伯乐电穿孔仪165-2660使用手册

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质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、仪器简介

伯乐电穿孔仪 165-2660 是一款高性能的生物电转化设备，专为基因导入、细胞融合及分子递送实验设计。
其原理是通过高压脉冲使细胞膜瞬时形成可逆性微孔，外源 DNA、RNA 或蛋白分子即可进入细胞内部，从而实现转化或转染。

该设备具有高电压精度、波形稳定、操作简便和安全保护完善的特点，适用于细菌、酵母、真核细胞及植物原生质体的分子生物学研究。

二、技术参数

项目	参数范围
电压输出范围	10–3000 V（连续可调）
电容范围	25–3275 μF
电阻范围	50–1000 Ω 或 ∞
波形类型	指数衰减波、方波
脉冲次数	1–10 次
时间常数	0.05–10 ms
电源要求	AC 220 V ±10%，50/60 Hz
功率	200 W
尺寸	310 × 280 × 150 mm
重量	约 7.5 kg
工作温度	20–25℃
相对湿度	30–70%

三、结构组成

伯乐电穿孔仪 165-2660 采用模块化设计，结构清晰，便于维护和扩展。

1. 主机部分

包括高压发生器、电容组、放电控制模块、电源系统和微处理器控制单元，是整个仪器的核心。

2. ShockPod 电击槽

用于容纳电击杯并完成高压放电过程，内置电极接触端与盖锁安全检测装置。

3. 模块系统

可根据实验类型选择 CE 模块（电容扩展）或 PC 模块（方波控制），实现多种电击模式。

4. 操作面板

包括 LCD 显示屏、方向键、功能键（MENU、ENTER、SAVE、PULSE）等，用于参数设置与数据读取。

5. 安全系统

内置多重安全机制：盖锁检测、过压保护、过温报警、自动放电及电弧防护。

四、原理简述

当电场强度达到细胞膜击穿阈值时，膜两侧电位差导致脂质双层重排，形成可逆微孔。外源分子在电场作用下进入细胞，随后细胞膜自我修复。

关键参数：

电压与电场强度决定穿孔效果；
电容决定能量释放速度；
电阻与时间常数决定放电波形；
波形类型影响细胞响应特性。

科学控制这些参数即可实现高效、稳定的电穿孔实验。

五、使用环境要求

温度：20–25℃；
湿度：30–60%；
工作台需平整、防震、干燥；
电源稳定且接地良好（接地电阻 ≤ 1 Ω）；
环境无腐蚀性气体、强磁场及水汽；
不可与高功率设备共线使用。

六、开机与初始化

确认电源线和接地线连接牢固；
检查 ShockPod 内部干燥清洁；
插入模块（CE 或 PC），确认卡扣到位；
打开电源开关，仪器自动执行系统自检；
自检通过后，显示“READY”进入主界面。

若出现错误代码，应根据提示排查（如盖锁未闭合、电压异常、风扇停转等）。

七、参数设置

仪器提供三种工作模式，操作人员可根据实验需求灵活选择。

1. 预设模式（Preset Protocol）

内置多种常用细胞类型的推荐参数。

进入主菜单 → 选择“Preset Protocol”；
选择目标细胞类型（如 E. coli、Yeast、CHO 等）；
系统自动载入参数。

2. 手动模式（Manual Setup）

用户可自定义所有参数。

电压：10–3000 V；
电容：25–3275 μF；
电阻：50–1000 Ω 或 ∞；
波形：方波 / 指数衰减波；
脉冲次数：1–10 次；
系统自动显示时间常数。

