赛默飞洗板机 Wellwash 1x8 校准方法详解

一、设备概述

赛默飞 Wellwash 1x8 洗板机是一款面向常规 ELISA 实验和 96 孔微孔板清洗任务的自动化设备。它采用 单排 8 通道喷头，能够逐行完成清洗任务。相较于 1x12 型号，1x8 更适合精细化清洗，液体使用量较低，尤其适用于实验量中等、对操作灵活度要求较高的实验室。

校准是保证 Wellwash 1x8 稳定运行的前提。只有通过科学的校准方法，才能确保喷液均匀、吸液彻底、针头高度精准，从而避免因残液过多、洗涤不均而影响 ELISA 信号读数。

二、校准的目的与意义

1. 确保液体分布均一

• 保证每一行 8 个孔内液体体积一致，避免边缘效应。

2. 降低背景信号

• 通过校准，残液量减少，未结合物被完全去除，从而减少假阳性和背景噪音。

3. 延长设备寿命

• 合理的参数设定减少管路堵塞、针头损耗，提高使用寿命。

4. 提升实验可重复性

• 在不同批次、不同人员操作下，仍能获得一致的清洗效果。

三、校准前的准备工作

1. 环境与设备检查

• 确保设备放置平稳，避免震动。

• 室内温度保持在 15-30℃，相对湿度低于 70%。

• 电源电压稳定，插座接地良好。

2. 液体与耗材准备

• 使用新鲜 PBS、TBS 或 PBS-T 缓冲液作为校准用清洗液。

• 配备标准 96 孔微孔板，建议使用透明板，便于观察残液。

• 准备少量带色染液（如稀释甲基蓝），用于检测清洗均一性。

3. 管路与针头检查

• 确认进液瓶中液体充足，废液瓶为空。

• 检查进液管、废液管无漏液。

• 确认 8 个喷针排列整齐，无弯曲或堵塞。

四、核心校准步骤

1. 开机自检与液路排气

• 打开电源，等待系统完成自检。

• 运行“Prime”功能，将清洗液充满管路，排除空气泡。

• 观察 8 个喷针是否同时均匀出液。若有不畅，需进一步清洗或疏通。

2. 进液体积校准

• 设定初始进液体积（如 300 μL/孔）。

• 将程序运行一次，观察每孔液体高度。

• 若液体不足，可逐步增加进液量至 350 μL；若溢出，则调小体积或减慢注液速度。

3. 吸液针高度校准

• 将针头调整至接近孔底但不接触，通常为 0.1-0.2 mm 间隙。

• 运行程序，检查残液：

• 若残液明显，则说明针头过高；

• 若针头划伤孔底，则说明过低。

• 最佳状态是孔底仅留一层极薄水膜。

4. 吸液延时与泵速调节

• 在程序中增加 1-2 秒吸液延时，确保液滴完全被抽出。

• 对于高粘度液体，可适度减缓泵速，避免吸液不彻底。

5. 浸泡时间校准

• 对于标准 ELISA，浸泡 20-30 秒即可。

• 若非特异性结合较强，可延长至 60 秒。

• 若细胞附着实验，应减少浸泡时间，避免目标细胞脱落。

6. 清洗次数优化

• 默认 3 次清洗足以满足大部分实验。

• 对于背景高的实验，增加至 5 次；对于敏感实验，避免过度清洗以免损伤结合物。

7. 均一性测试

• 在校准过程中，使用染色液检测清洗效果：

• 将染液加入孔内，运行清洗程序；

• 观察残留颜色是否一致；

• 若边缘孔与中间孔差异较大，需检查板托水平或针头对齐度。

五、功能验证与调试实验

1. 空板验证

• 使用空板运行一次，确认喷液和吸液动作流畅。

2. 残液量测定

• 清洗后称量微孔板，计算残液量，判断吸液是否充分。

3. 重复性实验

• 连续运行同一程序 5 次，检查不同板间清洗效果是否一致。

4. 仪器内部检查

• 运行完成后，检查泵体和管路有无异常噪音或震动。

六、常见问题与解决方案

1. 喷液不均

• 原因：针头堵塞或有气泡。

• 解决：用超声波清洗针头或重新排气。

2. 吸液不彻底

• 原因：针头过高、泵压不足或残液滞留。

• 解决：调低针头、增加吸液延时、检查泵压。

3. 清洗效果不一致

• 原因：板托不平或针头排列偏斜。

• 解决：调整板托水平，重新安装针头。

4. 背景偏高

• 原因：洗涤不充分或缓冲液不合适。

• 解决：增加清洗次数或更换缓冲液。

5. 管路渗漏

• 原因：接口松动或老化。

• 解决：重新安装或更换管路。

七、维护与优化

1. 每日维护

• 校准完成后，运行去离子水清洗程序。

• 倒空废液瓶并冲洗干净。

2. 定期维护

• 每周检查针头是否有盐析，必要时清洗。

• 每月检查泵体和管路密封性，替换老化部件。

3. 长期停机保护

• 用纯水冲洗管路，再注入 70% 酒精保存。

• 覆盖防尘罩，保持干燥环境。

4. 建立 SOP

• 将校准步骤记录为实验室操作规程，确保不同人员操作一致。

八、应用经验总结

1. ELISA 实验

• 推荐 PBS-T 缓冲液，校准进液体积 300 μL，吸液延时 2 秒，清洗 4 次。

2. 细胞相关实验

• 避免高压冲洗，进液速度设为中等，针头高度略高，保护细胞层。

3. 大批量样本检测

• 建议批量校准参数并保存为固定程序，减少重复设置。

4. 多人员操作实验室

• 应建立电子记录表格，追踪每次校准参数和结果，方便追溯。

九、总结

赛默飞 Wellwash 1x8 洗板机的校准方法涉及 液路排气、进液体积调节、针头高度设定、吸液延时控制、浸泡时间与清洗次数优化 等多个环节。科学的校准不仅能显著降低背景噪音，还能提升实验重复性和准确性，同时延长设备寿命。通过建立标准化操作规程，结合日常维护与经验积累，实验室能够稳定发挥 Wellwash 1x8 的性能，为 ELISA 和相关检测提供可靠保障。