质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、概述

伯乐电穿孔仪 165-2661 是一款高精度、多模式的电转化仪器，广泛应用于基因导入、细胞转染、分子递送及蛋白质表达等生物学研究。
仪器通过控制电压、电容、电阻和时间常数等参数，形成特定的电场条件，使细胞膜在高压脉冲下产生可逆性微孔，从而实现外源分子的进入。

正确的参数设置是确保实验成功的关键。不同细胞类型、样品体积与导入物特性，均对电穿孔参数有不同要求。
本说明将系统介绍伯乐电穿孔仪 165-2661 的参数结构、设置方法及优化策略，以帮助使用者科学调整实验条件。

二、主要可调参数概述

电穿孔实验中涉及多个核心参数，每个参数均影响电场强度、能量释放和细胞反应。

三、电压（Voltage）设置

1. 原理说明

电压决定电场强度 E=V/dE = V/dE=V/d，是电穿孔最重要的参数。
电压越高，细胞膜受电场作用越强，孔洞形成越多，但过高电压会造成膜不可逆击穿，导致细胞死亡。

2. 设置范围

伯乐 165-2661 的电压可在 10–3500 V 连续可调。
不同实验体系推荐范围如下：

3. 调整策略

• 低电压：细胞存活率高，但转化效率低；

• 高电压：穿孔效率高，但热损伤严重；

• 建议采用“逐步升压法”，从低电压开始，每次增加 100–200 V，找到平衡点。

四、电容（Capacitance）设置

1. 原理说明

电容控制储能量及能量释放速度。
在固定电压下，电容越大，释放能量越多，放电持续时间越长。

2. 参数范围

165-2661 的电容范围为 25–3275 μF，分级可调。

3. 功能特征

• 小电容（25–125 μF）：放电快、峰值高、适合细菌；

• 中电容（200–800 μF）：能量平衡、适合酵母及真核细胞；

• 大电容（1000 μF 以上）：放电平缓、适合植物原生质体。

4. 设置示例

五、电阻（Resistance）设置

1. 原理说明

电阻控制电流衰减速率。高电阻可延长放电时间，低电阻可增加电流强度。

2. 参数范围

50–1000 Ω 或 ∞。

• 50–200 Ω：快速放电，适用于细菌；

• 200–500 Ω：平衡能量释放；

• 500–1000 Ω：慢速衰减，适合真核细胞。

3. 建议设置

若不确定实验体系电阻特性，可选择自动模式“Auto-R”。仪器将根据样品导电性自调电阻。

六、时间常数（τ）

1. 定义

时间常数是电流衰减到初值的 1/e 所需时间：

τ=R×Cτ = R × Cτ=R×C

2. 功能

反映能量释放速度与细胞受电场作用时间。

3. 推荐范围

若 τ <3 ms，可能导电性过强或样品含盐；
若 τ >10 ms，能量过高，需减小电容。

七、波形类型（Waveform）

165-2661 支持两种波形输出模式：

1. 指数衰减波 (Exponential Decay Wave)

• 特点：电流迅速衰减，能量集中；

• 适用：细菌、酵母、藻类；

• 优点：穿孔效率高，反应快；

• 缺点：电弧风险较高。

2. 方波 (Square Wave)

• 特点：电压恒定，作用时间可控；

• 适用：哺乳动物细胞、原生质体；

• 优点：温和稳定，细胞存活率高；

• 缺点：需要较高电容。

3. 选择建议

• 若实验目标为高导入效率：选择指数波；

• 若注重细胞活性与表达：选择方波。

八、脉冲次数与间隔设置

1. 脉冲次数

伯乐 165-2661 支持单次至 10 次脉冲。

• 单脉冲：适合细菌及酵母；

• 多脉冲：适合真核细胞（如 2–5 次）。

2. 间隔时间

多脉冲间隔 0.1–3 s 可调。

• 间隔过短：细胞来不及修复，死亡率高；

• 间隔过长：膜孔关闭，导入率下降。

推荐值： 1 s。

3. 实例设置

• 哺乳动物细胞：3 次脉冲，每次 5 ms，间隔 1 s；

• 植物原生质体：2 次脉冲，每次 8 ms，间隔 1.5 s。

九、模块设置

伯乐 165-2661 可通过插拔不同模块实现不同应用模式。

更换模块前必须关闭电源，并确认接口干燥清洁。

十、设置步骤与操作流程

1. 开机与自检
   开机后等待系统自动检测完毕（盖锁、电压模块、风扇状态等）。

2. 进入参数界面
   按 “MENU” 键进入设置界面。

3. 电压设定
   使用方向键调整至目标值，例如 2000 V。

4. 电容与电阻设定
   选择对应参数值，或使用自动模式（Auto-C、Auto-R）。

5. 选择波形
   在“Waveform”选项中选择 Exponential 或 Square。

6. 设置脉冲次数与间隔
   根据样品需求输入脉冲数与间隔时间。

7. 保存参数方案
   按 “SAVE” 键保存至编号（最多 99 组）。

8. 执行放电
   加入样品 → 关闭盖锁 → 按 “PULSE” → 等待“READY” → 按 “ENTER” 放电。

十一、参数联动与优化逻辑

电穿孔参数之间相互关联，调整需遵循能量平衡原则。

十二、典型实验参数参考表

这些参数可作为起始参考值，用户应根据实验目标进行微调。

十三、设置误差与修正

1. 电压偏差

若实测电压低于设定值，检查电源波动与模块接触。

2. 时间常数异常

若 τ 明显偏短，样品导电性过强，应稀释或更换缓冲液。

3. 波形畸变

若波形不平滑，检查电极是否氧化或 ShockPod 潮湿。

4. 放电能量不一致

可能因电容老化或储能不充分，应执行系统校准。

十四、常见错误设置与后果

十五、参数优化策略

1. 单因素优化法
   固定其他条件，仅调整电压或电容，绘制效率曲线。

2. 梯度法
   设置多组递增参数，确定最佳组合。

3. 响应曲面分析（RSM）
   通过统计建模分析多因素交互效应，适合高要求科研实验。

4. 预冷与复苏结合
   样品与电击杯预冷可减少热应激，提高重复性。

5. 低电压多脉冲替代高电压单脉冲
   对哺乳动物与植物细胞尤为有效。

十六、实验数据记录建议

每次实验应记录以下数据：

• 电压、电容、电阻、波形类型；

• 时间常数与放电次数；

• 样品浓度与缓冲液类型；

• 实际输出与生物学结果。

这些数据可导出为 CSV 文件，用于统计分析与重复性验证。

十七、安全提示

• 调整参数前确保盖锁关闭；

• 运行中不得触摸仪器与电击杯；

• 若电弧或异常声响出现，应立即停止实验；

• 调整模块或拔插接口前务必断电；

• 定期检查电压校准精度，防止超载运行。