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本文将针对《伯乐电穿孔1652660用户手册》进行详尽介绍，涵盖产品概况、系统组成、技术参数、操作流程、细胞准备、典型实验流程、安全注意事项、维护保养、常见故障及排查、优化建议等多方面内容，力求全面、通俗、条理清晰，无重复文案。

一、产品概况

“伯乐电穿孔1652660”是指型号为 165-2660 的 Bio‑Rad （伯乐）“Gene Pulser Xcell Total System”电穿孔仪。该系统为科研实验室提供“原核与真核细胞通用”的电穿孔（electroporation）工具，其主要功能是通过短暂高电压电脉冲，在细胞膜上形成可逆性通道，使外源分子（如 DNA、RNA、蛋白质或染料）进入细胞内。根据官网资料，该型号输出电压范围可达 10–3 000 V，支持指数衰变波与方波两种模式。
该系统为模块化设计，包含主机、CE 模块（电容扩展器）、PC 模块（脉冲控制器）、ShockPod 电击杯室及电穿孔比色杯。用户界面友好，内置预设程序，并支持手动编辑。
适用范围广泛，从细菌、酵母菌、植系原生质体到哺乳动物细胞皆可。其优势在于高灵活性、高重复性、便于调参、实验方案丰富。官网也强调：“Universal electroporator capable of transfecting all cell types”这一特性。

二、系统组成

系统包含以下主要部分：

• 主机控制单元：包括 LCD 显示屏、按键输入（字母数字键与功能键）、菜单界面，负责程序选择、参数设定、脉冲触发、结果显示。

• CE 模块（Capacitance Extender）：用于提供大电容范围（25–3,275 µF）以适应低阻抗样本的指数衰变或方波模式。适合真核细胞或低电阻条件。

• PC 模块（Pulse Controller）：用于控制并联电阻（50–1,000 Ω）以适应高阻抗样本、微生物等环境，优化指数衰变波时的时间常数。

• ShockPod 电击杯室：样品插入用电击杯（cuvette）位于其中，操作便捷、安全性高。

• 电穿孔比色杯（cuvettes）：配备不同间隙规格（如 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）以适配不同体积、不同细胞类型的电转化实验。

• 电源适配器与安全保险装置：适配 100–240 V, 50/60 Hz 电源输入，确保设备全球通用。

系统包装中，该型号165-2660包括主单元、CE 模块、PC 模块、ShockPod、电穿孔比色杯（共15个：5个0.1 cm间隙、5个0.2 cm、5个0.4 cm）及配套附件。

三、技术参数

在《用户手册》中，技术指标为用户正确操作、参数设定与实验优化提供依据。以下列出该系统主要技术参数（摘选整理）：

• 波型（Waveform）：指数衰变 (exponential decay) 或 方波 (square wave) 两种。

• 输出电压范围：10 V 至 3,000 V。

• 在10–500 V区间：电容可选25–3,275 µF（以25 µF为增量）；在500–3,000 V区间：电容为10、25、50 µF。

• 并联电阻（应用于 PC 模块场景）：50–1,000 Ω，以50 Ω为增量；加上无限大作为开路情况下参照。

• 样品电阻最低标准：在10–2,500 V时最低20 Ω；在2,500–3,000 V时最低600 Ω。

• 方波时序参数：10–500 V 时，脉冲持续 0.05–10 ms（以0.05 ms增量）；10–100 ms脉冲以1 ms增量；1–10脉冲；间隔0.1–10 秒。500–3,000 V时，脉冲持续0.05–5 ms，以0.05 ms增量；1–2脉冲；最小间隔5 秒。

• 输入电源：100–240 V，50/60 Hz。最大功率约240 W（短时间充电时峰值）。

• 工作温度：0–35 °C，湿度0–95%（无冷凝）。

• 尺寸与重量参考：主机：约31 × 30 × 14 cm，CE模块：31 × 28 × 9 cm，PC模块：31 × 28 × 5 cm；主机净重约6.6 kg，CE模块3.1 kg，PC模块1.9 kg。

