赛默飞分光光度计BioMate 160操作步骤

一、引言

赛默飞BioMate 160分光光度计是一款高性能紫外-可见光分析仪器，广泛应用于核酸蛋白定量、药物分析、环境监测、食品检测和材料研究等领域。为了保证检测结果的准确性和操作过程的安全性，使用人员必须掌握系统、规范的操作步骤。本文将从操作准备、开机流程、样品测定、数据处理、关机与维护等方面，全面介绍BioMate 160的操作流程，帮助实验人员高效完成各类实验。

二、操作前准备

1. 环境准备

• 实验环境：仪器应放置在稳固的实验台上，远离阳光直射与强磁场干扰。

• 温湿度条件：建议温度20–25℃，湿度40%–70%，避免过湿或过干对光学系统造成影响。

• 电源：使用220V ±10%的交流电，配合稳压电源，确保供电稳定。

2. 仪器检查

• 外观检查：确认设备外壳无裂痕、接口无松动，显示屏无异常。

• 光源检查：氘灯与钨灯累计使用时间需记录在册，若接近寿命需提前更换。

• 样品室检查：内部无液体残留和灰尘，比色皿座清洁完整。

3. 实验耗材与工具准备

• 标准比色皿或微量比色池。

• 待测样品与空白对照溶液。

• 擦拭镜头纸与无水乙醇。

• 数据记录本或外接电脑存储介质。

三、开机与初始化步骤

1. 开机流程

1. 接通电源，按下电源开关。

2. 设备自动进入自检程序，显示屏出现初始化界面。

3. 仪器预热20–30分钟，保证光源稳定。

2. 系统设置

• 语言选择：根据实验室习惯选择中文或英文操作界面。

• 日期与时间校正：确保数据记录准确。

• 用户登录：若启用分级权限，需输入相应账号与密码。

3. 波长校准

• 使用标准滤光片或氘灯发射线进行校准。

• 确保偏差小于±1 nm，否则需进行调整。

四、操作步骤详解

1. 空白调零

• 将空白溶液加入比色皿，放置于样品室。

• 选择“空白”功能，系统自动记录透过率或吸光度零点。

• 确保比色皿外壁干净透明，避免影响光路。

2. 单波长测定

• 设置目标波长，例如260 nm测定核酸浓度。

• 插入样品比色皿，仪器显示吸光度或透过率值。

• 可选择浓度计算模式，系统自动换算结果。

3. 全波长扫描

• 设定扫描范围（如200–800 nm）。

• 设定步长（0.5–1 nm）与扫描速度。

• 启动扫描，仪器绘制完整光谱曲线。

• 将结果保存至内部存储或导出至外部设备。

4. 动力学实验

• 设定目标波长与采样时间间隔（如10秒/点）。

• 放入反应体系样品，启动时间扫描。

• 仪器实时绘制吸光度随时间变化曲线。

• 可自动计算初始速率、反应常数等参数。

5. 定量分析

• 选择定量功能，输入标准曲线浓度与对应吸光度。

• 系统自动生成回归曲线（直线或多项式拟合）。

• 测定未知样品吸光度后，仪器自动计算浓度结果。

6. 多波长测定

• 选择多个波长（如260 nm与280 nm），分别测量样品。

• 系统计算比值（如A260/A280），评估核酸或蛋白纯度。

7. 差分光谱

• 同一样品在两种条件下测定吸收光谱。

• 选择“差谱”功能，系统输出差分结果。

• 可用于检测弱吸收峰或环境变化对样品的影响。

五、数据处理与输出

1. 数据保存

• 实验结果可保存于仪器内置存储器。

• 通过USB接口导出至U盘或电脑。

2. 数据分析

• 内置软件支持基线校正、平滑处理、峰值检索等功能。

• 可生成表格、光谱图，并进行统计计算。

3. 数据导出格式

• Excel、CSV、图像格式均可导出。

• 支持与LIMS系统对接，便于实验室数据管理。

六、操作后步骤

1. 样品处理

• 移除比色皿，用去离子水清洗并擦干。

• 若使用了易污染的样品，需用乙醇清洗样品室。

2. 关机流程

• 在软件中选择“关机”命令，关闭光源。

• 待风扇停止后，关闭总电源。

• 覆盖防尘罩，保持仪器清洁。

3. 日常维护

• 每次实验后检查样品室和比色皿。

• 每周记录光源使用时间，及时更换老化灯管。

• 定期进行波长和光度校准。

七、注意事项

1. 比色皿方向：刻度面始终朝向光源同一方向。

2. 光源预热：氘灯至少需20分钟预热，否则会导致数据不稳。

3. 溶液体积：液面高度必须高于光路，避免检测失败。

4. 避免振动：实验过程中不得随意移动仪器。

5. 定期维护：建议每年由厂家工程师进行一次全面保养。

八、常见操作问题及解决

1. 无法调零

• 检查比色皿是否有水珠或污渍。

• 确认空白溶液是否新鲜。

2. 光谱异常噪声

• 检查光源是否接近寿命极限。

• 样品室是否有灰尘或指纹污染。

3. 结果偏差大

• 核实标准曲线是否重新建立。

• 检查样品浓度是否超出检测线性范围。

4. 软件卡顿

• 清理缓存或重启仪器。

• 检查USB接口是否稳定。

九、总结

赛默飞BioMate 160分光光度计操作步骤主要包括：操作前准备—开机与初始化—样品测定—数据处理—操作后维护五大环节。每一步都直接关系到实验结果的准确性和设备的稳定性。通过规范的操作，实验人员不仅能高效完成测定，还能显著延长仪器使用寿命。对于长期应用该设备的实验室，建立标准化操作流程和检查表尤为重要，可进一步提升数据的可比性和实验室管理水平。