赛默飞培养箱371清洁流程

一、设备概述

赛默飞（Thermo Fisher Scientific）371型CO₂培养箱是一款高精度细胞培养设备，广泛应用于生命科学、医学研究、药物开发及组织工程等领域。该设备通过恒温、恒湿与稳定的二氧化碳浓度，为细胞生长提供接近生理状态的环境。其设计结构包括六面直热加热系统、自动湿度调节系统、HEPA空气过滤循环系统以及高温干热灭菌模块。

由于培养箱常年处于高湿、高温、富含营养气体的环境中，极易滋生细菌、真菌及霉菌孢子。若清洁不及时，污染将直接影响细胞培养结果，造成实验失败或交叉污染。因此，制定并严格执行标准化的清洁流程是保证实验可靠性的前提。

二、污染来源与清洁必要性

1. 污染来源分析

（1）空气与操作环境污染：实验室空气中存在微生物颗粒，开门取放样品时随气流进入箱体内部。
（2）培养液蒸发与泄漏：培养液或试剂滴落到腔体底部，形成富含营养的污染源。
（3）操作人员携带污染：手套、器皿、培养皿等表面附着微生物，接触腔体内壁时可能传播。
（4）湿度盘水体污染：若长期不更换水或使用非灭菌水，微生物会在水盘内大量繁殖。
（5）过滤系统老化：HEPA滤芯使用时间过长会降低过滤效率，使污染物随空气循环进入腔体。

