伯乐电穿孔仪 165-2660 是一款高性能的基因导入与电转化设备,用于细菌、酵母、植物原生质体及真核细胞的电穿孔实验。该仪器通过瞬间高压脉冲作用于细胞膜,使膜结构产生可逆性微孔,从而实现外源 DNA、RNA 或蛋白质的导入。
设备具备高精度的电压控制、可调波形输出、自动检测与数据记录功能,适合科研实验室、医药研发机构及教学单位使用。其操作简便、重复性高、安全防护完善,是分子生物学实验中常用的关键仪器之一。
电穿孔的基本原理是利用高压脉冲在细胞膜上产生电场梯度,使细胞膜局部破裂形成可逆微孔。当外源分子处于电场中时,在电驱动作用下进入细胞。随后,电场移除,细胞膜自然修复,外源分子留存在细胞内,实现转染或转化。
伯乐电穿孔仪 165-2660 采用高压储能电容与高速放电开关技术,通过控制放电电压、电容容量、脉冲时间等参数实现不同类型的电场波形,包括指数衰减波和方波两种主要模式。
主机负责控制电压输出、参数设定与能量管理。内置微处理系统可进行自动检测与数据存储。
用于放置电击杯并传递高压脉冲信号。内置安全闭锁系统,当盖未闭合时,仪器无法执行放电。
用于扩展放电电容值,适合指数衰减波操作,可调整时间常数与能量释放速率。
控制方波输出、电阻负载与脉冲次数,适用于真核细胞或多脉冲实验。
三种规格:0.1 cm、0.2 cm 和 0.4 cm,用于不同细胞类型。杯体采用绝缘塑料,电极镀金处理,导电均匀且抗腐蚀。
环境温度保持在 20–25 ℃,湿度 ≤ 80%。
使用独立接地插座,电源电压为 220 V ±10%。
工作台干燥、防震、远离金属导体与易燃物。
保证仪器后方通风良好,不可堵塞散热口。
检查电源线及高压线缆是否完好。
确认 ShockPod 盖锁结构正常。
检查电击杯无裂纹与液体残留。
模块插入牢固,主机处于“OFF”状态。
打开电源后进行自检,屏幕显示 “READY” 方可操作。
选取对数生长期的细胞,活性高、状态良好。
用低离子强度缓冲液洗涤 2–3 次,去除培养基中的盐分。
调整细胞浓度至 1×10⁶–1×10⁷ cells/mL。
将 DNA、RNA 或质粒溶液加入细胞悬液中,轻轻混匀。
将混合液预冷 5 分钟,以降低电击热效应。
将主机置于平稳台面。
插入 ShockPod 电击槽至前端接口并锁定。
若使用 CE 或 PC 模块,在断电状态下插入后端扩展接口。
连接电源线并接地。
打开电源开关,待仪器完成自检。
设备自检内容包括电源稳定性、电压模块功能、温度状态和接口检测。若屏幕出现错误提示,应立即断电检查。
开机后主界面显示三种模式选项:
Preset Protocol(预设程序):系统内置常见细胞类型参数。
Manual Setup(手动设置):用户可自定义电压、电容、电阻、波形等。
User Program(用户程序):调用或保存自定义参数。
通过方向键选择模式后按 “ENTER” 进入设置界面。
两种可选波形:
指数衰减波(Exponential Decay):适用于细菌、酵母、植物原生质体。
方波(Square Wave):适用于哺乳动物细胞及多脉冲转染。
电压范围:10–3000 V。
调整步进:1 V。
常见设定:
细菌:1800–2500 V
酵母:1000–1500 V
哺乳动物细胞:300–800 V
通过上下键调节后按 “ENTER” 确认。
| 参数 | 范围 | 功能说明 |
|---|---|---|
| 电容 | 25–3275 μF | 决定能量储存与衰减速度 |
| 电阻 | 50–1000 Ω 或 ∞ | 控制放电速度及波形平滑度 |
| 脉冲时间 | 0.05–10 ms | 方波持续时间,可多次叠加 |
对于多脉冲模式,可设置脉冲次数(1–10 次)及间隔时间(1–10 秒)。
