赛默飞分光光度计 BioMate 160 使用注意事项

一、概述

赛默飞（Thermo Fisher Scientific）BioMate 160 分光光度计是一款广泛应用于生命科学、医学、环境监测、药物检测及教学实验的紫外-可见分光光度计。仪器操作简便，检测结果稳定，但要获得准确可靠的数据，必须严格遵循使用注意事项。本文将系统介绍从仪器准备到维护全过程中的操作要点，帮助实验人员正确使用该设备，避免因操作不当导致的误差或故障。

二、操作前的准备事项

1. 仪器环境要求

• 温度与湿度：实验室应保持在 20–25 ℃，湿度控制在 40%–60%。温湿度过高会影响光学元件稳定性，过低则可能产生静电干扰。

• 电源稳定性：电压要求 220 V±10%，应避免电压波动过大，必要时使用稳压电源。

• 环境光控制：避免强光直射或强烈散射光，以减少光学干扰。

• 防尘与通风：实验室应清洁，仪器周围保持通风，避免灰尘进入光学系统。

2. 仪器检查

• 光源检查：氘灯和钨灯寿命有限，应定期检查亮度和稳定性。

• 比色皿槽检查：确保比色皿槽内无异物和污渍。

• 开机自检：开机后观察自检结果，确认光源、检测器和电路状态正常。

3. 样品准备

• 溶液澄清度：样品必须澄清透明，若有浑浊需离心或过滤。

• 浓度范围：吸光度宜控制在 0.1–1.0 范围，过高需稀释。

• 对照液准备：参比溶液与样品溶剂必须一致，以保证校准准确。

• 避免气泡：加样时应避免产生气泡，否则会影响光路。

三、使用过程中的注意事项

1. 开机与预热

• 开机后应先选择所需光源，并预热 10–15 分钟，使光源达到稳定状态。

• 不宜频繁开关光源，以延长灯泡寿命。

2. 波长设定

• 波长应根据实验要求准确设定。

• 波长校准应定期进行，防止偏差导致测定误差。

3. 比色皿操作

• 使用石英比色皿进行紫外检测，使用光学玻璃比色皿进行可见光检测。

• 比色皿外壁必须保持清洁，无指纹、水滴或划痕。

• 比色皿放入时方向需保持一致，以减少光程差异造成的误差。

4. 空白校准

• 在正式测定前必须进行空白校准。

• 校准液体应为与样品相同的溶剂或缓冲液。

5. 光度测定

• 样品应迅速测定，避免因光照或氧化造成性质改变。

• 对动力学实验，应保持温度恒定，保证曲线平滑。

• 多次测定时，样品应充分混匀后再取用，避免浓度不均。

四、实验优化注意事项

1. 样品优化

• 对核酸和蛋白质检测，应保证纯度，避免盐离子或有机物干扰。

• 对细胞悬液，应在测定前轻轻混匀，避免沉降或团聚。

2. 操作优化

• 每个样品至少重复测量三次，取平均值。

• 在定量实验中，应先绘制标准曲线，再对未知样品进行计算。

• 对酶动力学实验，应设定合适的采样间隔。

3. 数据处理优化

• 对核酸检测，需同时记录 A260、A280 和 A230，进行纯度判断。

• 对蛋白质检测，若采用染料法，应在合适波长（如 595 nm）检测。

• 对生长曲线监测，应定时测量 OD600，避免过度稀释或浓缩。

五、维护与保养注意事项

1. 日常维护

• 每次实验后，应及时清理比色皿槽，避免残留液体腐蚀。

• 比色皿应用专用清洁液清洗，并避免接触硬物划伤。

• 光学窗口应用无尘布轻拭，严禁使用粗糙纸巾。

2. 定期维护

• 光源灯泡寿命有限，氘灯一般 1000 小时左右，应及时更换。

• 定期进行波长校正和光度校正，保证数据准确性。

• 定期检查风扇与散热口，防止灰尘堵塞。

3. 长期停用

• 若仪器长期停用，应切断电源，覆盖防尘罩。

• 光源应取下单独保存，避免受潮或损坏。

六、常见问题的预防与处理

1. 吸光度异常偏高

• 预防：避免样品过浓，确保比色皿干净。

• 处理：适当稀释样品并重新测定。

1. 基线漂移

• 预防：保证光源充分预热，保持比色皿清洁。

• 处理：重新进行空白校准。

1. 重复性差

• 预防：规范操作，避免样品分层。

• 处理：重新混匀样品，多次取样测定。

1. 灯泡亮度不足

• 预防：减少频繁开关灯源。

• 处理：更换氘灯或钨灯。

1. 波长偏差

• 预防：定期进行校准。

• 处理：联系专业人员进行维护。

七、实验安全与管理注意事项

1. 实验安全

• 操作人员需佩戴实验服、手套和护目镜。

• 对含有有毒或强腐蚀性样品，应在通风橱内操作。

• 样品溢出应立即清理，避免腐蚀比色皿或仪器。

2. 实验记录

• 每次测定应详细记录波长、样品编号、吸光度值。

• 对关键实验，应保存光谱数据文件以便复查。

3. 人员培训

• 使用人员必须经过培训，熟悉仪器原理与操作规程。

• 不得由未经授权的人员私自操作或拆卸仪器。

八、应用案例中的注意要点

案例一：核酸检测

• 注意比色皿使用石英材质；

• 检测前避免 RNA 降解；

• A260/A280 比值应在 1.8–2.0。

案例二：蛋白质定量

• 若采用紫外吸收法，避免缓冲液中含有吸收干扰物；

• 若采用染料法，应在标准曲线浓度范围内测定。

案例三：酶动力学实验

• 温度控制至关重要；

• 实验过程中保持恒温，避免反应速率波动。

案例四：细胞生长曲线

• 在 OD600 测定时，必须轻柔混匀培养液；

• 防止细胞沉淀导致数据失真。

九、未来发展与优化方向

1. 自动化升级

• 与自动进样系统结合，减少人工误差。

1. 信息化管理

• 数据可直接上传至实验室管理系统，实现追溯与共享。

1. 智能诊断

• 仪器具备自我诊断功能，自动提醒光源寿命与校准情况。

总结

赛默飞分光光度计 BioMate 160 在科研与教学中发挥着重要作用。要确保实验结果准确可靠，必须在 环境条件、样品准备、操作细节、维护保养、安全规范 等方面严格遵循使用注意事项。只有通过规范化管理和科学化操作，才能最大程度发挥该仪器的性能，为科研和应用提供有力支持。