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下面为您详细介绍 Bio‑Rad（伯乐）“电穿孔 1652660”型号（即 Gene Pulser Xcell Total System）操作指南。文章分为产品概述、安装准备、样品及缓冲液准备、参数设置与操作流程、典型应用、维护保养与故障排查六大部分，逐步详解每个环节，便于使用者理解和遵循。

一、产品概述

该系统是一款模块化、高灵活性的电穿孔仪器，货号 165-2660，是伯乐 Gene Pulser Xcell 系列的 “总电穿孔系统（Total System）” 版本。
它包括主控单元、CE 模块（电容扩展器）和 PC 模块（脉冲控制器）、ShockPod 电击槽，并兼容多种电穿孔比色皿（0.1 cm / 0.2 cm / 0.4 cm 间隙）
其最大优势在于：既能用于真核细胞（哺乳动物、植物）、也能用于原核细胞（细菌、酵母），适用范围广；预设程序丰富，自定义灵活；参数可调，适应不同实验需求。
技术指标方面：输出电压范围可达 10-3000 V，电容、时间常数、电阻可调。
因此，若您在基因编辑、转染、细胞工程、蛋白导入、细菌转化等实验中需要一款性能强、可调整的电穿孔设备，此型号非常适合。

二、安装与准备工作

2.1 仪器安装

• 确认设备放置于平稳、干燥、无强振动的实验台上，并且具备良好接地。

• 将主控单元连接电源线，确保所用电源为 100-120 VAC 或 220-240 VAC、50/60 Hz（依据当地标准）

• 插入 CE 模块和 PC 模块（若尚未连接），同时将 ShockPod 插入设备相应插槽，并确认连接牢固。

• 打开设备，等待系统完成自检，界面进入主菜单。

2.2 环境与安全准备

• 操作环境温度建议在 0-35 °C，湿度 0-95%（无冷凝）

• 使用前务必确认设备接地良好，避免人体或其他金属部分与未带电部件发生接触。

• 避免在易爆或强磁场环境下使用。若设备提示有异常，应立即停止操作检查。

2.3 样品预处理与缓冲液准备

• 选择处于对数生长期的细胞悬液，细胞活性高，有利於电穿孔后的存活与转染效率。

• 倒掉旧培养基，使用无血清培养基或电穿孔专用缓冲液（例如伯乐提供的 Gene Pulser 缓冲液）进行洗涤，移除钙、镁离子或高盐成分，以防电弧出现。

• 调整细胞悬液浓度，例如 1×10⁶ 至 1×10⁷ cells/mL，视细胞类型而定。

• 外源物质（如质粒 DNA / RNA /蛋白等）应为高纯度，无大分子杂质，浓度适宜。避免离子强度过高或存在气泡。

• 选择适配的电击比色皿：0.1 cm、0.2 cm 或 0.4 cm 间隙。应确保比色皿干净、无裂痕、无残留液体。

三、参数设置与操作流程

3.1 模式选择

该设备支持两种主要波形模式：

• 指数衰减波（Exponential Decay）—— 通常用于真核细胞，如哺乳动物细胞、植物原生质体。

• 方波（Square Wave）—— 通常用于原核细胞，如细菌、酵母；亦可用于体积较小样本、高电压快速脉冲场景。

在主菜单中，可选择“手动操作”、“预设程序”或“用户定义程序”。例如通过上下箭头选择波形模式，在高亮参数后键入数值并按 Enter 键确认。

3.2 参数设定

根据样品类型和比色皿规格，设定以下关键参数：

• 电压（Voltage）：如 0.4 cm 杯使用 250-350 V 是常见哺乳动物细胞设定（仅供参考，具体需优化）

• 电容（Capacitance）或脉冲宽度：指数波模式常以 μF（微法）或时间常数(ms)形式设定；方波模式常设定脉冲时间与重复次数。

• 脉冲次数与脉冲间隔：例如方波可能重复 1-2 次，两个脉冲间隔数秒。

• 存储与调用：设定好参数后，可将其保存至用户协议中，方便未来重复实验。

3.3 执行操作流程

1. 将混合好的细胞与外源物质悬液转移至比色皿中，体积通常为10-500 µL，视实验设计而定。