这些参数为用户在实际操作中设定电压、电容、电阻、脉冲时间提供标准依据，同时在选杯、选缓冲液、设定样品条件、评估实验结果时起到参考作用。

四、操作流程

操作流程可分为开机准备、参数设定、样品插入、触发脉冲、后处理几个阶段。以下为分步骤指导：

4.1 开机准备

1. 将仪器连接到符合规格（100–240 V, 50/60 Hz）电源，打开主机电源。

2. 检查设备是否工作正常：LCD 显示正常、按键响应、模块连接稳固。

3. 确保 CE 模块、PC 模块（如使用）已正确安装，与主机连接牢固。参考手册第 2 章连接说明。

4. 插入电穿孔比色杯插槽，检查是否干燥、无残液、无气泡。

5. 确保操作环境干净、无导电液体泄漏、使用绝缘手套与护目镜。

4.2 参数设定

1. 在主机界面选择操作模式：可选择“预设程序”或“手动模式”。预设程序中包含常见细胞类型（细菌、酵母、哺乳动物细胞）对应的电转参数。 

2. 若使用手动模式：输入电压值（如 1,200 V）、选择或调整电容值或时间常数、设定脉冲数、脉冲间隔时间等。手册中详细说明如何切换参数。

3. 根据样品的导电性、体积、杯隙大小（0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）等选择合适参数。较低阻抗/大体积样品可使用较大电容或方波模式，较高阻抗/细胞体积小则可借助 PC 模块并联电阻设定。

