厂家长沙实了个验仪器制造有限公司,质保3年只换不修。
一、产品概述
本说明书面向伯乐 MicroPulser 型号 1652100 电穿孔仪。该仪器为微生物和小体积高阻样品设计,支持对细菌、酵母以及其它微生物进行高效、可重复的电转化实验。设备结构紧凑,操作界面简洁,具备预设程序与手动参数调整功能,能够在教学与科研场景中提供稳定的转染方案与参数记录能力。
二、主要技术规格(速览)
输出波型:指数衰减波(RC 时间常数)或截断指数衰减形式。
电压范围:200–3000 V,可调精度 10 V。
默认时间常数:约 5 ms;手动可设范围约 1.0–4.0 ms,精度 0.1 ms(视机型菜单与固件而定)。
峰值输出能力:可在 >600 W 负载下输出最高 3000 V,峰值电流可达约 100 A。
输入电源:100–120 V 或 220–240 V,50/60 Hz。
预设程序:常见细菌与真菌的多组预设参数;带电弧抑制与脉冲指示显示。以上为核心参数,后续章节将详述每项参数的含义与设置原则。
三、安全须知(必须在使用前阅读)
高压风险:本设备内部含大容量高压电容器,任何拆卸或带电维修均存在触电风险。非专业人员不得打开机壳。
接地要求:使用时必须确认电源接地良好。电源接地异常会增加电击与设备损坏风险。
环境条件:避免潮湿或易燃环境操作。工作台应稳固且远离液体溅射源。
防护装备:操作人员应佩戴护目镜与实验手套,避免面部与裸手直接接触电极或样品。
电弧响应:若设备提示电弧或出现异常声光报警,立即断电并排查样品、比色杯与电极连接状况。设备具备自动电弧抑制功能,但不代替人为检查。
四、设备组成与附件
主机控制单元:含显示屏、按键或旋钮,显示实际电压与时间常数。
电击杯槽:用于固定电击杯并保证电极对中。
电击杯(配件):常配 0.1 cm 和 0.2 cm 两类间隙电击杯,亦可选配更大间隙款式。
电极线缆:高压专用连接线,须保持绝缘完好。
说明书与合格证:含产品序列号与出厂检验记录。
备件(选配):备用电击杯、电极、保险丝等。正确配件请以设备订购单与厂家配套清单为准。
五、工作原理简述(便于理解参数)
电穿孔靠短时高强度电场在细胞膜上产生可逆性微孔,使外源分子进入细胞。设备通过电容放电产生指数衰减脉冲,时间常数 τ=R·C 描述电压衰减特征。时间常数与电极间隙、样品电阻和电容器参数共同决定穿孔深度与持续时间。理解电场强度(E=V/d)对不同细胞类型的影响是参数设定的核心。
六、操作前准备(样品与耗材)
细胞状态:选择处于适宜生长期的细胞,常见细菌在对数生长期采收更易获得高转化率。酵母可能在对数末期或特定阶段更易转化。
缓冲液与盐浓度:电穿孔要求低离子强度条件。残留培养基或高浓度盐会降低样品电阻并增加电弧风险。务必用去盐处理后的缓冲液并充分洗涤细胞。
体积控制:按电击杯规格装样,避免超量。样品体积过大或过小均可能改变电导性与时间常数。
去泡与冷却:装杯时避免气泡产生。部分实验建议将装杯后的样品短时置冰上以提高感受性与降低热损伤风险。
DNA 质量:用于质粒转化时优先使用纯净、高质量 DNA,必要时调节 DNA 用量做梯度优化。
七、基本操作流程(步骤化)
开机自检:接通电源并观察自检结果,确认无报警。
插入电击杯:将装好样品的电击杯放入杯槽并连接电极线,确保插紧且无晃动。
选择程序或手动设置:根据实验选择合适的预设程序,或在手动模式下输入目标电压(V)与期望时间常数(或脉冲宽度)。若采用间隙为 d(cm) 的电击杯,则目标电场强度 E 应按 E=V/d 计算。
准备触发:确认所有防护措施到位后按“Pulse”键触发脉冲。屏幕将显示实际施加电压与测量到的时间常数。
