质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司一、概述

伯乐电穿孔仪 165-2661 是一款专为基因转化、分子导入和细胞电穿孔实验设计的高性能仪器。
其核心运行原理是：通过在极短时间内施加高压电场，使细胞膜瞬时产生可逆微孔，从而让外源 DNA、RNA、蛋白质或其他分子进入细胞内部。

在运行过程中，165-2661 将高压能量精确地储存在电容中，并在控制系统指令下迅速释放。
仪器内置的自动校准、能量检测与安全保护机制，使其能够在高压环境下安全、稳定地工作。

正确掌握其运行方法，不仅能提高实验成功率，还能最大限度延长设备寿命并确保操作者安全。

二、运行准备阶段

1. 实验环境要求

• 室温控制在 20–25 ℃；

• 相对湿度 ≤ 70%；

• 工作台平整、绝缘、防潮；

• 避免阳光直射与电磁干扰源；

• 周围无易燃易爆物品。

2. 仪器检查步骤

在运行前应逐项检查：

1. 电源线与接地线连接稳固；

2. ShockPod 电击槽内部干燥、无盐渍或液体残留；

3. 电击杯表面清洁无裂痕；

4. 通风口畅通，风扇运转正常；

5. 打开电源后系统自动自检，屏幕显示 “SELF TEST PASSED”；

6. 若出现报警代码，应立即停止操作，查明原因。

3. 样品与耗材准备

• 细胞样品：处于对数生长期，活性高；

• 缓冲液：低离子强度（导电率 < 1.5 mS/cm），常用 10% 甘露醇或蔗糖缓冲液；

• 外源分子：高纯度 DNA/RNA/蛋白，无盐残留；

• 电击杯：按实验类型选择 0.1 cm、0.2 cm 或 0.4 cm 间距；

• 预冷步骤：样品与电击杯在冰上放置 5–10 分钟，以降低热损伤。

三、开机与系统初始化

1. 接通电源后，主机自动检测高压模块、电容、电阻及盖锁状态；

2. 屏幕进入主菜单界面，显示上次使用参数；

3. 当指示灯由红转绿，表示系统处于 “READY” 状态，可进行下一步操作。

初始化过程确保电路稳定、参数准确，是运行前的必要步骤。

四、参数设置方法

1. 进入参数设置界面

按 “MENU” 键进入系统设置，选择 Manual Setup（手动） 或 Preset Protocol（预设方案）。

2. 主要参数说明

3. 参数校验

• 确认设定的电压、电容值在仪器允许范围内；

• 电极间距与样品体积匹配；

• 系统自动计算时间常数 τ（τ = R × C），并在界面显示。

4. 保存参数

按 “SAVE” 键，输入实验名称（如 Ecoli-2000V-25uF），以便后续调用。

五、样品装载步骤

1. 将预冷细胞与外源 DNA 混匀；

2. 用无菌移液器吸取样品注入电击杯（约占 70–80% 体积）；

3. 轻轻敲击杯壁排除气泡；

4. 用干净纱布擦拭杯外壁；

5. 将电击杯放入 ShockPod 电极槽中；

6. 合上盖锁至“咔哒”定位，系统显示 “LID CLOSED – READY TO RUN”。

此步骤确保电极接触良好和安全闭锁，防止放电异常。

六、运行与放电过程

1. 充电阶段

• 按 “PULSE” 键启动充电；

• 屏幕显示 “CHARGING…”；

• 当达到设定电压后，提示 “READY TO PULSE”。

2. 放电阶段

• 按 “ENTER” 键执行放电；

• 系统自动释放储能电容的能量；

• 屏幕显示实际电压、电流与时间常数 τ；

• 放电持续时间通常为 4–8 ms；

• 放电结束后显示 “COMPLETE” 并记录数据。

3. 自动放电保护

实验结束后，系统会自动在 5–10 秒内释放残余电荷，确保操作安全。

七、样品回收与培养

1. 放电结束后静置 10 秒；

2. 打开盖锁，取出电击杯；

3. 将样品立即转入适温培养液中恢复。

恢复阶段允许细胞修复膜结构并启动基因表达。

八、实验数据记录

165-2661 自动记录每次运行参数，包括：

• 设定电压、电容、波形类型；

• 实际输出电压与电流；

• 时间常数 τ；

• 能量释放率（Energy Efficiency，%）；

• 实验日期与编号。