3. 用户程序模式（User Program）

保存常用实验方案，最多可存储 99 组参数。
路径：MENU → User Program → Save/Load。

八、运行方法

1. 样品准备

使用健康、活性良好的对数生长期细胞；
洗涤细胞以去除高盐培养基；
使用低盐缓冲液（如无离子 PBS）；
重悬浓度：

细菌：1×10⁹ cells/mL；
酵母：1×10⁸ cells/mL；
哺乳动物细胞：1×10⁶–1×10⁷ cells/mL；

加入 DNA/RNA 溶液并轻轻混匀；
将样品与电击杯一同在冰上预冷 5 分钟。

2. 加样与装杯

将约 80% 容积样品加入电击杯；
轻敲杯壁排除气泡；
放入 ShockPod 内槽，确认电极接触良好；
关闭上盖，听到“咔哒”声即表示锁定。

3. 放电操作

按 “PULSE” 键启动充电；
显示屏提示 “CHARGING…”；
当提示 “READY TO PULSE” 时按 “ENTER”；
放电完成后屏幕显示电压、时间常数和能量释放值；
放电结束后等待“COMPLETE”提示再开盖。

4. 样品恢复

放电后立即将样品转移至恢复培养基中，按实验类型培养：

细菌：37℃，30 分钟；
酵母：30℃，60 分钟；
哺乳动物细胞：37℃，1–2 小时。

九、安全操作规范

放电前必须确保盖锁闭合；
实验时不得接触 ShockPod、电击杯或连接线；
禁止使用含盐或高导电缓冲液；
每次放电间隔至少 10 秒；
若出现电弧或异味，应立即断电；
使用稳压电源，避免电压波动；
严禁私自拆解或改装仪器；
放电时人员应远离金属器具；
保持 ShockPod 干燥，防止漏电；
电源线、保险丝应由专业人员更换。

十、数据记录与导出

1. 自动记录

每次实验后系统自动保存：

放电电压（Vout）；
时间常数（τ）；
电阻（Ω）；
能量释放比例（%Energy）；
日期与编号。

2. 导出方法

插入 USB 存储设备；
进入菜单“Data Export”；
选择格式（CSV 或 TXT）；
文件自动生成，可导入电脑分析。

十一、常见问题及排除

问题现象	可能原因	解决方法
仪器无法启动	电源线松动或保险丝损坏	检查电源并更换保险丝
电弧闪光	缓冲液含盐或有气泡	使用低盐 buffer、排除气泡
时间常数偏短	样品导电性过高	调整 buffer 离子浓度
输出电压偏低	模块接触不良或电源不稳	重新插紧模块或使用稳压器
无法放电	盖未锁定或系统错误	检查盖锁状态并重新设置
风扇噪音大	灰尘堆积	清理通风口与风扇
数据导出失败	USB 未识别	更换存储设备

十二、日常维护与保养

1. 每次使用后

关闭电源并拔下插头；
用无水乙醇擦拭外壳和操作面板；
清洁 ShockPod 内槽并晾干；
电击杯冲洗干净后放回包装盒。

2. 每周检查

检查电源线、风扇、接地线；
清理通风口灰尘；
检查电极表面有无氧化。

3. 每月维护

测试电压输出精度；
校正时间常数；
检查模块插口是否松动。

4. 每年维护

由专业技术人员进行高压系统检测与软件升级；
更换风扇滤网与老化部件。

十三、存放与运输

存放环境温度 10–30℃，湿度 30–60%；
环境干燥通风，远离腐蚀性化学品；
不可堆放重物在设备上方；
长期停用时覆盖防尘罩；
每月通电运行 5 分钟保持系统活性；
运输时使用原包装箱并保持水平。

十四、实验优化建议

电压控制：电压过低转化率低，过高则细胞死亡，应逐级优化；
电容选择：大电容延长能量释放时间，有利于真核细胞转化；
波形调整：细菌适用指数衰减波，真核细胞适用方波；
预冷操作：样品与电击杯预冷 4℃ 提高存活率；
多脉冲策略：真核细胞使用 2–3 次低电压脉冲可提升导入率；
恢复时间：电击后及时转入培养基，有助于细胞修复。

十五、性能验证与校准

为保证设备长期准确运行，应定期执行以下校验：

项目	方法	允许误差
输出电压	标准高压探头测量	±2%
时间常数	外部示波器测定	±0.05 ms
波形平滑性	示波器观察	无畸变
安全系统	测试盖锁与过压保护	响应正常