质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、前言

伯乐电穿孔仪 165-2661 是一款高性能电转化仪器，广泛应用于分子生物学、细胞工程、基因编辑及药物递送研究。
其核心功能是通过高压瞬时脉冲改变细胞膜通透性，使外源 DNA、RNA 或蛋白质进入细胞内部。
为了确保实验的成功率与安全性，操作人员需熟悉本仪器的操作步骤、参数设置原则及维护要求。

二、仪器结构与组成

1. 主机部分

• 高压模块：提供稳定的脉冲电压输出，范围 10–3500 V；

• 储能电容：用于控制能量释放速度与放电时间常数；

• 微处理控制单元：实现参数设定、自动检测、波形控制；

• 散热系统：保持仪器内部温度稳定，防止过热；

• 控制面板：显示电压、电容、时间常数、放电模式与温度信息。

2. ShockPod 电击槽

• 与主机连接，用于容纳电击杯；

• 内设安全盖锁系统，未闭合时无法放电；

• 可适配 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm 电击杯。

3. 电击杯

• 两电极间距决定电场强度；

• 材质为耐高压聚碳酸酯或石英玻璃；

• 用于承载样品，形成稳定电场环境。

4. 连接线与安全配件

• 高压导线连接主机与 ShockPod；

• 设有自动放电电阻与接地线，保障安全。

三、操作前准备

1. 环境要求

• 室温 20–25 ℃，相对湿度 ≤ 70%；

• 环境应干燥、无强电磁干扰；

• 工作台需绝缘、防静电。

2. 电源与接地

• 使用 AC 220 V ±10%，50/60 Hz 电源；

• 仪器必须可靠接地，接地电阻 ≤ 1 Ω；

• 禁止共用大功率设备插座。

3. 仪器检查

• 检查电击槽、ShockPod 内部是否干净；

• 电击杯无裂纹、干燥无水迹；

• 电缆接口牢固无松动；

• 面板显示与按键响应正常。

4. 样品准备

1. 细胞状态：取对数生长期细胞；

2. 缓冲液：去离子水或低离子缓冲体系（电导率 0.5–1.5 mS/cm）；

3. 外源分子：DNA、RNA 或蛋白质纯度高、无盐；

4. 混合比例：一般 DNA 加入量为 0.1–5 µg / 每 100 µL 样品；

5. 预冷：样品及电击杯预冷至 0–4 ℃ 以减少热效应。

四、仪器启动与界面操作

1. 开机自检

接通电源后，系统自动检测电压模块、电容模块、盖锁传感器及温控状态。
若显示 “SELF TEST PASSED”，表示仪器可正常运行。

2. 主界面功能

屏幕显示包括：

• Voltage（设定电压）

• Capacitance（电容）

• Resistance（电阻）

• Time Constant（时间常数）

• Pulse Mode（波形模式）

• Status（运行状态）

通过旋钮选择参数，按“ENTER”确认。

五、参数设置

1. 电压设定

• 范围：10–3500 V；

• 细菌体系：1800–2500 V；

• 酵母体系：1200–1600 V；

• 动物细胞：400–800 V；

• 植物原生质体：600–900 V。

2. 电容设定

• 范围：25–3275 µF；

• 电容越大，放电时间越长；

• 一般推荐时间常数 τ = 4–8 ms；

• 细菌多用 25 µF，哺乳动物细胞 500–1000 µF。

3. 电阻与波形

• 电阻：50–600 Ω，可自动匹配；

• 波形：指数衰减波或方波，按实验体系选择；

• 脉冲次数：1–10 次，间隔 0.5–2 秒。

4. 参数保存

设置完毕后选择 “SAVE PROTOCOL”，输入方案编号并保存，便于下次调用。

六、电击操作流程

步骤 1：样品装入电击杯

• 取 0.1–0.4 cm 间距的电击杯；

• 将样品加入，不超过最大容量的 80%；

• 去除气泡，以免电弧；

• 盖上盖子并放入 ShockPod 槽内。