2. 检查是否有气泡存在，若有则通过轻轻离心或弹击管壁去除。气泡会造成电场异常或电弧。

3. 将比色皿插入 ShockPod 电击槽中，盖好或确保插槽压紧。

4. 按下 “Pulse” 按钮启动电穿孔。设备将显示实际电压、时间、电阻等数据。若系统检测到异常，如电弧（Arc）生成，仪器可能中断或提示警告。

5. 电穿孔完成后，立即将细胞转移到预热培养液中恢复（如含血清的培养基，37 °C孵育）。静置数分钟至十几分钟后再进行定植或继续实验。

3.4 注意事项

• 若出现电弧：可能原因包括气泡存在、液面过高、离子强度过高。解决方法：重新制备样品、降低电导、换杯或降低体积。

• 转染效率低：可能由缓冲液不合适、DNA/RNA质量差、电压设置过低等因素引起。建议优化缓冲条件、检测核酸纯度、适当调高电压。

• 细胞存活率低：若电压过高、电容/宽度设置过大、样品没冷却或恢复不及时，可能造成高死亡率。建议适度降低强度、缩短时间、立即转移至温暖培养环境。

四、典型应用场景

• 哺乳动物细胞转染：使用指数波模式，可导入质粒、siRNA、CRISPR/Cas9构建等。仪器预设程序丰富，支持快速启动。

• 细菌/酵母转化：使用方波模式，快速高电压脉冲适应较小、壁坚细胞。系统支持 0.1 cm/0.2 cm 比色皿，更适合微量样品。

• 原代细胞、电融合、转染难转细胞系：由于设备参数范围广、模块化设计灵活，因此可用于高度定制的实验需求。

• 实验重复性强：由于支持保存和调用实验参数、具备电弧防护功能（PulseTrac™ 电路）等，适合高通量或标准化实验室使用。

五、维护保养与长期使用

5.1 日常维护

• 每次操作完毕，取出比色皿，使用干净的无纺布或棉布擦拭 ShockPod 电击槽、电极接触面，确保无残留液体。

• 关闭设备电源，断开电源插头。若长期不使用，建议覆盖防尘罩存放。

• 定期检查电极表面是否有腐蚀、裂纹或污垢；若有损坏应及时更换。

5.2 校准与检测

• 建议按实验室管理制度定期对设备进行校准，包括检测输出电压、电流、电容实际值、脉冲时间是否准确。

• 保留操作日志，记录每次电穿孔的参数与存活率、转染效率，以便日后追溯和优化。

5.3 长期注意事项

• 尽量避免强烈震动或搬动设备，因为模块化结构中可能导致内部连接松动。

• 保证电源稳定，避免电压骤变或电源杂波对设备造成损害。

• 若设备出现异常警告（如电阻值异常、电弧频繁），应立即停止操作并进行专业检查，以免影响实验结果或损坏样品。

六、故障排查指导

下面列出几种典型故障情况及建议处理办法：

• 电弧频繁出现：常见原因包括样品中有气泡、液面过高、电极接触不良、高离子强度溶液。建议重制样品、降低电导、选择合适比色皿、检查电极连接。

• 转染效率低 / 样本未被导入：可能是缓冲液选择不当、电压/参数设定不合理、细胞状态差。建议检查缓冲体系、核酸质量、优化电压与时间常数。

• 细胞死亡率高：原因可能为电压过高、脉冲时间过长、细胞未冷却或恢复条件差。建议降低强度、缩短处理、立即转移至适温培养环境。

• 设备不响应、脉冲按钮未激活：可能是参数未设定或模式未选择，或者模块连接不良。确认已选择波形模式、设定参数并按 Enter 键、模块已正确安装。

• 输出电压不达标或不稳定：可能为电源问题、电极老化、内部维护欠缺。建议检查电源、连接线、设备是否需要专业维护或校准。

七、总结

综上所述，1652660 型号的伯乐 Gene Pulser Xcell 系统是一款在科研领域广泛使用、功能强大、灵活性高的电穿孔仪器。凭借其模块化设计、广泛适用的波形模式、丰富的参数可调节性、良好的重复性和可靠性，它适合从基础科研到应用研究的多个场景。
通过严格遵守上述操作指南、做好细胞与样品的准备、精准设定参数、维护设备状态，并结合实验结果反馈优化流程，您将能有效提升实验效率、降低失败率、延长设备使用寿命。
如果您在具体参数优化、特殊细胞类型（如悬浮细胞、原代细胞、难转染系）或实验方案设计上有疑问，可进一步咨询技术支持或查阅伯乐提供的完整说明书与技术文档。