赛默飞分光光度计BioMate 160实验设置

一、前言

BioMate 160是赛默飞公司推出的一款高性能紫外-可见分光光度计，具有波长范围广、检测灵敏度高、操作便捷等优势。仪器不仅能满足常规吸光度和透过率的测定，还能实现DNA/RNA浓度检测、蛋白分析、动力学反应监测和多组分定量分析等应用。要获得准确可靠的结果，科学合理的实验设置至关重要。

二、实验前准备设置

1. 环境条件

• 温度控制：实验室温度保持在20~25℃，避免剧烈波动。

• 湿度要求：相对湿度控制在60%以下，防止光学系统受潮。

• 光照条件：远离强光直射，避免外部光干扰检测。

• 防震措施：仪器应放置在稳定台面，避免震动引起光路不稳。

2. 电源检查

• 电源电压保持在220V±10%。

• 避免与大功率设备同一电源回路，减少电磁干扰。

3. 仪器开机与预热

• 打开电源后至少预热15分钟。

• 执行自检程序，确保光源、波长和检测器正常。

4. 样品与比色皿准备

• 样品需经过适当稀释，保证吸光度在0.2~1.0之间。

• 紫外区使用石英比色皿，可见区使用光学玻璃比色皿。

• 比色皿透光面需洁净、无水痕或指纹。

三、基础实验设置

1. 波长设定

• 单波长测定：输入目标波长，如核酸测定常用260 nm。

• 多波长测定：输入多个特征吸收峰波长，用于多组分分析。

• 扫描范围：设定起止波长与步长，如200~800 nm，步长1 nm。

2. 模式选择

• 吸光度模式（Abs）：适合溶液浓度与吸收峰强度的关系研究。

• 透过率模式（T%）：用于检测光透过率。

• 浓度模式（Conc）：结合标准曲线进行定量分析。

• 动力学模式（Kinetics）：实时监测反应过程。

3. 光源选择

• 氘灯：适合200~350 nm紫外区。

• 钨灯：适合350~800 nm可见区。

• 自动切换：根据波长范围由系统自动切换。

4. 空白校正

• 使用溶剂作为空白，在设定波长下进行零点校正。

• 保证测量数据排除了溶剂和比色皿吸收的影响。

四、实验设置的详细流程

1. DNA/RNA检测实验设置

• 波长选择：260 nm（核酸）、280 nm（蛋白）、230 nm（有机物杂质）。

• 计算方式：仪器自动给出260/280比值和260/230比值。

• 样品稀释：确保A260值在0.2~1.0范围内。

• 保存格式：数据可导出为CSV或图形曲线。

2. 蛋白浓度测定实验设置

• 常用方法：考马斯亮蓝法、Lowry法、双缩脲法。

• 波长设定：一般选择595 nm（考马斯亮蓝法）。

• 标准曲线设置：输入标准品浓度与对应吸光度，建立曲线。

• 实验数据处理：自动计算样品浓度。

3. 动力学实验设置

• 测量间隔：根据反应速度设定，如每隔10秒采集一次。

• 测量时间：可设定几分钟到几小时。

• 温控条件：若配有温控附件，可保持恒温。

• 输出结果：仪器实时绘制曲线，输出速率常数等数据。

4. 波长扫描实验设置

• 扫描范围：如200~800 nm。

• 步长选择：1 nm或更小。

• 扫描速度：快速扫描用于样品预览，慢速扫描提高分辨率。

• 结果输出：生成光谱曲线，可用于峰值位置和形状分析。

5. 多组分定量实验设置

• 波长选择：输入各组分特征波长。

• 矩阵输入：预设标准溶液吸光度矩阵。

• 自动计算：仪器通过线性代数方法分离不同组分浓度。

五、数据保存与导出设置

1. 存储方式

• 内部存储：适合短期保存。

• U盘导出：适合长期保存和后期分析。

2. 文件命名规范

• 格式示例：20250818_SampleA_DNA260nm

• 包含日期、样品编号和实验类型，方便溯源。

3. 输出文件类型

• 数据文件：CSV格式，便于统计软件处理。

• 图像文件：JPG或PDF，用于报告和展示。

六、实验设置中的注意事项

1. 比色皿方向一致：始终保持一致的放置方向，避免光程差异。

2. 避免气泡干扰：上样时注意排除气泡。

3. 样品混匀：测量前需充分混匀，避免分层。

4. 样品浓度控制：吸光度超过1.5需稀释后再测。

5. 重复性验证：重要样品至少测三次，取平均值。

七、常见误差与调整设置

1. 基线漂移：应延长预热时间或检查光源。

2. 波长偏移：通过标准滤光片校准波长。

3. 吸光度不稳定：检查比色皿是否清洁或是否有气泡。

4. 信号噪音大：检查环境是否有电磁干扰。

八、实验后设置与关机

1. 退出程序：完成实验后退出当前测量模式。

2. 数据备份：确认数据已保存至外部存储。

3. 光源关闭：若无实验需立即关机，延长光源寿命。

4. 比色皿清理：用去离子水冲洗干净，擦干保存。

九、良好实验设置习惯的重要性

合理的实验设置不仅保证了数据的准确性和可重复性，还能提升实验效率，避免重复操作带来的资源浪费。同时，良好的实验设置习惯也能减少人为误差，让BioMate 160的性能得到充分发挥。

十、总结

赛默飞BioMate 160分光光度计的实验设置涵盖了环境条件、电源检查、波长选择、模式设定、空白校正、标准曲线建立、数据保存及误差调整等多个方面。不同实验类型需要不同的设置方案，但核心原则始终是标准化、精确化和规范化。实验人员应在日常操作中不断积累经验，形成适合自身研究方向的设置模板，从而在科研与检测工作中取得高效、可靠的成果。