质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、仪器简介

伯乐电穿孔仪 165-2661 是一款新一代高性能电转化仪器，用于基因导入、细胞转染、蛋白质传递以及药物递送等生物实验。
该设备基于电穿孔原理，通过短时间高压脉冲在细胞膜上产生可逆性微孔，使外源分子能够穿透细胞膜进入细胞内部。

165-2661 型号在前代 165-2660 的基础上进行了系统升级：

• 电压控制更精确；

• 输出波形更稳定；

• 数据存储容量更大；

• 安全保护系统更加完善。

该仪器广泛应用于分子生物学、细胞工程、医学基因研究及生物制药开发等领域，是科研和教学中不可或缺的核心设备之一。

二、技术参数

三、结构组成

伯乐电穿孔仪 165-2661 采用模块化设计，主要由以下部分构成：

1. 主机系统

包括高压电源、能量储存电容、波形控制电路、主控芯片和散热模块，是整机的能量与控制核心。

2. ShockPod 电击槽

用于放置电击杯，是电能传递与放电的执行部件。ShockPod 内置安全盖锁检测装置，可防止未锁闭时放电。

3. 模块接口区

后部设有模块插槽，可根据实验需求插入 CE（电容扩展）或 PC（脉冲控制）模块。

4. 操作界面

前面板设有 LCD 显示屏与按键区，包括：

• MENU：主菜单；

• ENTER：确认操作；

• SAVE：存储参数；

• PULSE：执行放电；

• 方向键：调整参数值。

5. 安全保护系统

包含过压保护、温控保护、自动放电、盖锁检测与短路保护等功能，确保实验安全可靠。

四、工作原理

电穿孔过程的基本原理为：

1. 在细胞悬液中施加高压电场，使膜电位达到临界值；

2. 膜结构发生暂时性重排，形成纳米级可逆孔；

3. 外源 DNA、RNA 或蛋白质分子在电场作用下穿过膜孔进入细胞质；

4. 电场解除后，细胞膜在数秒内恢复完整性。

165-2661 的高精度脉冲控制系统可在毫秒级时间内实现能量释放与电压衰减，使穿孔效果稳定且细胞存活率高。

五、安装与开机步骤

1. 安装环境要求

• 放置于干燥、平整、防震的实验台；

• 避免阳光直射与强磁场干扰；

• 环境温度 20–25℃，湿度 40–60%；

• 预留通风空间≥10 cm。

2. 接线检查

• 插好电源线并接地；

• 检查 ShockPod 是否干燥；

• 确认模块接口连接牢固。

3. 开机操作

• 打开电源开关；

• 系统自动执行自检（检测温度、盖锁、电压模块等）；

• 自检通过后屏幕显示“READY”即进入主界面。

六、操作流程

（一）样品准备

1. 细胞处理：
   使用对数生长期细胞，洗涤 2–3 次以去除盐离子；
   以低离子缓冲液（如 1 mM HEPES）重悬。

2. 样品浓度：

• 细菌：1×10⁹ cells/mL；

• 酵母：1×10⁸ cells/mL；

• 哺乳动物细胞：1×10⁶–1×10⁷ cells/mL。

3. 样品混合：
   加入外源 DNA/RNA 并轻轻混匀，冰上预冷 5 分钟。

（二）参数设置

按“MENU”进入设置界面，依次设定：

1. 电压（Voltage）：10–3500 V；

2. 电容（Capacitance）：25–3275 μF；

3. 电阻（Resistance）：50–1000 Ω 或 ∞；

4. 波形类型（Waveform）：指数衰减波或方波；

5. 脉冲次数（Pulse Count）：1–10 次。

系统自动计算时间常数（τ），并显示预估能量。
设置完成后按“ENTER”确认。

（三）电击操作

1. 向电击杯中加入 80% 容积的样品（约 0.8 mL）；

2. 轻轻敲击杯壁排除气泡；

3. 将电击杯放入 ShockPod，关闭上盖并确认“咔哒”声；

