一、前言

倒置显微镜IX-70以其模块化设计、优异的光学性能和丰富的扩展选项著称。本教程面向初学者和有一定显微经验的用户，系统讲解从设备准备到高级成像的全过程，帮助您快速上手并掌握高质量图像获取的方法。

二、设备组成与安装

1. 包装清点

• 显微镜主体（带镜架和光学系统）

• 观察筒（双目或三目）

• 目镜（常配WH10×/22两支）

• UIS无限远物镜（4×、10×、20×、40×）

• 样品托架及X-Y移动平台

• 电源箱及电源线

• 照明模块（卤素灯或LED模块）

• 转接环及相机接口（若选配）

• 使用手册及保修卡

2. 安装位置与环境

• 工作台：水平坚固、承重≥50kg，无强烈震动。

• 室温湿度：20–25℃，湿度<60%，无强光直射，无强磁干扰。

• 电源要求：AC100–240V、50/60Hz；配备稳压电源或UPS可选。

3. 设备组装

1. 将显微镜主体置于工作台中央，确保镜架四角平稳接触桌面。

2. 安装观察筒：对准顶端接口，轻插并顺时针旋紧锁紧环。

3. 插入目镜：将两支目镜分别插入双目筒内，与刻度对齐即可。

4. 拧上物镜：顺次旋入4×、10×、20×、40×物镜至定位声响。

5. 安装样品托架：滑入托架导轨，推到限位位置并锁紧固定螺丝。

6. 连接电源：将电源线插入电源箱，另一端接显微镜背部电源口，再接市电。

7. 点亮照明：确认光源仓盖已关闭，打开电源箱开关，旋动亮度调节旋钮至低亮度。

三、基础操作流程

1. 电源与光源

• 总电源：背部主开关，按下电源指示灯亮起。

• 光源开关：面板按键或旋钮式，顺时针打开，初次建议置于最低亮度，防止过曝损伤眼睛。

2. 样品摆放

1. 根据实验容器类型选择合适托架或多孔板适配器。

2. 将样品培养皿/玻片稳固放置于平台中央。

3. 如需压片观察，轻松锁紧压片装置，注意避免玻片破裂。

3. 观察筒调节

• 筒高：可上下旋转锁紧环，调整至舒适坐姿位置。

• 目距：两目目镜间距通过拉伸或缩回双筒使左右目视差消失，获得单一圆形视野。

• 屈光度：左右目镜顶部各有屈光度调节环，根据个人视力±5D微调至最清晰。

四、聚焦与视野定位

1. 物镜切换

• 以10×物镜为起始，旋转物镜转盘至10×档位。

• 确保物镜下端与样品托架之间有约5–10毫米间隙。

2. 粗调与微调

• 粗调旋钮（大齿轮）：快速移动平台至焦平面，带有行程限制，防止撞击物镜。

• 微调旋钮（内圈小齿轮）：精细调整焦距，步进约0.2–0.5μm，用于高倍成像。

3. X-Y导航

• 分别旋转X轴、Y轴旋钮，平移样品至视野中心。

• 目视网格刻度可辅助定位并记录目标位置。

五、多种观察模式切换

1. 明场观察

• 光源：闭合相衬环，移除滤光片组。

• 调光：亮度适中，以观察细胞边缘为准。

• 聚焦：常规微调，图像中心和边缘均应保持清晰。

2. 相衬观察

1. 安装相衬物镜（带刻度环的20×或40×物镜）。

2. 插入对应相衬环片至滤光片转盘。

3. 调节聚光器高度与中心，使菲涅尔环与相衬环同心。

4. 适当缩小光阑以增强对比度，调整亮度至最佳。

3. 荧光观察

1. 安装荧光滤光片座，选择激发和发射滤光片。

2. 启动荧光光源（汞灯或LED），等待稳定预热（汞灯约2分钟）。

3. 关闭室内环境光，查看视野有无自发荧光噪声。

4. 根据荧光强度微调亮度与曝光时间，通过三目筒连接相机采集。

4. DIC／偏振观察（若选配）

• 安装DIC棱镜或偏振片，按设备说明书校准光路，微调聚光器、分析器方向至最佳对比。

六、图像采集与数据处理

1. 数字成像接口

• 三目筒插口与相机转接环连接，将相机固定于三目端口。

• 启动配套软件（CellSens、MetaMorph等），在软件中选择合适曝光、增益等参数。

2. 拍照与录像

• 单张拍照：聚焦准确后点击软件拍照按钮，保存为TIFF或JPEG格式。

• 连续录像：根据实验需求设置帧率与时长，确保硬盘空间足够。

3. 图像处理

• 使用软件进行背景校正、伽马调整、对比度增强。

• 对多通道荧光图像进行伪彩色合成及强度量化。

七、日常维护与保养

1. 光学部件清洁

• 目镜与物镜：使用镜头纸沾少量镜头清洁液，由中心向外轻轻擦拭。

• 滤光片：取出后用镜头纸或纯棉签清洁边缘，避免碰伤镀膜。

2. 机械部件润滑

• 每3–6个月在聚焦滑轨及X-Y导轨添加微量专用润滑脂。

• 避免使用普通油脂，以免吸附灰尘。

3. 光源保养

• 卤素灯20W寿命约200小时，建议定期更换；LED模块寿命长达5000小时。

• 汞灯灯泡使用时避免频繁开关，使用后待自然冷却再关电。

4. 电气检查

• 定期检查电源线与插头接触是否良好，无破损或松动。

• 灯泡仓内风扇清洁，确保散热通畅。

八、常见故障排查

九、进阶技巧与心得

1. 预聚焦法：先用低倍物镜（4×或10×）快速定位目标区域，再切换高倍微调，可节省时间并减少碰撞风险。

2. 分区拼图：使用电动平台或手动导航按设定步距采集相邻视野图像，后期软件拼接成大视场图。

3. 时间序列成像：设置荧光或明场定时拍照，可实时监测细胞运动、药物响应等动态过程。

4. 多通道自动切换：在CellSens等软件中预设不同滤光通道参数，点击切换即可完成多色成像，提高效率。

5. 环境控制配合：若需活细胞长时程成像，配合恒温箱和CO₂培养腔使用，保证细胞状态稳定。

十、总结

通过本教程，您已掌握IX-70的组装、基础操作、各种观察模式切换、数字成像及日常维护等核心技能。熟练应用上述流程和技巧，能有效提升实验效率和图像质量。建议在实际操作中根据具体样本和实验目的灵活调整参数，并参照厂商提供的详细说明书和SOP规范，确保设备安全与数据可靠。祝您在显微成像研究中取得卓越成果。