奥林巴斯倒置显微镜IX81照明模式

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一、明场照明（Brightfield）

1. 技术原理

明场照明是最基础的观察方式。光源从下方穿过样本，未被吸收或散射的光直接进入物镜，被吸收区域显得较暗。

2. 照明配置

使用卤素灯或LED作为光源
集光器调节孔径光阑
无需特殊滤光片或反射镜组件

3. 典型用途

观察固定切片
检查细胞形态、密度
常规样本快速观察

4. 优化建议

调整孔径光阑匹配物镜数值孔径
聚光器中心需调校对准视野中心

二、相差照明（Phase Contrast）

1. 技术原理

通过干涉原理将透明样本的相位差转化为亮度差。光束分为参考光与样本光，两者在相位板处重新组合形成可见图像。

2. 组件要求

专用相差物镜（带相环）
相差环片插入在聚光器上
聚光系统需居中调节

3. 典型用途

活细胞无染色观察
贴壁细胞行为监测
细胞分裂动态记录

4. 操作要点

调整相环与物镜环片精确对准
相差图像应呈现光晕边界而非强反差

三、荧光照明（Fluorescence）

1. 技术原理

样本被高能激发光照射后发射出特定波长的荧光信号，通过滤光片系统剔除激发光，只保留发射光进入成像路径。

2. 光路组成

激发光源（如汞灯、LED、金属卤化物）
激发滤光片、二向色镜、发射滤光片
高灵敏相机检测荧光信号

3. 应用范围

免疫荧光标记实验
多通道细胞标记
活细胞跟踪、时间序列采集

4. 使用建议

滤片组需与染料波段匹配
灯源预热与冷却时间控制以延长寿命
曝光时间与增益需根据样本亮度调整

四、DIC微分干涉照明（Differential Interference Contrast）

1. 技术原理

基于偏振光干涉原理，通过双折射棱镜产生光程差，增强样本微小高度或折射率差异形成高对比图像。

2. 所需组件

偏振器与检偏器
Nomarski棱镜插入于物镜及聚光器之间
DIC专用高数值孔径物镜

3. 应用示例

活体细胞内部结构观察
类透明组织（胚胎、薄层组织）成像
表面轮廓增强成像

4. 操作建议

所有DIC部件需顺序插入
棱镜需根据所用物镜匹配选择
聚光器对准与偏振器角度精调非常关键

五、暗场照明（Darkfield）

1. 技术原理

遮挡中心光，仅让斜入射光照射样本，未散射的光被遮挡，仅有散射光进入物镜，从而使样本在黑色背景上发光。

2. 光学配置

暗场聚光器（中央遮挡式）
低倍率下可用干式暗场聚光器
高倍率需油浸式暗场聚光系统

3. 适用场景

微粒追踪
血液成分观察
透明生物样本检测

4. 注意事项

对焦精度要求高，视野易偏移
照明强度需适中，避免过曝
适合于无染色透明样本

六、偏振照明（Polarized Light）

1. 原理概述

使用偏振器与分析器形成特定偏振状态的光束，用于分析样本内部结构的双折射性、各向异性。

2. 组成结构

偏振片安装于光源路径
分析片位于物镜上方
可搭配旋转载物台用于角度分析

3. 适用研究

结晶结构分析
植物组织（如淀粉粒）成像
纤维取向分析

七、自动化与多模式联动照明能力

IX81支持全电动控制的照明模式切换，通过软件接口可实现：

多模式循环成像（如明场+荧光+DIC）
与Z轴联动的三维成像
与时间轴联动的动态实验（如细胞迁移）

通过预设照明序列、曝光时间、光源强度，用户可快速完成复杂的图像采集任务。

八、照明模式对比分析

模式	成像原理	成像特点	是否需特殊组件	适用对象
明场	光强吸收	对比度低，操作简单	否	染色切片、常规细胞
相差	相位差干涉	无染观察透明细胞，高对比	是	活细胞、贴壁细胞
荧光	光致发光	高灵敏度、多通道	是	标记蛋白、分子信号追踪
DIC	干涉增强	立体感强，细节清晰	是	活体细胞、透明组织
暗场	散射增强	黑背景，突出微粒、边界	是	微粒子、血液、原生动物
偏振光	偏振分析	分析结构各向异性、应力结构	是	结晶、纤维、植物组织