4. 确认所有参数无误后，将插入比色杯，并关闭 ShockPod 盖子以确保安全。

5. 系统自检后可显示“Ready”或类似提示，此时可准备触发脉冲。

4.3 样品插入与触发

1. 将含细胞悬液与转入物（如 DNA、RNA）置于比色杯内，插入 ShockPod 插槽，确保方向正确。手册提醒“电击杯只能以正确方向插入”。 

2. 按下“Pulse”键或启动按钮，系统将对电容器充电，并在设定时刻释放电脉冲至样品。若出现电弧、气泡或异常应停止操作并检查样品状态。

3. 脉冲结束后，屏幕会显示实际电压、时间常数、波形类型等运行结果（如成功发射、是否有放电异常等）。 

4. 立即将样品从电击杯转移至预热或回恢复培养基中，利于细胞膜修复和外源分子表达。

4.4 后处理

1. 将样品放入适宜温度的孵育条件中（例如哺乳动物细胞 37 °C CO₂ 培养箱）。

2. 若为细菌或酵母，可立即进行培养复苏。

3. 记录实验参数与转染效果，以便优化和重复实验。

4. 关闭设备电源，清理电击杯、更换或冲洗用过的杯体，保持设备整洁。

五、细胞准备与样品要求

正确的样品准备是获得高转化效率的关键。以下为建议流程与注意事项：

5.1 选择合适杯隙

• 使用 0.1 cm 间隙电击杯：适合细菌或酵母，高电场强度、体积小。

• 使用 0.2 cm 或 0.4 cm 间隙电击杯：适合哺乳动物细胞或原生质体，体积相对较大，电场强度适中。

• 比色杯要保持无裂痕、清洁、无气泡、无残液影响。

5.2 缓冲液与电穿孔溶液

• 样品应悬浮在低离子强度缓冲液中，避免高导电介质（如 PBS、LB）直接使用，因为高导电性会降低电场强度并增加电弧风险。

• 悬液宜预冷至4 °C以降低热损伤并提高转化效率。

• 悬液体积应适当（如 50–100 µL），杯体中不要出现气泡。

5.3 细胞状态

• 细胞应处于对数生长期（生长活跃）。

• 洗涤后细胞应悬浮于适宜缓冲液中，去除培养液及残留离子。

• 悬液浓度可根据细胞类型而定，如常见为 ~10⁸ cells/mL。

• 操作前尽量保持细胞于冰上、减少环境刺激。

5.4 DNA/RNA/蛋白进入量

• 外源分子量、浓度应符合典型转染条件。

• 避免在悬液中含有大量杂质或己降解物。

• 若为哺乳动物细胞转染大质粒、siRNA 或蛋白，建议缩短脉冲时间或调整电压，以减少细胞死亡。

六、典型实验流程（以哺乳动物细胞为例）

下面以哺乳动物细胞（如 293T、CHO）电穿孔为例，说明完整实验流程：

1. 细胞处于对数生长期，收集、离心、洗涤两次以去除培养基和离子残余。

2. 将细胞悬浮在低离子缓冲液（预冷 4 °C）中，调整浓度如 1 × 10⁷ – 5 × 10⁷ cells/mL。

3. 准备外源 DNA（如 2–10 µg）或 RNA/蛋白，混合入细胞悬液中，轻轻混匀、避免气泡。

4. 选用 0.4 cm 间隙电击杯，加入例如 100 µL混合液，轻轻抖动排气泡，插入 ShockPod。

5. 在仪器上选择“预设程序”中哺乳动物细胞对应选项，或手动输入电压如 1,200 V、方波模式、脉冲时间例如 10 ms、1 脉冲、间隔不适用（单次脉冲）。

6. 按“Pulse”键开始操作。注意观察是否有电弧、是否有异常提示。

7. 脉冲结束后，立即将细胞转移至含复苏培养基、温暖至 37 °C 的 CO₂ 孵育箱中。

8. 24 小时后更换培养基，48–72 小时后评估转染效率（如荧光蛋白表达、抗性筛选、生存率）。

9. 记录所使用参数及结果，为下次实验优化提供依据。

通过实践，用户可逐步调整电压、电容或脉冲数以兼顾转染效率与细胞存活率。

七、安全操作与注意事项

操作高压电穿孔设备需严格遵守安全规程，减少风险。以下为关键注意事项：

• 操作时务必佩戴绝缘手套、护目镜、穿实验室防护服。

• 不可在设备通电状态下触摸裸露电极或插入液体。

• 电击杯插入前，必须关闭 ShockPod 盖，并确认上盖关闭良好。

• 若发现比色杯有裂痕、液体有气泡、样品混浊，应立即终止操作。

• 操作平台应保持干燥，远离水源或易导电液体。

• 不得频繁连续触发脉冲，应给设备适当冷却时间，避免充放电过热。

• 若出现电弧或误触，按下“Discharge”键或断电处理。

• 操作环境应满足工作温度（0–35 °C）且无冷凝湿气。

八、维护保养

为了保证设备长期可靠运行，应进行定期维护：

日常清洁

• 使用 70% 乙醇擦拭外壳、电极连接线、ShockPod 表面。

• 不得使用丙酮、苯等有机溶剂清洗电极或主机面板。

• 清理样品残液、雾状液体或污染物，避免导致导电短路。

存储与保养

• 存放于干燥、通风、无腐蚀气体、无阳光直射环境。

• 长期停用前应断电、清洁、盖防尘罩、拔出电源。

• 建议每月检查模块连接、电极磨损、电穿孔杯使用次数。

校准与服务

• 建议每月至少用标准电阻/比色杯检查输出电压及时间常数。

• 建议每季度检查模块功能、电容值稳定性、是否有电弧保护问题。

• 若设备提示错误，应联系厂家或授权服务商进行维修（但根据开头声明“质保3年只换不修”）。

• 记录设备的使用情况、维修记录、实验参数，为质量控制与溯源提供依据。

九、常见故障与排查

以下列出常见问题、原因分析与解决方法：

如发生严重硬件故障，应联系设备供应商或厂家进行处理。鉴于本设备由厂家提供质保3年只换不修政策（开头所述），建议在保证期内如出现硬件故障，即联系厂方更换。

十、优化建议与实验技巧

为了获得更优的转染效率和更高的细胞存活率，以下为一些建议：

• 使用 0.1 cm 间隙电击杯 时可显著提高电场强度，适用于细菌、酵母等高效转化。

• 对于哺乳动物细胞，建议先使用低电压、短脉冲时间方案，再根据存活率和表达率逐步提升电压。

• 若使用线性 DNA、siRNA 或蛋白质转染，可缩短脉冲持续时间以减少因较高电压造成的细胞热损伤。

• 转染后立即置于 37 °C 孵育有助于细胞膜快速修复，从而提高表达效率。

• 每次实验记录详细参数（电压、电容/时间常数、脉冲数、间隔、杯隙、细胞浓度、缓冲液类型）以便优化。

• 分批操作大体积样品，有助于热量散失与电场均匀，提高整体效率。

• 定期检查样品温度、电击杯状态（无裂痕、无残液、无气泡）以及电极连接线是否磨损。

十一、总结

本型号165-2660 “伯乐电穿孔仪”是一款适用于科研实验室、支持广泛细胞类型的高性能电穿孔系统。其模块化设计、丰富参数设定、预设程序与手动灵活调整能力，使其在细菌、酵母、植系细胞、哺乳动物细胞等多领域应用成为得力工具。通过规范操作、细胞良好状态、合适的缓冲液和杯隙选择、合理参数设定与维护保养，用户可获得高效、稳定的转染效果。设备若在质保期内出现硬件故障，可依据“质保3年只换不修”政策进行更换，从而降低维修成本、提高实验保障。
建议用户在首次使用前熟读完整用户手册，严格遵守安全操作规范及维护建议，以延长设备寿命、保障实验安全、提升数据可信度。