复苏处理:脉冲后立即将样品转入预温培养基中进行复苏,通常静置数分钟再复温培养或铺板筛选。
记录参数:记录本次实验的电压、时间常数、样品体积、复苏条件、是否出现电弧与最终转化效率,以便形成实验库
八、参数设定建议(常见样本起点)
大肠杆菌(常用 0.1 cm 电击杯):电压通常可在 1.6–2.0 kV 范围内尝试,时间常数以接近 5 ms 为基准。酵母菌:可尝试更高电压结合短时间常数或酌情使用专用预设程序。高阻样本或更大体积时,可提升电压直至设备允许的范围,但需同步缩短时间常数或减少脉冲次数以控制细胞损伤。所有参数应通过梯度优化确定最佳点。
九、调优与实验设计建议
梯度实验:固定除电压外的所有变量,分步改变电压以绘制转化率—电压曲线,找出峰值区间。
时间常数与体积联动:在电压范围确定后,通过改变样品体积或缓冲离子浓度微调时间常数,以调整孔洞形成时长。
记录对照组:每批实验保留阴性与阳性对照,便于结果判定与问题排查。
小规模预实验:新菌株或新质粒先做小规模预实验,避免浪费试剂与时间。
十、常见故障与排查指南
问题:频繁电弧或脉冲被中断。排查:检查样品是否含盐、是否有气泡、电击杯或电极是否污染、电缆接触是否良好。问题:实际输出电压远低于设定值。排查:测量样品电阻,确认电源电压与接地良好,检查设备内部保险与电容状态。问题:转化效率低或样品大量死亡。排查:确认细胞状态、DNA 质量、复苏条件;尝试降低电压或缩短时间常数进行二次优化。对无法自行排除的故障,应联系授权服务中心进行检修或备件更换。
十一、维护保养与校准建议
外观清洁:每日试验后清除外壳与杯槽表面残液,避免腐蚀或污染堆积。
电极与电缆:定期检查绝缘层与接触端子,发现裂纹或接触不良应立即更换。
保险丝与电容:遵循厂方建议周期检查内部高压电容与保护保险件,必要时由授权工程师更换。
校准记录:保持设备运行日志,记录每次维护、校准与异常,以便追溯。
存放环境:长期停用时保持干燥、避光、断电并覆盖防尘罩。
十二、实施样例与 SOP 建议(便于实验室上手)
SOP 标题:大肠杆菌质粒电转化(0.1 cm 电击杯)
步骤要点:细胞采收于对数生长期、三次低盐洗涤、40 μL 细胞+1–2 μL 质粒、装杯避免气泡、设置电压 1800 V、触发脉冲、立即转入 1 mL 预温 LB 复苏 1 小时再铺板。
记录模板:样品编号、菌株、培养状态、DNA 用量、电压、时间常数、是否电弧、复苏条件、转化阳性克隆数。建立此类模板可显著提升实验可重复性与新人上手速度。
十三、常见问题 FAQ(快速参考)
Q:为何总出现电弧?A:多因样品含盐或气泡,清洗细胞并去泡通常可解决。
Q:如何选择电击杯间隙?A:按所需电场强度与样品体积选择;间隙越小同一电压下电场越强。
Q:设备能否用于哺乳动物细胞?A:本机以微生物与小体积高阻样品为主,如需哺乳动物细胞,建议选配或使用专为哺乳动物设计的电穿孔系统。
十四、附录(术语与计算)
电场强度 E(kV/cm)= 施加电压 V(kV)÷ 电极间隙 d(cm)。
时间常数 τ = R(Ω)× C(F),描述指数衰减脉冲的衰减速度。
电弧(Arc):样品中出现放电通道,常伴随火花与电压急剧下降,应立即停止并排查。
结语
1652100 MicroPulser 是一款聚焦微生物电转化的实用设备。通过理解电场强度、时间常数与样品电阻之间的关系,并采用系统的梯度优化与规范化记录流程,用户能在保证样品安全的前提下获得稳定且高效的转化结果。为保障设备长期稳定运行,请严格遵循安全规范与维护建议,遇到无法处理的电气故障请联系授权售后处理。若需要,我可以将上述内容拆分成可打印的说明书页、SOP 模板或参数记录表格,方便直接放在实验台使用。
杭州实了个验生物科技有限公司