4. 屏幕提示“LID CLOSED – SAFE TO RUN”；

5. 按“PULSE”键开始充电；

6. 当提示“READY TO PULSE”时按“ENTER”放电；

7. 放电结束后屏幕显示电压、时间常数、能量比例等结果；

8. 屏幕出现“COMPLETE”后方可开盖。

（四）样品回收

放电后立即将样品取出并转入恢复培养基中：

• 细菌样品 37℃ 复苏 30 分钟；

• 酵母样品 30℃ 复苏 60 分钟；

• 哺乳动物细胞 37℃ 复苏 1–2 小时。

复苏后进行转化筛选或后续培养。

七、安全注意事项

1. 放电操作前必须确认盖锁闭合；

2. 放电时严禁触摸仪器与电击杯；

3. 不可使用含盐缓冲液；

4. 实验间隔不少于 10 秒；

5. 放电后等待 5 秒再开盖；

6. 操作人员需佩戴绝缘手套；

7. 禁止私自拆卸主机或模块；

8. 若出现异味或闪光，应立即断电。

八、数据记录与导出

165-2661 具备自动数据存储功能，每次实验完成后可自动保存参数与结果。

导出步骤：

1. 插入 USB 存储设备；

2. 进入菜单“Data Export”；

3. 选择文件格式（CSV 或 TXT）；

4. 系统自动生成文件，便于数据分析与归档。

九、常见问题及排除

十、维护与保养

1. 每次实验后清洁电击杯与 ShockPod；

2. 使用无水乙醇擦拭外壳，保持干燥；

3. 每周检查电源线、接地线及风扇；

4. 每月检测输出电压与时间常数误差；

5. 每年由专业人员进行系统校准与固件升级。

注意：ShockPod 内部必须保持干燥，任何液体进入都可能导致短路或电弧放电。

十一、存放与运输

• 存放温度：10–30℃，湿度：30–60%；

• 环境应干燥通风，无腐蚀性气体；

• 长期停用时断开电源，覆盖防尘罩；

• 每月开机运行 5 分钟保持系统稳定；

• 运输时使用原包装箱并避免剧烈震动。

十二、实验优化建议

1. 选择适当电场强度：
   电场强度 (E=V/d) 应控制在细胞类型允许范围内。

• 细菌：10–12 kV/cm；

• 酵母：6–8 kV/cm；

• 哺乳动物细胞：1–3 kV/cm。

2. 波形选择：

• 指数衰减波适合细菌、酵母；

• 方波适合哺乳动物细胞。

3. 时间常数控制：
   一般保持在 4–8 ms 范围可获得高导入率与良好存活率。

4. 缓冲液优化：
   使用低导电 buffer，可显著减少电弧风险。

5. 温度控制：
   电击前预冷样品与电击杯，减小热效应。

6. 多脉冲模式：
   对敏感细胞可采用低电压多次放电方式，提升导入效率并降低损伤。

十三、应用范围

伯乐电穿孔仪 165-2661 适用于以下实验：

• 质粒 DNA 转化与基因克隆；

• 真核细胞瞬时转染与稳定表达；

• CRISPR/Cas9 系统导入；

• RNA 或蛋白质转运实验；

• 植物原生质体与藻类基因导入；

• 药物与纳米材料细胞递送研究。

十四、性能验证与校准

每半年应进行一次性能验证。

1. 输出电压校准：
   用高压探针测量实际电压，误差 ≤ ±2%。

2. 时间常数测试：
   使用标准电阻与电容模拟样品测量 τ，误差 ≤ ±0.05 ms。

3. 波形监测：
   外接示波器，波形应平滑无突变。

4. 安全系统检测：
   检查盖锁、过压、过温保护均应正常响应。

十五、年度维护计划

十六、实验记录模板

所有实验数据应存档保存，以便追溯与重复验证。

十七、安全提示

• 电击过程中严禁操作盖锁或插拔模块；

• 不得在潮湿环境下运行仪器；

• 若发生短路、烟雾或异味，应立即断电；

• 禁止未经授权人员自行维修；

• 实验区域应远离液体容器与金属器具。