奥林巴斯显微镜CKX53操作指南

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一、设备概览

奥林巴斯CKX53为倒置式显微镜，其设计允许用户从下方通过物镜观察放置于培养皿或培养瓶中的样本，特别适合液体环境下的活细胞研究。设备由以下主要组成部分构成：

机身主框架
LED照明系统
聚焦机构（粗调与微调）
物镜转盘与物镜组
载物台与容器适配器
观察筒（三目或双目）
数码接口（可选）
光路切换系统
滤光器与观察模式转换模块

二、启动前准备

1. 安装显微镜组件

打开包装后，依照说明书将镜筒、物镜、目镜、载物台及电源适配器组装到位。确保所有部件连接紧固，镜筒与物镜安装到位后应无晃动。

2. 连接电源

使用标配的电源适配器将设备连接至稳压电源插座。确认供电稳定，避免连接在可能断电或电压波动大的插座上。

3. 开启光源

CKX53配备长寿命LED照明系统。打开主机背部的电源开关，通过侧面旋钮调节亮度。注意根据样品透明度与染色情况，调整到合适的亮度，避免过曝或图像不清。

三、样品准备与载物台操作

1. 样品容器选择

CKX53支持多种样品容器，包括：

标准35mm或60mm培养皿
多孔板（6孔、24孔、96孔）
T型培养瓶（T-25、T-75）
微流控芯片（需特殊适配器）

选择适当适配托盘，放置于载物台中央，确保稳定并对齐物镜光轴。

2. 安放样本

在干净环境下使用无菌技术放置样品。注意观察容器底部是否有气泡、杂质或液体残留，影响图像质量。

3. 调整载物台位置

使用载物台X-Y方向控制旋钮，将目标区域移动至物镜正下方。观察过程中，可轻推样品中心微调目标位置。

四、聚焦与观察流程

1. 初始聚焦步骤

首先选择10X或更低倍率的物镜
调整粗调旋钮将物镜靠近样品底部
通过微调旋钮缓慢向上调节，直至图像清晰

使用低倍率物镜初步聚焦后，再更换高倍物镜进行细节观察，可避免刮损样品。

2. 观察方式切换

CKX53支持多种观察模式，可根据样品类型切换：

明场观察：适合普通细胞、染色标本
相差观察（选配）：用于透明或无染样本，如活细胞、体液
荧光观察（选配）：使用荧光灯源及滤光片观察标记蛋白、核酸等

通过旋转观察模式切换器实现不同模式的切换，并配合适配镜片组（如相差环）使用。

五、物镜使用规范

1. 物镜选择与更换

CKX53配置物镜转盘，支持多种放大倍数（如4x、10x、20x、40x）。根据样品结构与观察需求选择合适倍数。更换物镜时务必转盘定位到位，避免倾斜或偏心。

2. 物镜清洁与维护

观察前后应检查物镜前镜面是否清洁。如有灰尘或油污，可使用镜头纸和镜头清洁液轻拭。切勿用力擦拭或使用硬质材料。

六、图像采集与数字接口

1. 连接数码相机

CKX53支持安装C-Mount接口的数码相机（如奥林巴斯DP系列、第三方CMOS/CCD相机）。通过三目观察筒连接相机并调整光路切换装置，将部分或全部光路导入摄影通道。

2. 软件操作

连接电脑后，启动图像采集软件（如Olympus cellSens）。常见功能包括：

实时成像与拍照
图像注释与保存
时间序列采集（Time-lapse）
图像拼接与测量
对比度、亮度与伽马值调整

务必保存图像原始文件用于后续分析与归档。

七、观察技巧与应用建议

1. 活细胞观察

使用低亮度LED照明避免光毒性
可选配加热台与CO₂控制系统，维持细胞生长环境
相差模式可观察细胞轮廓、活动与分裂

2. 染色样本观察

明场模式配合适当染色方法（如HE染色）
调整光圈大小提高对比度
保持目镜干净，防止杂色干扰判断

3. 多孔板快速筛查

使用低倍物镜快速浏览样本
利用X-Y载物台快速跳转至不同孔位
配合拍摄软件实现多孔数据对比

八、日常维护与安全操作

1. 使用后处理

关闭光源，拔掉电源
取下样品容器，清洁载物台
覆盖防尘罩，防止灰尘进入光学系统

2. 光学部件清洁

使用专用镜头纸与酒精棉签清洁物镜、目镜、滤镜等
禁止使用水或强酸碱液体擦拭
若发现霉斑或油污严重，应联系技术支持清洁

3. 电气安全

定期检查电源线是否老化
不可用湿手触碰电源开关
电压异常或长时间停电时，请拔掉电源适配器

九、常见问题与排查方法

问题	原因分析	解决建议
图像模糊	未对焦 / 样品偏离焦平面	重新聚焦 / 检查样品位置
光线太暗	LED亮度不足 / 灯老化	调高亮度 / 更换光源模块
成像偏暗或偏色	滤片未切换正确 / 相机曝光设置错误	检查滤片位置 / 调整曝光参数
看不到图像	光路未正确切换 / 相机连接异常	调整光路杆 / 重新插拔连接线
相差效果不明显	相差环位置不对 / 光圈未调节	校准相差环位置 / 调整光圈大小