步骤 2：盖锁检测

合上盖子，仪器检测盖锁状态并提示 “LID CLOSED – READY”。
未锁定时禁止放电。

步骤 3：放电执行

1. 按 “PULSE” 键充电；

2. 当屏幕提示 “READY TO PULSE” 时按 “ENTER”；

3. 仪器释放高压脉冲，同时记录实际电压与时间常数；

4. 放电完成后提示 “COMPLETE”；

5. 系统自动放电并冷却。

步骤 4：样品回收

等待 10 秒确认无残余电荷；
取出电击杯，立即将样品转入恢复液或培养基中；
轻轻混匀后按实验需求培养。

七、不同体系的操作参数参考

以上参数为参考值，可根据细胞种类、电导率与样品浓度微调。

八、实验后处理

1. 细菌与酵母

• 放电后立即加入 1 mL 预温培养液；

• 30–60 分钟恢复；

• 涂布平板培养。

2. 动物细胞

• 转入含血清培养基；

• 37 ℃、5% CO₂ 条件下培养；

• 1–2 小时后更换新鲜培养基。

3. 植物原生质体

• 放电后转入含甘露醇的缓冲液；

• 静置 1 小时后进行培养或分析。

九、实验数据记录

1. 自动记录

仪器自动保存以下数据：

• 设定与实际电压；

• 时间常数 τ；

• 放电次数与波形类型；

• 能量释放百分比；

• 电容、电阻值。

2. 数据导出

通过 USB 接口导出 CSV 文件，包含每次实验的运行参数与时间戳。

3. 实验报告

建议操作员在实验日志中记录：

• 样品编号与体系类型；

• 参数组合；

• 成功率、存活率与异常情况。

十、安全操作规范

1. 操作前必须阅读使用说明；

2. 放电过程中严禁触摸电极与 ShockPod；

3. 电击杯样品体积不得超过推荐上限；

4. 使用去盐样品，防止电弧；

5. 每次放电后等待 10 秒，确认放电完毕；

6. 实验区保持干燥，防止漏电；

7. 出现闪光、异味、异常响声时立即断电。

十一、常见错误与排查

十二、维护与保养

1. 日常保养

• 实验结束后关闭电源，拔掉插头；

• 清洁 ShockPod 与电击杯；

• 检查电缆与接地是否牢固；

• 用无水乙醇擦拭机身。

2. 定期维护

• 每 3 个月校准电压与电容模块；

• 每 6 个月清理散热风扇；

• 每年进行一次全面性能检测。

3. 电击杯保养

• 不得用金属刷清洁；

• 每次使用后立即冲洗并风干；

• 如出现变色或裂纹需更换。

十三、注意事项总结

1. 样品电导率对放电特性影响显著；

2. 电压、电容与时间常数必须协调；

3. 温度过高会导致细胞死亡，应适度冷却；

4. 避免频繁连续放电，间隔 ≥ 10 秒；

5. 校准与维护必须由专业技术人员执行。

十四、应急处理

1. 电击未完成：

• 检查电压是否达到设定值；

• 查看盖锁状态。

2. 电弧或短路：

• 立即断电；

• 清理残留样品并检查电极。

3. 仪器报警：

• 读取错误代码；

• 对照维修手册进行处理。

4. 人身安全：

• 若发生触电，应立即切断电源并实施急救。

十五、结果评估与优化

1. 评估指标

• 转化效率；

• 存活率；

• 时间常数与电压一致性；

• 重复性（偏差 ≤ ±10%）。

2. 优化策略

• 调整电容与电压组合；

• 使用适合的电击杯间距；

• 优化细胞浓度与预冷时间；

• 控制缓冲液离子强度。

3. 结果稳定性验证
   连续 5 次实验，转化效率波动不超过 15%，视为系统稳定。

十六、长期使用与存储

1. 长期不使用时，断电并拔除电源线；

2. 存放环境温度 10–35 ℃、湿度 ≤ 70%；

3. 不得放置于阳光直射或强腐蚀气体环境；

4. 电击杯与 ShockPod 分开存放，使用防潮袋密封；

5. 定期开机自检，防止电容老化。

十七、培训与操作资格

• 操作员须经过实验室安全培训；

• 熟悉设备结构与参数调节逻辑；

• 每年至少参加一次设备维护与安全复训；

• 实验记录需经技术负责人审核。