与加载

1. 加样规范

• 使用校准良好的移液器，确保加样体积一致；

• 避免产生气泡，气泡会影响光路。

2. 孔板处理

• 加样完成后轻轻拍打或短时间振荡混匀；

• 避免液体溅出或交叉污染。

3. 特殊容器

• 比色皿或试管检测时，应将容器放入相应适配器中，确保光路对准。

六、检测过程

1. 装载样品

• 将微孔板或容器放入样品舱，确认放置平整。

• 在软件中选择已设定的方法文件。

2. 运行检测

• 点击“开始”按钮，仪器自动执行测量。

• 对动力学实验，可在实时曲线界面观察反应进程。

3. 监控与中止

• 运行中可查看温控状态、信号强度等参数；

• 若出现异常，可使用“暂停”或“中止”功能。

七、数据处理与导出

1. 实时查看

• 终点法：完成检测后直接显示结果表；

• 动力学法：显示反应曲线与关键参数；

• 光谱扫描：绘制光谱图供分析。

2. 数据分析

• 自动计算浓度值、反应速率或荧光强度比值；

• 检查标准曲线的拟合优度。

3. 数据导出

• 支持导出为 Excel、CSV、PDF 等格式；

• 可将原始数据与处理结果同时保存，以备复核。

八、实验结束与关机

1. 取出样品

• 检测完成后取出微孔板或比色皿，避免残液污染仪器。

2. 清洁

• 若有样品溢出，应立即用无尘布和中性清洁液擦拭；

• 光学窗口需保持洁净。

3. 关机

• 关闭软件并断开通讯连接；

• 关闭仪器电源，长时间不用时拔下电源线并加防尘罩。

九、常见操作问题与解决

十、操作优化建议

1. 建立标准操作规程（SOP）

• 统一实验步骤，减少人员间差异。

2. 批量检测安排

• 合理规划样品数量与顺序，提高效率。

3. 温控与预热

• 对温度敏感实验，应提前预热并保持恒温。

4. 定期校准

• 定期进行波长、光强和温控系统的校准，确保精度。

5. 数据备份

• 每次实验结束后及时备份原始数据与分析结果。

总结

赛默飞酶标仪 Varioskan Flash 的操作流程涵盖了从实验前准备、方法设定、样品加载、检测、数据处理到关机清洁的全链条。熟悉并遵守规范化步骤，不仅能提高实验效率，还能保证结果的准确性与可重复性。通过结合日常维护和校准，仪器能够在长期运行中保持稳定性能，满足多样化的实验需求。