设定完成后可按 “SAVE” 保存为用户程序,系统自动分配编号。可随时通过 “LOAD” 调用历史参数。
将样品 100–400 μL 加入电击杯中。
检查液面平整、无气泡。
将电击杯水平放入 ShockPod 电击槽。
盖上安全盖,等待屏幕显示 “Cuvette Ready”。
按 “PULSE” 键进入充电状态,系统提示 “CHARGING”。
当提示 “READY TO PULSE” 时,按确认键开始放电。
放电瞬间完成,屏幕显示电压曲线及时间常数。
放电后等待系统显示 “COMPLETE”,再取出电击杯。
注意:放电过程中严禁触碰仪器及电击槽,以防高压伤害。
放电完成后立即将样品转移至恢复培养基中。
细菌恢复时间约 30 分钟,哺乳动物细胞 1–2 小时。
若液体溢出,应及时擦拭 ShockPod 内壁并保持干燥。
放电结束后,仪器自动生成实验数据:
输出电压
时间常数(τ)
样品电阻
能量释放百分比
数据可存储在内部存储区或导出至外部设备(USB 接口)。
建议用户建立实验记录表,记录样品类型、参数设置及结果,以便优化条件。
关闭电源开关并拔下电源线。
等待 10 秒,确保电容完全放电。
用无离子水冲洗电击杯,晾干备用。
检查 ShockPod 是否有液体残留,用干布擦拭。
用柔软布擦拭仪器外壳,保持清洁。
覆盖防尘罩,放置于干燥环境中。
| 问题 | 原因分析 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 电弧闪光 | 样品含盐或气泡 | 更换缓冲液,去除气泡 |
| 电压无输出 | 模块连接松动 | 重新插紧模块接口 |
| 屏幕无显示 | 电源线或保险丝问题 | 检查电源,必要时更换保险丝 |
| 样品死亡率高 | 电压过高或时间过长 | 降低参数重新实验 |
| 转化效率低 | 电压不足或细胞状态差 | 优化电压与细胞浓度 |
| 模块识别失败 | 接口脏污或接触不良 | 清洁插口重新连接 |
操作人员必须经过高压设备使用培训。
禁止在潮湿或导电表面上使用仪器。
放电过程中不得打开 ShockPod 盖。
严禁使用破裂或污染的电击杯。
电源线、接地线保持良好,禁止私自更换插头。
若出现异味、烟雾或异常声响,应立即断电。
不得将金属物体接触仪器接口。
使用完毕后确认完全断电再清洁。
温度控制
电穿孔操作前可将样品及电击杯置于冰上预冷 5 分钟,减少热损伤。
缓冲液优化
使用低离子强度缓冲液(如无钙无镁 PBS 或专用 electroporation buffer)。
电压梯度法
新细胞类型可从低电压逐级提升,找到最佳条件。
重复性检测
每种参数至少重复 3 次,以确保结果稳定。
数据分析
对比转化效率与细胞存活率,确定最佳脉冲组合。
每次使用后清洁仪器表面与电击槽。
定期检查风扇运行是否正常。
每三个月进行一次电压输出校准。
定期清理模块接口,防止灰尘积聚。
长期不使用时每月通电 5 分钟以保持电容活性。
电击杯建议使用 2–3 次后更换。
伯乐电穿孔仪 165-2660 由长沙实了个验仪器制造有限公司生产,提供 三年质保,只换不修 服务。
在质保期内,如出现性能故障或输出异常,可联系厂家技术支持更换整机或模块。
用户不得自行拆机维修,避免失去质保资格。
若操作过程中发生电弧闪光,应立即停止实验并断电。
若液体进入设备内部,应拔掉插头并用干布擦拭。
若人员触电,应立刻切断电源并实施急救。
若设备冒烟或发热异常,使用二氧化碳灭火器,不可用水。
操作结束后,应填写设备使用日志,记录状态与参数。
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