一、设备开机前准备

在使用IX81前，用户应完成以下准备工作：

1. 样本准备与标记

• 将待观察样本置于玻片、培养皿或多孔板中；

• 根据实验类型预染荧光标记或添加观察缓冲液；

• 确保样本处于适宜观察状态（温度、湿度等）；

• 避免气泡、异物污染影响成像。

2. 系统检查

• 确保光源模块（LED/汞灯）接好并冷却完成；

• 检查电缆连接（相机、电源、控制线）；

• 打开显微镜主电源、相机控制器、电动平台控制盒；

• 启动计算机与配套图像采集软件（如CellSens）。

二、开机与初始化流程

1. 启动顺序建议

依照以下推荐顺序开机，确保各模块正常识别：

复制编辑电源插座通电 → 主机电源开启 → 光源模块加电 → 相机控制器 → 计算机 → 启动图像软件

启动软件后，等待自动识别物镜、滤光块、载物台、Z轴平台等组件。

2. 载入实验模板或新建项目

在软件中：

• 打开已有实验配置（如细胞时间序列模板）；

• 或新建任务，设定通道、成像模式、图像保存路径等；

• 输入样本信息、批次号等元数据。

三、光路设置与成像模式选择

1. 切换观察模式

用户可根据实验目标选择以下成像方式：

• 明场：常规组织结构；

• 相差：透明细胞动态；

• DIC：细胞器、高对比细节；

• 荧光：多通道分子标记；

• 暗场/偏光：结构特殊样本。

在软件中一键切换相应光路、滤光块与观察器件。

2. 物镜与光源配置

• 在物镜列表中选择合适倍数；

• 系统将自动旋转至对应物镜；

• 调整光圈大小（电动或手动）；

• 设置光源类型、强度、曝光时间；

• 配置荧光通道激发与发射滤片组合。

四、样本加载与定位

1. 安装样本

• 将玻片/皿固定在载物台托架上；

• 使用磁吸夹具或弹簧压板固定，避免样本滑动；

• 调整平台中央，使样本位于光路中心。

2. 载物台导航

在软件中：

• 使用XY平移控制界面移动样本；

• 利用导航窗口快速跳转；

• 标记多区域，便于批量采集或导航记录；

• 支持设置坐标路径，实现自动多点循环采集。

五、聚焦与图像调节

1. 手动或自动聚焦

• 初次观察时，使用粗调/微调对焦旋钮或软件Z轴按钮；

• 高倍率条件下启用自动聚焦模块（基于对比度或边缘）；

• 对于Z-stack采集，设定上下限焦点范围。

2. 图像亮度与对比度优化

• 调整曝光时间；

• 设定图像增益、伽马、亮度/黑场修正；

• 使用直方图调节动态范围；

• 配置图像帧率和像素分辨率；

• 启动实时预览，确认图像质量。

六、多维成像流程配置

IX81支持复杂成像任务组合：

1. 多通道成像设置

• 添加荧光通道（DAPI、FITC、TRITC等）；

• 每个通道设定曝光、光源、滤光块；

• 设定轮拍顺序，最短切换时间最优；

• 可选择图像融合或分通道保存。

2. 时间序列采集（Time-lapse）

• 输入总持续时间或帧数；

• 设置采集间隔（如每5分钟1帧）；

• 勾选“保持焦点”启用自动追焦；

• 设定是否在每帧执行Z轴扫描。

3. Z-stack堆叠

• 设定起始层与终止层；

• 定义层间距（如1μm）；

• 配合自动聚焦判断每层最清晰图像；

• 自动生成最大投影或三维重建图像。

4. 区域批量采集

• 预设多点区域坐标；

• 可设置每个区域采集方式（通道、Z层、时间等）；

• 自动依次执行扫描并命名保存；

• 适用于多孔板、组织切片、芯片等批量处理场景。

七、图像保存与数据管理

1. 命名与格式

• 图像可设置自动命名规则（如样本编号_通道_时间_位置）；

• 支持多种保存格式：TIFF（含元数据）、JPEG、AVI、OIR等；

• 可选择分通道/融合保存、8位/16位图像深度。

2. 数据归档与导出

• 建议每次实验独立创建数据文件夹；

• 使用标签和注释系统标记图像；

• 可导出统计数据（荧光强度、面积、形状等）；

• 批量导出结果表格，用于后期分析。

八、设备关闭与日常维护

1. 关机顺序

• 停止图像采集程序；

• 关闭图像采集软件；

• 关闭LED/汞灯光源（注意汞灯需预冷）；

• 关闭主机电源与控制器；

• 关闭计算机；

• 拔除样本、清洁载物台。

2. 清洁与保养

• 用镜头纸清洁物镜前镜面；

• 清除载物台表面样本残留；

• 用防静电布擦拭显微镜外壳；

• 定期检查插头、USB线缆、滤光片；

• 检查相机接口紧固与相机清洁度。

九、常见故障处理建议

十、总结

奥林巴斯倒置显微镜IX81作为一款全电动、智能化的成像平台，其操作流程虽高度自动，但依然需要规范的使用步骤以确保系统稳定与图像准确。从开机到数据保存，每一个环节都与实验结果质量紧密相关。通过掌握标准化的操作流程，配合合适的软件设置、科学的采集策略以及良好的维护习惯，使用者可以充分发挥IX81在多维成像、活细胞观察、分子定位等多领域的强大功能。