数据导出步骤

1. 插入 USB 存储设备；

2. 菜单选择 “Data → Export”；

3. 选择记录批次；

4. 导出文件格式：.csv。

导出的文件可直接导入 Excel 进行统计分析与报告生成。

九、安全运行规范

1. 仪器运行前确保盖锁闭合；

2. 严禁触摸 ShockPod 内电极；

3. 样品液体不得含盐或气泡；

4. 放电后需等待至少 10 秒再开盖；

5. 操作时佩戴绝缘手套；

6. 若出现闪光、异味或异常声响，立即断电；

7. 避免连续高频放电，防止电容过热；

8. 操作完毕后关闭电源并拔掉插头。

十、运行后的清理与维护

1. 清理步骤

• 关闭电源并等待放电完成；

• 使用无水乙醇或 70% 酒精擦拭 ShockPod 内壁、电击杯外部；

• 保持设备干燥；

• 每次实验后检查电极触点是否氧化。

2. 定期维护

维护工作确保系统运行长期稳定。

十一、运行中的常见问题

十二、运行优化建议

1. 样品导电率

• 维持在 0.5–1.5 mS/cm；导电性过高易引发电弧。

2. 电场强度

• 起始电压取推荐值的 80%，逐步调整至最优点。

3. 时间常数

• τ 控制在 4–8 ms 区间效果最佳。

4. 多脉冲运行

• 对哺乳动物细胞可使用 2–3 次脉冲模式，间隔 1 s。

5. 温度控制

• 所有样品与电击杯预冷可减少热效应。

6. 数据积累

• 建议建立参数数据库，记录转化效率与细胞存活率的对应关系。

十三、运行性能验证

每月进行一次性能验证，确认系统输出稳定性。

1. 电压验证：输出偏差 ≤ ±2%；

2. 时间常数验证：与理论值差 ≤ 0.05 ms；

3. 能量释放率：≥ 90%；

4. 重复放电稳定性：100 次放电波动 < 1.5%。

若不符合要求，应执行系统自动校准功能。

十四、运行逻辑简述

165-2661 的整个运行流程可概括为八个步骤：

1. 系统自检：启动后检测电路与温度；

2. 参数设定：输入电压、电容、波形等；

3. 充电阶段：电容储能至目标值；

4. 状态检测：确保盖锁闭合、安全回路正常；

5. 放电执行：触发高压脉冲；

6. 信号采集：记录电压曲线与 τ 值；

7. 数据存储：保存实验记录；

8. 安全放电：自动释放残余电荷。

该流程完全由中央处理单元自动控制，保证每次运行精确一致。

十五、运行实例

实例 1：E. coli 质粒转化

• 电压：2000 V

• 电容：25 µF

• 电极间距：0.2 cm

• 时间常数 τ ≈ 4.8 ms

• 成功率：> 90%

实例 2：CHO 细胞电穿孔

• 电压：650 V

• 电容：800 µF

• 波形：方波 × 2 次 (间隔 1 s)

• 时间常数 τ ≈ 7.2 ms

• 成功率：约 85%，细胞活性高。

这些实例说明正确运行可获得高效率与高存活率的结果。

十六、运行安全要点

• 严格遵守操作规范，不擅自修改高压参数；

• 不得在开盖状态下运行；

• 确保设备与操作者均良好接地；

• 使用绝缘工具处理电击杯；

• 每次实验结束后关闭电源并放电。

十七、长期运行与性能维护

165-2661 支持连续运行模式，适合高通量实验。
但为保证稳定性，应注意：

1. 每放电 20 次后暂停 2 分钟降温；

2. 每天工作结束后执行一次空载测试；

3. 每月清洁电极触点，防止氧化。

长期维护得当，仪器可连续稳定工作超过 100 000 次放电周期。

十八、结果分析与反馈

运行结束后可利用导出的数据文件进行统计分析：

• 电压与时间常数关系；

• 转化效率与电场强度趋势；

• 不同参数下的细胞存活率；

• 能量释放曲线。

通过分析，可建立各体系的最优运行条件库，提高实验可重复性。

十九、运行特点总结

1. 精确能量控制：电压、电容双重闭环调节；

2. 智能反馈机制：实时采集与自校准；

3. 多波形可选：指数衰减波与方波自由切换；

4. 高安全设计：盖锁保护、过压报警、自动放电；

5. 强数据功能：自动记录与导出；

6. 兼容多体系：适用于细菌、酵母、动物与植物细胞；

7. 稳定可靠：长时间运行偏差极小。