质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、概述

伯乐（Bio-Rad）电穿孔仪165-2661是一款高精度的电转化设备，用于将外源DNA、RNA或蛋白质导入各种细胞体系中。其工作原理基于电场脉冲诱导细胞膜形成暂时性孔洞，从而实现物质跨膜转移。

由于该仪器在运行中涉及高电压、高瞬时能量释放与样品生物活性控制，使用时必须严格遵守安全规范和操作规程。
本篇文档将全面介绍165-2661在使用、维护、样品处理及实验环境方面的注意事项，确保科研人员在保证实验安全与准确性的前提下，充分发挥仪器性能。

二、操作前的安全检查

1. 环境要求

1. 温度与湿度

• 建议操作环境温度保持在20–25°C之间；

• 相对湿度应低于60%；

• 避免在潮湿或结露环境下使用，以防电击和电弧放电。

2. 工作台条件

• 工作台应平整、坚固、干燥；

• 避免将仪器置于导电金属台面；

• 仪器周围至少保持30 cm的通风空间。

3. 电源条件

• 输入电压：AC 220V ±10%，50/60Hz；

• 接地电阻应≤1 Ω；

• 严禁共用电源插座与加热设备或高频仪器。

4. 电磁干扰防护

• 远离强磁场、电焊机、高功率电机；

• 若实验室存在射频设备，应保持距离≥1 m。

2. 仪器自检

每次开机前，应进行以下检查：

若发现异常，应立即停止开机，检查电源或联系维护人员。

三、操作中的注意事项

1. 样品准备

1. 使用低离子浓度缓冲液（如10%甘油或HEPES溶液），禁止使用含盐量高的PBS、NaCl等溶液。

• 高导电性会引发电弧，导致放电失败和设备损坏。

2. 样品体积需与电转杯间隙匹配：

• 0.1 cm 间隙 → 20–40 µL；

• 0.2 cm 间隙 → 80–100 µL；

• 0.4 cm 间隙 → 300–400 µL。

3. 样品中应无气泡。气泡会导致局部电场集中，引发电弧放电。

4. 放电前必须将样品充分冰浴预冷，降低电击产生的热效应。

2. 参数设置

1. 设定电压与电容应依据细胞类型选择，避免盲目提高电压。

• 细菌体系：2.0–2.5 kV，25 µF；

• 酵母体系：1.2–1.5 kV，50 µF；

• 动物细胞：0.25–0.8 kV，250 µF。

• 常用参数：

2. 不同体系间的参数不可直接互换，需经实验验证。

3. 在多次放电实验中，连续操作间隔应≥30秒，以防电容过热。

4. 系统显示“ARC DETECTED”时，立即终止实验，重新检查样品电导率及电极状态。

3. 放电执行

1. 放电前务必确认安全盖关闭到位，仪器显示“Ready to Pulse”。

2. 启动放电后，不得触碰仪器、电极或电转杯。

3. 放电过程中，若出现异常响声或烟雾，应立即关闭电源并断开插头。

4. 每次放电结束后，等待5–10秒，确保内部残余电荷完全释放后再取出样品。

5. 实验过程中禁止多人同时操作同一设备。

四、样品及电极处理注意事项

1. 电极维护

1. 电转杯电极表面应保持清洁、无氧化层。
   可使用无水乙醇或去离子水擦拭；禁止使用酸碱性清洗剂。

2. 实验后立即清洗并干燥，防止盐分结晶。

3. 电极若出现变形或腐蚀，应及时更换。

2. 样品安全处理

1. 放电后的样品需立即放置于冰浴中冷却1–2分钟，防止热损伤。

2. 生物样品操作应在超净工作台内完成，避免污染。

3. 若使用病原体或转基因样品，须遵守生物安全实验规范（BSL-2级或以上）。

3. 液体防护

1. 严禁液体进入仪器内部，防止短路或高压击穿。

2. 放置样品前应检查电极槽是否干燥。

