一、测试流程的意义

Multiskan Ascent 是一款多功能光学检测酶标仪，主要用于 ELISA、酶活性测定、细胞增殖实验、蛋白定量等检测。其性能稳定性和数据准确性直接影响实验结果的科学性与可重复性。
标准化的测试流程有助于：

1. 确认设备处于最佳工作状态

2. 发现并排除潜在故障

3. 满足 GLP、GMP、ISO 17025 等质量体系的验证要求

4. 建立实验室性能基线数据

二、测试前准备

1. 环境条件确认

• 室温保持在 20–25 ℃，波动不超过 ±2 ℃

• 相对湿度 40–60% RH，无凝露

• 电源电压稳定在铭牌要求范围内（220–240 V AC，50–60 Hz）

• 避免阳光直射、高粉尘及强电磁干扰

2. 仪器检查

• 电源线与通讯线完好，接地良好

• 滤光片组安装牢固，波长配置符合实验需求

• 托盘运行顺畅，无异响或卡滞

• 光源正常点亮，无闪烁

3. 软件准备

• 启动 Multiskan Ascent 控制软件，确认与设备通讯正常

• 调用或创建测试方法文件（包含波长、测量模式、板型布局等）

4. 标准物与耗材

• 吸光度标准板（OD 固定值）

• 波长校准标准板（带已知透射峰值）

• 中性密封板（重复性测试）

• 标准溶液系列（用于线性测试）

• 96 孔微孔板、移液器及吸头

三、性能验证测试

性能测试建议在首次安装、搬迁后、定期维护后或二手设备到货时执行，主要包括以下项目：

1. 波长准确性

• 方法：使用波长校准标准板，在目标波长下测量透射峰值

• 判定标准：中心波长偏差 ≤ ±2 nm

2. 吸光度准确性

• 方法：用已知 OD 值的标准板（如 0.2、0.8、2.0），在对应波长下测量，计算相对误差

• 判定标准：相对误差 ≤ ±1%

3. 吸光度重复性

• 方法：同一板孔测量 10 次，计算变异系数（CV%）

• 判定标准：CV% ≤ 0.5%

4. 吸光度线性

• 方法：配制不同浓度的染料溶液（0–3.0 OD），绘制浓度–OD 曲线，计算相关系数 R²

• 判定标准：R² ≥ 0.999

5. 孔间一致性

• 方法：用相同溶液填满整板，测量各孔 OD 值，计算最大差值

• 判定标准：差值 ≤ ±0.005 OD

四、样品检测测试流程

在确认设备性能合格后，进入实际样品检测阶段。以下以 ELISA 为例说明。

1. 板型布局设置

• 通过软件标记：

• 空白孔（Blank）

• 标准品孔（Std）

• 样品孔（Sample）

• 质控孔（QC）

• 确认布局与加样方案一致

2. 方法参数设置

• 主波长（如 450 nm）

• 辅波长（如 620 nm，用于背景扣除）

• 测量模式（终点法或动力学法）

• 摇匀时间与幅度（如检测前摇匀 5 秒）

3. 上板与检测

• 将微孔板放入托盘中央定位槽

• 点击“开始”，仪器自动进板并逐孔扫描

• 测量完成后，托盘自动退出

五、数据处理与分析

1. 空白校正

• 软件自动扣除空白孔的 OD 值，修正背景吸光

2. 标准曲线绘制

• 根据标准品浓度与修正后的 OD 值绘制曲线

• 可选择线性、四参数、五参数或对数回归拟合

• 检查相关系数 R²，确保拟合优度

3. 样品浓度计算

• 软件根据曲线方程自动计算各样品的浓度

• 对超出线性范围的样品进行稀释并复测

4. 结果导出

• 输出 Excel、PDF 或 LIMS 格式报告

• 保存原始数据与分析方法文件，便于溯源

六、测试结束与维护

1. 清洁

• 用无绒布擦拭托盘表面

• 若有试剂溅出，应立即清洁，避免腐蚀或污染

2. 软件与仪器关闭

• 保存所有数据并关闭软件

• 关闭仪器电源，待光源冷却后切断电源

3. 定期保养

• 每周检查滤光片、光源与托盘运行状态

• 每月执行波长与吸光度校准

• 每半年进行光学系统清洁（由专业人员完成）

七、二手设备专项测试建议

对于二手 Multiskan Ascent，应增加以下检查：

• 检查光源寿命，必要时更换

• 检查滤光片透过率，确保无划痕或污染

• 检查机械导轨与步进电机运行状态

• 确认通讯接口正常，软件版本与操作系统兼容

八、完整测试流程示例

1. 启动与预热

• 开机并预热光源 10–15 分钟

2. 性能验证

• 波长准确性 → 吸光度准确性 → 重复性 → 线性 → 孔间一致性

3. 方法设置

• 板型布局 → 波长选择 → 测量模式

4. 检测执行

• 上板 → 启动测量 → 实时监控进度

5. 数据分析

• 空白校正 → 曲线拟合 → 浓度计算

6. 结果保存

• 导出数据与报告，备份方法文件

7. 关机与清洁

• 取出板 → 清洁托盘 → 关闭电源

九、结语

标准化的 Multiskan Ascent 测试流程不仅适用于新设备的验收，也适用于日常质控与二手设备性能验证。通过在每一次检测前后执行固定步骤，可以有效减少人为操作误差，保持数据的一致性和可追溯性，并延长设备的使用寿命。在 GLP、GMP、ISO 17025 等合规环境下，这套流程还能满足审计和质量体系的要求。