分光光度法是分析化学和生命科学中最常见的检测方法之一,能够通过物质对特定波长光的吸收情况来进行定量和定性分析。赛默飞分光光度计 BioMate 160 是一款集精确性、稳定性与易操作性于一体的 UV-Vis 分光光度计,被广泛应用于生物医药、食品检测、环境监测和材料科学等领域。
要想发挥 BioMate 160 的最大性能,必须掌握科学规范的操作方法。本指南将为用户提供完整的操作流程,从设备准备、参数设置到数据处理,结合常见问题解决与维护保养,帮助用户快速熟悉并高效使用该设备。
BioMate 160 采用紫外-可见光检测原理,波长覆盖范围为 190–1100 nm,能够完成核酸、蛋白质、酶学反应以及化学物质的光谱分析。其主要特点包括:
光学性能稳定:采用氘灯和钨灯双光源,保障全波段检测能力。
多功能检测模式:支持定量分析、波长扫描、动力学测定、多波长测试。
软件界面直观:菜单化操作设计,支持多种数据格式导出。
数据可靠性高:具备基线校正、曲线拟合与背景扣除功能。
在操作 BioMate 160 之前,需做好以下准备:
确认电源接通,电源线与保险丝完好。
打开比色皿仓,检查是否有灰尘或残留液体。
检查光源寿命,若使用时间过长,应提前准备备用灯。
保持实验室温度 20–25℃,湿度 40–60%。
避免阳光直射与强磁场干扰。
保持操作台整洁,防止试剂溅入样品仓。
配制合适的缓冲液与标准溶液。
检查比色皿是否清洁透明。
准备移液器、吸头等常用耗材。
接通电源,打开仪器开关。
等待系统自检,确认光源与光路无异常。
预热 15–30 分钟,保证光源稳定。
打开配套软件,选择用户身份进入主界面。
根据实验需求选择相应模块:
定量分析:核酸、蛋白浓度测定。
波长扫描:绘制吸收光谱。
动力学:检测反应随时间的变化。
多波长测试:同时检测多个波长。
将比色皿或微量检测附件放入样品仓。
使用缓冲液或空白对照作为 baseline,点击“调零”。
逐一放入待测样品,点击“开始测量”。
波长范围:如 200–800 nm。
扫描速度:可选择快速、中速、慢速。
积分时间:延长积分时间可提高信噪比。
采样间隔:动力学实验需合理设置间隔。
软件自动显示吸光度曲线或表格数据。
对结果可进行平滑、拟合或基线校正。
保存为 CSV、TXT、PDF 等格式,或直接打印报告。
标准曲线法
在定量模块中输入标准溶液浓度,绘制吸光度-浓度曲线。
系统自动计算相关系数,并用于未知样品浓度换算。
核酸纯度判定
通过 A260/A280 比值判断纯度:1.8–2.0 表示较高纯度。
蛋白质测定
紫外法:280 nm 吸收峰直接计算浓度。
Bradford 法:595 nm 测定,结合标准曲线换算。
动力学分析
通过曲线斜率计算酶活性或反应速率。
多波长比较
同时获得多个波长的吸收值,用于复杂体系定量或杂质判定。
吸光度值过高
样品浓度过大,需稀释后重测。
基线漂移
光源老化或温度不稳,应更换光源或延长预热。
重复性差
可能因比色皿未清洁、移液误差或样品混匀不足。
软件无法连接仪器
检查 USB 连接线和驱动程序。
曲线噪声大
适当延长积分时间,降低扫描速度。
光源维护
定期检查使用时间,超过寿命需及时更换。
比色皿管理
使用后立即清洗并烘干,避免残留影响。
光路清洁
使用无水乙醇与无尘布定期擦拭光路窗片。
软件升级
定期检查更新,获取最新功能与补丁。
存储管理
定期备份实验数据,避免丢失。
在 260 nm 下测定吸光度。
软件自动换算 DNA 浓度,并结合 A260/A280 判断纯度。
使用 Bradford 显色法,在 595 nm 下测定吸光度。
绘制标准曲线,换算未知样品浓度。
设置动力学模式,采样间隔 10 秒,总时长 10 分钟。
曲线斜率即为反应速率。
在 200–800 nm 范围内扫描,识别特征吸收峰。
赛默飞 BioMate 160 分光光度计具备 操作简便、功能齐全、数据可靠 等优势。通过严格遵循操作指南,用户可以快速完成从样品准备、参数设置到数据分析的全流程,保证实验结果的准确性与可重复性。
在操作过程中,应注重 对照设置、样品处理与参数调整,避免因操作不当带来的误差。
在维护方面,应坚持 光源管理、比色皿清洁、数据备份,保障设备长期稳定运行。
在应用方面,BioMate 160 不仅能满足常规的核酸与蛋白质检测,还可扩展至环境检测与材料科学研究,具有广泛适用性。
通过科学规范的使用和管理,BioMate 160 将成为实验室中可靠的分析工具,为科研和检测工作提供高效支持。
杭州实了个验生物科技有限公司