显微镜的功能不仅限于“看到”,更关键在于“记录与量化”。在奥林巴斯IX81这一高端倒置显微平台中,图像捕获系统被整体设计为光学成像、数码采集与软件分析三位一体的结构。其目标是将瞬时微观图像以高保真度、高分辨率和高动态范围的方式准确转化为数字图像,并为后续科研分析提供可量化的数据基础。
IX81的图像捕获系统由以下几个主要模块组成:
成像光路:以无限远光学系统为基础,通过三目观察筒或后端接口引导图像到数码采集设备;
数码采集设备(CCD/CMOS):安装在C-Mount接口上,负责捕捉图像信息;
图像输出接口:通过USB 3.0、FireWire、GigE等数据传输方式接入计算机;
图像采集控制软件:如Olympus cellSens、MetaMorph、μManager等,控制曝光、增益、滤光、Z轴等采集参数;
图像处理与存储系统:支持图像拼接、时间序列采集、多通道合成等处理方式。
IX81采用三目观察筒设计,将图像信号分为目视观察与图像输出两路:
分光比支持多种设置(如100:0 / 20:80 / 0:100),根据使用场景自动或手动切换;
分光棱镜采用高透过率镀膜玻璃,确保图像色差最小化,支持色彩还原。
后部或顶部配备 C-Mount国际标准接口,内径25mm,匹配多种科研级相机;
接口固定结构带有同心调节圈,可进行X/Y调节对中,确保图像居中不偏移;
光路延伸长度配合0.35×、0.5×、1×等中继镜,适配不同尺寸传感器(如1/3"、2/3"、1" CMOS);
IX81兼容多品牌多型号成像相机,常见配置包括:
类型 | 代表设备 | 分辨率范围 | 特点 |
---|---|---|---|
CCD相机 | DP74, Andor Clara | 1.4–12 MP | 像素响应一致性高,适合长曝光荧光成像 |
CMOS相机 | Hamamatsu ORCA, FLIR | 2–20 MP | 成像速度快,适合活细胞、时间序列、Z-stack采集 |
sCMOS相机 | Photometrics Prime | 4–16 MP | 动态范围大,低噪声,适合高通量图像分析 |
彩色相机 | Olympus DP28 | 5–16 MP | 色彩还原良好,适用于教学、生物样本整体观察 |
曝光时间范围可设置在 1ms 到 30s;
支持自动曝光与手动控制;
高灵敏度成像模式可搭配EM-CCD或冷却型sCMOS设备。
成像视野可通过中继镜调整,与传感器尺寸匹配;
最大分辨率可达 4096×3000 以上(依赖相机);
支持图像ROI(Region of Interest)裁剪,提升帧率。
奥林巴斯推荐使用 cellSens 作为图像控制与管理平台,其核心功能包括:
曝光时间、增益、白平衡、黑电平、帧率;
通道选择(Brightfield, DAPI, FITC, TRITC等);
自动对焦与Z轴控制同步采集。
定时采集(Time-Lapse)支持从秒级到天级设定;
Z-stack可设置步长(最小达0.1μm);
图像自动拼接支持高分辨率视野扩展。
支持3~5通道同时采集并合成RGB图像;
自动滤片切换与图像配准;
色彩映射与光强标准化分析。
可导出 TIFF、JPG、PNG、RAW、AVI 等格式;
支持附带图像元数据(实验参数、时间戳、样品编号);
自动命名与目录归档功能便于批量实验管理。
软件实时调整图像色彩以优化观察效果;
防止荧光通道中亮度不均或色漂问题。
支持多帧叠加降噪;
滤波器可增强细节或消除背景干扰;
DIC图像边缘增强功能提高结构可视性。
实时显示每通道亮度分布;
支持线性拉伸、对数变换、强度归一化。
可自动控制XY平台进行图像拼接(Tiling);
自动扫描样品板(96孔板、组织切片)并编号储存;
实现大视野拼图与区域目标跟踪。
IX81支持电动Z轴控制,搭配自动对焦模块;
自动补偿热漂移或长时间采集导致的焦点偏移。
可设置刺激→采图→反应图像记录流程;
常用于钙离子成像、光遗传刺激等实验。
应用方向 | 捕图方式说明 |
---|---|
活细胞时间序列 | 连续采集300帧以上,图像自动对齐,分时差计算运动轨迹 |
多通道荧光分析 | DAPI+FITC+TRITC通道依次采集,合成多色合并图像 |
组织切片大视野扫描 | 通过XY平台全自动采图拼接,形成完整组织图谱 |
荧光蛋白表达量分析 | 设定ROI区域,采集图像后自动统计荧光强度平均值 |
细胞增殖实验 | 自动定时采图,统计细胞数目随时间的增长趋势 |
接口清洁:每月检查C-Mount接口与传感器镜面,防止灰尘影响图像质量;
驱动更新:保持相机与采集软件的驱动版本一致;
光源稳定性监测:定期校准LED或汞灯亮度,避免图像强度漂移;
环境控制:保持采图环境温湿度稳定,防止热漂移或成像抖动。
奥林巴斯IX81凭借其高度模块化的图像采集系统,不仅支持多种成像设备的灵活集成,也能够通过软件平台实现自动化、高通量、定量化的图像数据获取。其在细胞生物学、药物筛选、发育研究、神经科学、肿瘤学等多领域均展现出强大的数据支持能力,是现代实验室图像数字化转型的重要平台。
杭州实了个验生物科技有限公司