3. 若液体溢出，应立即关闭电源并用干布擦拭干净。

五、电气安全注意事项

1. 165-2661在工作时输出电压高达2.5 kV，操作人员必须经过培训后方可使用。

2. 严禁用湿手接触设备、电缆或插头。

3. 仪器运行时，操作人员应保持安全距离，避免身体接触金属导体。

4. 实验区内不得放置易燃溶剂，如乙醇、丙酮等。

5. 设备必须连接到独立接地插座，不得与其他电器共用电源线。

6. 当检测到电击风险（如静电感或电流异常），应立即停止使用并报告实验室安全员。

六、数据与参数记录注意事项

1. 每次实验前后均应记录以下数据：

• 电压设定值与实际值；

• 电容档位；

• 时间常数（τ）；

• 电弧状态；

• 样品信息与操作人。

2. 若实验结果出现异常，应保留设备运行日志，便于后期分析。

3. USB导出数据时，确保文件系统正确卸载，避免损坏记录文件。

4. 不得擅自修改设备内部系统时间或程序参数。

七、维护与清洁注意事项

1. 日常维护

2. 禁止事项

• 禁止拆卸主机外壳，内部含高压电路；

• 禁止使用未经认证的替代电转杯或电极；

• 禁止自行更换内部电容、电源模块；

• 禁止堵塞通风孔或在通风口放置物体。

3. 长期停用管理

若设备超过3个月未使用：

1. 应断开电源并覆盖防尘罩；

2. 存放环境湿度≤50%；

3. 定期通电30分钟以防电容老化。

八、常见错误与处理建议

九、安全操作规范

1. 每次实验均应由一名主操作者与一名观察员共同进行，确保安全监控。

2. 若仪器长期使用，应建立设备运行日志，记录维护与校验历史。

3. 实验室应配置灭火器、急救包及防电击绝缘垫。

4. 若发生设备冒烟、异味或响声异常，应立即断电并上报管理人员。

5. 实验过程中禁止使用移动电话及其他电子设备靠近高压区。

十、实验结果与设备保护的协同要点

1. 能量控制与细胞活性平衡

• 不可追求过高电压，应以细胞存活率为主要参考；

• 实验条件需通过逐步优化获得。

2. 温度控制的重要性

• 高能量放电会导致局部温升，须使用冰浴控制在4°C；

• 避免样品因热累积而影响膜修复。

3. 电场均匀性保障

• 电转杯必须保持水平放置；

• 液体覆盖电极完全且无气泡。

4. 重复性实验的标准化

• 同一条件下进行重复实验至少3次，记录所有参数；

• 时间常数偏差≤0.2 ms视为设备性能稳定。

十一、人员与实验室管理要求

1. 操作人员应具备电生理或分子生物学实验基础，熟悉高压安全知识。

2. 使用前必须经过设备培训，掌握仪器结构与急停操作。

3. 仪器操作手册应放置在设备旁便于查阅。

4. 实验室应设立专人管理，负责设备借用、维护及校准记录。

5. 所有维护操作须由专业技术人员执行，严禁自行拆卸。

十二、特殊实验条件下的附加注意事项

1. 高浓度DNA或大分子转染

• 溶液粘度增大时需降低电压或电容，防止能量过度集中。

2. 大体积电穿孔实验

• 应使用0.4 cm电转杯，并在两次放电间隔至少60秒。

3. 连续多样品电击

• 建议每10次放电后关闭仪器休息10分钟，以延长元件寿命。

4. 低温环境操作

• 环境温度低于15°C时，充电时间将延长，应适当调整操作节奏。

5. 高湿季节使用

• 需加装除湿设备，防止电极凝露导致电弧放电。

十三、设备使用寿命与可靠性维护

• 平均无故障运行时间（MTBF）超过8000小时；

• 若严格遵守操作规范，主机可稳定运行8年以上；

• 建议每年进行一次专业性能验证，包括电压输出、时间常数与安全系统检测；

• 过载、频繁放电及湿度过高将显著缩短设备寿命。