2. 清洁的重要性

培养箱的清洁不仅关系到实验数据的准确性，更直接影响细胞存活率和实验安全性。

• 定期清洁可防止霉菌孢子和细菌形成生物膜。

• 有助于保持CO₂传感器精度与气体流通顺畅。

• 延长设备使用寿命，避免内部部件腐蚀。

• 确保高温灭菌功能的有效执行。

三、清洁与灭菌原则

在正式清洁前，需明确以下四项基本原则：

1. 先断电后操作：清洁前务必关闭电源、气源并拔掉插头，防止电击与元件损坏。

2. 先外后内、先上后下：清洁顺序从外部表面到内部腔体，从顶部至底部，避免污水回流污染。

3. 区分干湿清洁阶段：先进行干式清理以去除固体残留，再进行湿擦与化学消毒。

4. 禁止使用强酸强碱：所有清洁剂应为中性或弱碱性，以防腐蚀不锈钢内腔与传感器。

四、标准清洁流程

（一）准备阶段

1. 停机与冷却

• 关闭培养箱电源并切断CO₂气源。

• 若设备近期使用过高温灭菌功能，应等待腔体自然降温至室温。

2. 移除内部物品

• 取出所有培养皿、瓶、架及水盘，并记录摆放顺序。

• 将样品转移至备用培养箱或低温保存装置中。

3. 防护与清洁用品准备

• 穿戴实验服、手套、口罩与防护眼镜。

• 准备无纤维布、无尘纸、喷瓶、70%乙醇或异丙醇、无离子水、灭菌蒸馏水。

• 若需深度清洁，可准备低残留中性洗涤剂溶液（稀释浓度0.5–1%）。

（二）外部清洁

1. 机体外壳

• 用微湿的软布蘸取中性清洁剂，沿同一方向擦拭外壳表面。

• 注意通风口及接缝处的灰尘积聚，可使用软毛刷轻轻清理。

• 避免清洁液流入控制面板或通电接口。

2. 控制面板与显示屏

• 使用70%乙醇轻拭表面，不可直接喷洒。

• 检查按键灵敏度及显示状态，确认无残留液体。

（三）内部腔体清洁

1. 拆卸内部部件

• 取出搁板、托架、导气罩、水盘及传感器保护罩。

• 按顺序编号放置，便于清洁后复原。

2. 初步清除污染物

• 使用无尘布擦去腔体内的水渍、培养液残留或杂质。

• 对积垢部位可用温水浸泡后擦拭。

3. 中性洗涤剂清洁

• 将稀释后的洗涤液喷洒在内壁、角落及搁板上。

• 静置3–5分钟后用湿布反复擦净，确保不留化学残留。

4. 清水漂洗

• 用无离子水或灭菌水擦拭至少两遍，彻底去除残留清洁剂。

• 确保每次擦拭布为干净状态，避免交叉污染。

5. 酒精消毒

• 使用70%乙醇或异丙醇擦拭整个内壁及配件。

• 重点处理门密封条、转角、风道入口及CO₂喷嘴。

• 静置自然风干，不使用加热烘干方式，以免残留酒精蒸汽引燃。

（四）湿度盘与水路系统清洁

1. 清洗水盘

• 倒掉残余水，使用中性洗涤液清洗表面后冲净。

• 用乙醇再次擦拭，并以灭菌水漂洗干净。

2. 水质管理

• 推荐使用灭菌蒸馏水或高纯去离子水，不得使用自来水。

• 每周更换一次水，防止微生物滋生。

3. 检查蒸发表面

• 确认水盘底部无沉淀、无粘附污染物。

• 若发现锈斑或白色水垢，可使用柠檬酸溶液轻微擦拭，再以清水漂净。

（五）HEPA过滤与通风系统维护

1. 检查过滤器状态

• 若设备带有HEPA循环模块，需观察滤芯是否积尘或变色。

• 一般建议每6个月至1年更换一次。

2. 风道清洁

• 关闭风机后，用无尘布擦拭风口区域。

• 禁止用强力气流吹扫，以免损伤风机轴承。

3. 重装前确认

• 滤网干燥后重新安装，确保密封圈完好。

• 检查风机运转声音是否平稳。

（六）门体与密封结构清洁

1. 内外门玻璃

• 使用无纤维布和酒精轻擦，不可使用含氨清洁剂。

• 清洁后用干布擦干防止水印残留。

2. 密封圈

• 取下硅胶门封条，用温水及中性洗剂清洗，彻底擦干。

• 检查密封圈是否有破损或老化，必要时更换。

3. 门内加热装置检查

• 确保加热线未被液体浸湿。若有水渍，需完全干燥后再通电。

（七）传感器与气体接口维护

1. CO₂传感器

• 若为热导型传感器，禁止使用液体清洁，应使用干净棉签轻拭表面灰尘。

• 每半年进行一次校准，以保证测量精度。

2. 气体接口

• 检查进气口是否有杂质或水汽。

• 用干燥空气吹净接口，确认密封圈完好无裂纹。

3. 管路检查

• 若CO₂供气管出现水汽回流，应立即断开并更换干燥过滤器。

（八）内部灭菌与烘干阶段

1. 自然干燥

• 清洁完毕后保持门开启状态，待内部完全干燥。

• 不可使用外部加热源或吹风机。

2. 执行高温灭菌程序

• 关闭门体，开启Steri-Cycle高温灭菌模式。

• 灭菌温度140℃，持续时间约14小时。

• 灭菌结束后自动冷却，直至腔体温度恢复常温。

3. 灭菌验证

• 检查控制面板确认灭菌流程完成且无报警信息。

• 若有温度异常或程序中断，应重新运行灭菌程序。

（九）复原与运行验证

1. 组件复装

• 按清洁前编号顺序装回搁板、托架、风道罩与水盘。

• 确认所有部件牢固、平整。

2. 电气与气源连接

• 插入电源插头并开启总电源。

• 重新连接CO₂气瓶，检查压力表是否稳定。

3. 功能测试

• 设定温度37℃、CO₂浓度5%，运行24小时。

• 观察温度、湿度及气体浓度稳定性。

• 若数据恢复正常且无报警，说明清洁与灭菌效果良好。

五、定期维护与周期安排

通过科学的周期管理，能有效防止生物膜形成和气体传感器漂移，保持培养环境长期稳定。

六、注意事项与安全要求

1. 清洁过程中避免金属刷、粗糙海绵等硬质工具，以防刮伤不锈钢腔体。

2. 清洁剂不得含氯或氨成分，避免腐蚀及残留气味。

3. 若发现培养液泄漏到电加热元件周围，应立即断电并联系专业人员检修。

4. 灭菌程序运行时严禁开启箱门或断电，以免造成系统异常。

5. 所有清洁布、棉签和手套均应为一次性使用，防止交叉污染。

6. 清洁结束后应记录清洁日期、操作人及检查人，建立可追溯档案。

七、常见问题与解决方法

八、长期保养建议

1. 建立清洁档案
   对每次清洁、灭菌及维护记录日期、操作人、使用清洁剂类型、耗时及检测结果，形成完整档案以供追踪。

2. 环境控制
   保证实验室空气洁净度，避免灰尘及微生物过度进入。空气过滤系统应定期维护。

3. 合理使用设备
   避免长期满负荷运行，培养皿间保持通风间距。

4. 定期培训人员
   操作人员应熟悉清洁流程及安全守则，掌握应急处理方法。

5. 专业检修与年度保养
   每年至少进行一次由专业工程师执行的全面维护，包括电气系统、加热元件、传感器、过滤装置的检测与更换。

九、清洁后的验证与环境检测

在完成清洁与灭菌操作后，为确保设备内环境符合生物培养要求，应进行以下验证步骤：

1. 微生物检测
   使用培养皿暴露法或拭子采样，对腔体内壁及水盘区域进行检测。若菌落数为零，说明灭菌彻底。

2. 空气洁净度检测
   开启循环风机后使用尘埃粒子计数仪检测空气洁净度，应符合ISO 5级标准。

3. 温湿度稳定性测试
   连续记录24小时内温湿度波动，应分别控制在±0.3℃和±3%RH以内。

4. 气体浓度稳定性
   测试CO₂浓度恢复速度，应在15分钟内恢复至设定值并保持稳定。

若上述指标均达标，即可正式投入实验使用。

十、结语

赛默飞371型CO₂培养箱作为高精度生物培养设备，其清洁流程不仅是维护设备性能的必要环节，更是实验室质量控制的重要组成部分。规范的清洁流程能有效防止交叉污染，延长设备寿命，保障细胞培养环境的稳定性。

通过建立科学的周期性维护制度、严格执行操作标准、强化人员培训与记录管理，可将污染风险降至最低。只有在“清洁、灭菌、维护”三环合一的体系下，才能充分发挥371培养箱的高性能优势，为科研工作提供长期稳定的支持。